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    6種石化工業(yè)特征污染物對(duì)日本黃姑魚的毒性效應(yīng)

    2018-10-17 06:50:18尤炬炬郭遠(yuǎn)明冉麗紅金衍健孫秀梅
    山東化工 2018年18期
    關(guān)鍵詞:鄰二甲苯石化工業(yè)對(duì)二甲苯

    尤炬炬,郭遠(yuǎn)明,冉麗紅,金衍健,孫秀梅

    (浙江省海洋水產(chǎn)研究所,浙江省海洋漁業(yè)資源可持續(xù)利用技術(shù)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,浙江 舟山 316021)

    日本黃姑魚 (Nibea japonica) ,俗稱黑毛鲿,屬鱸形目,石首魚科,是石首魚科黃姑魚屬的一種魚類[1]。日本黃姑魚是一種具有高經(jīng)濟(jì)價(jià)值的養(yǎng)殖品種,國內(nèi)外對(duì)日本黃姑魚的研究比較廣泛,不僅涉及育苗、養(yǎng)殖,還有對(duì)營養(yǎng)品質(zhì)等方面的研究,但是對(duì)日本黃姑魚急性毒性效應(yīng)方面的相關(guān)研究較少[2]。

    由于日本黃姑魚的經(jīng)濟(jì)效益好,深受養(yǎng)殖戶的喜愛。對(duì)日本黃姑魚的研究工作開展至今已經(jīng)數(shù)十年[3]。目前國內(nèi)外對(duì)日本黃姑魚的研究主要涉及的是基礎(chǔ)生物學(xué)、育苗技術(shù)[4]、養(yǎng)殖技術(shù)[5]、能量學(xué)研究[6]、營養(yǎng)品質(zhì)和加工技術(shù)等方面[7]。作為經(jīng)濟(jì)魚類,對(duì)日本黃姑魚的研究也更加深入。張彩明等研究了Cr6+對(duì)日本黃姑魚超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)的影響[8-9]。査智輝等研究了高錳酸鉀、二溴海因等對(duì)日本黃姑魚幼魚的急性毒性[1,10]。王志錚等研究了Hg2+、Zn2+、Cr6+對(duì)黃姑魚幼魚的急性致毒效應(yīng)[11]。但是目前尚未見石化工業(yè)相關(guān)污染物對(duì)日本黃姑魚的毒性效應(yīng),尤其是石化工業(yè)特征污染物、苯、甲苯、二甲苯等對(duì)日本黃姑魚毒性效應(yīng)的相關(guān)報(bào)道。本試驗(yàn)選擇乙基苯、甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯和苯這6種石化工業(yè)特征污染物,研究其對(duì)日本黃姑魚的急性毒性效應(yīng),以期為養(yǎng)殖環(huán)境評(píng)價(jià)和相關(guān)污染事故處理提供參考依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 受試生物及試驗(yàn)藥劑

    本試驗(yàn)日本黃姑魚是2017年8月底從浙江省海洋水產(chǎn)研究所西軒養(yǎng)殖試驗(yàn)場(chǎng)運(yùn)回的日本黃姑魚作為試驗(yàn)生物,充氧立即運(yùn)回浙江省海洋水產(chǎn)研究所室內(nèi)暫養(yǎng),先放在經(jīng)消毒清洗過的聚乙烯塑料缸(容積80 L)內(nèi)暫養(yǎng),暫養(yǎng)期間自然光照,停止投餌,24h換水1/3,防止試驗(yàn)結(jié)果受到外界其它污染物的影響。挑選無傷病的健壯個(gè)體作為試驗(yàn)對(duì)象,規(guī)格為體長(9.81±0.92) cm,暫養(yǎng)4~5天備用。

    試驗(yàn)毒物為選取的石化工業(yè)特征污染物乙基苯、甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯、苯(分析純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。氯化鈉(優(yōu)級(jí)純,國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

    1.2 試驗(yàn)用水及容器

    試驗(yàn)用海水取自浙江省海水增養(yǎng)殖基地-浙江省舟山市普陀區(qū)西軒島附近的海域,經(jīng)過72h沉淀、二級(jí)砂濾,經(jīng)測(cè)定所用海水中不含有試驗(yàn)用石化工業(yè)特征污染物乙基苯、甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯、苯。室內(nèi)開空調(diào)保持室溫22 ℃,水溫19.1~19.8 ℃,鹽度27.8~29.3,pH 值7.87~8.13,DO >7.8 mg/L[4]。

    試驗(yàn)容器為50 cm× 30 cm× 30 cm的有機(jī)玻璃缸,實(shí)驗(yàn)前,所有用于實(shí)驗(yàn)的玻璃缸、工具等均以重鉻酸鉀溶液浸泡24h后用水反復(fù)沖洗,最后用純凈水沖洗干凈后備用。

    1.3 試驗(yàn)方法

    試驗(yàn)方法按照《近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測(cè)(GB 17378.7-2007 海洋監(jiān)測(cè)規(guī)范 第7部分)》[12]進(jìn)行。查找相關(guān)文獻(xiàn)并通過預(yù)實(shí)驗(yàn)確定毒物的試驗(yàn)濃度范圍,及時(shí)記錄試驗(yàn)期間日本黃姑魚的情況。試驗(yàn)在玻璃缸內(nèi)放10 L水,10條日本黃姑魚。

    依據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)選定的濃度范圍,按照濃度等差間距法[13-14],將乙基苯設(shè)30 、40 、50 、60 、70 mg/L 5個(gè)濃度組,甲苯設(shè)70 、80、90 、100 、110 mg/L 5個(gè)濃度組;間二甲苯設(shè)40 、45 、50 、55 、60 mg/L 5個(gè)濃度組;對(duì)二甲苯設(shè)40 、45 、50 、55 、60 mg/L 5個(gè)濃度組;鄰二甲苯設(shè)40 、45 、50 、55 、60 mg/L 5個(gè)濃度組;苯設(shè)130 、140 、150 、160 、170 mg/L 5個(gè)濃度組;每個(gè)濃度組分別設(shè)置2個(gè)平行組,一個(gè)空白對(duì)照組[15]。試驗(yàn)期間使用未染毒的網(wǎng)兜在10 min內(nèi)將日本黃姑魚轉(zhuǎn)移至試驗(yàn)玻璃鋼內(nèi),試驗(yàn)周期為96 h。

    試驗(yàn)期間不投餌、每24 h換水1/3。試驗(yàn)96 h內(nèi)連續(xù)觀察并記錄每組死亡數(shù)量、未死亡日本黃姑魚和瀕死日本黃姑魚的生理反應(yīng)并記錄日本黃姑魚的平均死亡情況。實(shí)驗(yàn)中,用玻璃棒觸碰日本黃姑魚尾部無任何反應(yīng)表示日本黃姑魚已完全死亡,及時(shí)將死亡的日本黃姑魚撈出。

    1.4 數(shù)據(jù)處理

    根據(jù)乙基苯、甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯和苯這6種石化工業(yè)特征污染物對(duì)日本黃姑魚的急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果,借助SPASS20.0建立不同觀察時(shí)段死亡概率單位-質(zhì)量濃度直線回歸方程,并采用直線內(nèi)插法分別計(jì)算的試驗(yàn)毒物在12 h、24 h、48 h和96 h的半致死濃度值(LC50)及96hLC5095 %置信區(qū)間。并采用安全濃度SC來計(jì)算各實(shí)驗(yàn)藥物的安全濃度。

    公式:SC= 96hLC50×0.01[16]。

    2 結(jié)果與討論

    2.1 日本黃姑魚的中毒癥狀

    日本黃姑魚從浙江省海洋水產(chǎn)研究所西軒養(yǎng)殖試驗(yàn)場(chǎng)運(yùn)回及時(shí)暫養(yǎng)在聚乙烯塑料缸(容積80 L)中。中途運(yùn)輸有部分黃姑魚由于高溫和缺氧死亡,及時(shí)撈出。暫養(yǎng)期間,日本黃姑魚喜歡呆在缸低,每日換水都能看出日本黃姑魚很活躍。換水時(shí)將死亡日本黃姑魚撈出,死亡數(shù)很少。試驗(yàn)時(shí)選取的是生命體征比較活躍的日本黃姑魚。實(shí)驗(yàn)中經(jīng)觀察發(fā)現(xiàn)日本黃姑魚不僅在石化特征污染物不同試驗(yàn)濃度下表現(xiàn)出不同的中毒癥狀,而且對(duì)不同污染物的耐受力也有明顯的差異。預(yù)試驗(yàn)階段,日本黃姑魚在低濃度組活動(dòng)的狀態(tài)和在空白對(duì)照組基本一致,在試驗(yàn)容器內(nèi)安靜的游動(dòng),有聲響則表現(xiàn)出受驚狀態(tài),游動(dòng)活躍。將日本黃姑魚放入高濃度組后日本黃姑魚會(huì)迅速表現(xiàn)的躁動(dòng)不安,與低濃度組的相比有很明顯的跳躍逃生的現(xiàn)象,高濃度組日本黃姑魚應(yīng)激反應(yīng)強(qiáng)烈,無序游動(dòng),并會(huì)很快死亡,浮在水面上。 隨著時(shí)間延長各實(shí)驗(yàn)濃度的日本黃姑魚死亡數(shù)量增多。日本黃姑魚中毒死亡整個(gè)過程表現(xiàn)為,反應(yīng)漸漸遲鈍、漂在水面上,極力掙扎后漂浮在水面上直至死亡。解剖可見體內(nèi)有明顯的充血中毒的癥狀。以上中毒癥狀與日本黃姑魚在硫酸銅溶液中的中毒表現(xiàn)相近[17]。

    2.2 6種石化特征污染物對(duì)日本黃姑魚的急性毒性的劑量效應(yīng)

    由(表1)可見6種石化工業(yè)特征污染物對(duì)日本黃姑魚的急性毒性效應(yīng)都隨著試驗(yàn)質(zhì)量濃度的提高和試驗(yàn)時(shí)間的延長表現(xiàn)出明顯的增強(qiáng)趨勢(shì)。但是可以看出不同試驗(yàn)的石化工業(yè)特征污染物(乙基苯、甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯、苯)對(duì)日本黃姑魚的急性毒性影響有很大差距。

    試驗(yàn)結(jié)果顯示,較明顯的是毒性強(qiáng)度不同,乙基苯的毒性強(qiáng)度最大,96hLC5095% 置信區(qū)間[24.9~42.6]mg/L;間二甲苯、對(duì)二甲苯和鄰二甲苯毒性強(qiáng)度接近,96hLC5095%置信區(qū)間分別為[33.0~47.0]mg/L、[27.6~45.7]mg/L、[31.3~47.2]mg/L;與乙基苯相比毒性強(qiáng)度稍弱一些;甲苯的96hLC5095%置信區(qū)間[58.0~83.0]mg/L ;相對(duì)乙基苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯和鄰二甲苯來說,甲苯的毒性更弱一些;苯毒性強(qiáng)度最弱,96hLC5095%置信區(qū)間[122.2~146.0]mg/L ;這6種石化工業(yè)特征污染物的毒性強(qiáng)度大小為乙基苯>對(duì)二甲苯>鄰二甲苯>間二甲苯>甲苯>苯。

    從試驗(yàn)不同時(shí)間下的平均死亡率看,日本黃姑魚開始死亡的時(shí)間也不同,實(shí)驗(yàn)開始的24 h內(nèi),苯和鄰二甲苯?jīng)]有出死亡現(xiàn)象;試驗(yàn)開始在48 h 內(nèi)苯實(shí)驗(yàn)組最高濃度組的平均死亡率低于50 %,而其它毒物組最高濃度組的平均死亡率都等于或高于50 %;試驗(yàn)開始72 h內(nèi)各實(shí)驗(yàn)組最高濃度組的平均死亡率都大于或等于80 %;實(shí)驗(yàn)開始在96 h內(nèi)各實(shí)驗(yàn)組最高濃度組的平均死亡率都達(dá)到100%。

    表1 不同時(shí)段6種石化工業(yè)特征污染物對(duì)日本黃姑魚的急性毒性

    表1(續(xù))

    2.3 6種石化特征污染物對(duì)日本黃姑魚安全質(zhì)量濃度評(píng)價(jià)

    由(表2)可見,6種石化特征污染物相同觀察時(shí)段不同試驗(yàn)質(zhì)量濃度梯度組間的致死效果存在顯著差異,所建的死亡概率單位-質(zhì)量濃度回歸方程均顯示出較好地?cái)M合度和相關(guān)性(P<0.05),表明日本黃姑魚的死亡率和毒物試驗(yàn)質(zhì)量濃度密切相關(guān)。

    乙基苯、甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯和苯對(duì)日本黃姑魚半致死質(zhì)量濃度96hLC50值依次為35.7 、75.7、43.1、41.5 、41.73 mg/L和138.4 mg/L(表2)。根據(jù)國家環(huán)保局相關(guān)文件規(guī)定,96hLC50>100 00 mg/L、100 0~100 00 mg/L、100~100 0 mg/L、1~100 mg/L、<1.0 mg/L分別為微毒、低毒、中毒、高毒、劇毒污[18]。按照這一等級(jí)的劃分,本實(shí)驗(yàn)中毒物乙基苯、甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯和苯對(duì)日本黃姑魚毒性為高毒。其安全濃度分別為0.36 、0.76 、0.43 、0.41 、0.42 mg/L和1.38 mg/L。均高于《漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)(GB11607-1989)》[19]規(guī)定的數(shù)值(石油類≤0.05 mg/L),表明日本黃姑魚對(duì)這6種石化工業(yè)特征污染物具有較高的耐受性。6種石化工業(yè)特征污染物對(duì)日本黃姑魚毒性依次為乙基苯>對(duì)二甲苯>鄰二甲苯>間二甲苯>甲苯>苯。根據(jù)急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出,這6種石化工業(yè)特征污染物對(duì)日本黃姑魚均具有急性毒性。因此,在石化工業(yè)區(qū)應(yīng)該重視污水排放的管理,從源頭減少環(huán)境污染對(duì)海洋生物的危害。

    表2 不同觀察時(shí)間段6種石化特征污染物對(duì)日本黃姑魚急性毒性特征分析

    表2(續(xù))

    2.4 日本黃姑魚96hLC50與KOW的關(guān)系

    本章節(jié)試驗(yàn)以日本黃姑魚為受試生物,以半致死濃度評(píng)價(jià)了6種石化工業(yè)特征污染物(苯、甲苯、間二甲苯、鄰二甲苯、對(duì)二甲苯、乙基苯)對(duì)日本黃姑魚的急性毒性效應(yīng)。辛醇-水分配系數(shù)(KOW)為討論有機(jī)污染物在環(huán)境介質(zhì)(水、土壤或沉積物)中分配平衡的極其重要的參數(shù)。結(jié)合日本黃姑魚96hLC50與受試毒物KOW分析受試石化特征污染物對(duì)海洋生物的毒性效應(yīng)。日本黃姑魚96hLC50與受試毒物KOW的關(guān)系如(圖1)所示。從散點(diǎn)圖可以看出日本黃姑魚96hLC50與受試毒物KOW顯著相關(guān),受試毒物KOW越大,日本黃姑魚96hLC50值越小,該毒物毒性越大。散點(diǎn)圖中有兩個(gè)點(diǎn)有偏離,說明還有其他因素影響受試毒物的毒性。

    圖1 日本黃姑魚96hLC50與KOW的關(guān)系

    3 結(jié)論

    通過對(duì)日本黃姑魚的急性毒性試驗(yàn),得出乙基苯、甲苯、間二甲苯、對(duì)二甲苯、鄰二甲苯和苯對(duì)日本黃姑魚半致死質(zhì)量濃度96hLC50值依次為35.7 、75.7、43.1、41.5 、41.73 mg/L和138.4 mg/L;其安全濃度分別為0.36 、0.76 、0.43 、0.41 、0.42 mg/L和1.38 mg/L;毒性依次為乙基苯>對(duì)二甲苯>鄰二甲苯>間二甲苯>甲苯>苯;本實(shí)驗(yàn)受試毒物對(duì)日本黃姑魚毒性為高毒,且日本黃姑魚對(duì)受試毒物有較高的耐受性。日本黃姑魚96hLC50與受試毒物KOW呈顯著相關(guān),受試毒物KOW越大,日本黃姑魚96hLC50值越小,該毒物毒性越大。

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