婦科就診人群高危型HPV感染情況分析及與TCT相關(guān)性研究

姚國(guó)光 ，馬 亮 ，叢 笑 ，馬 莉 ，姜永瑋 ，李 囡 ，楊 輝 ，楊春峰 ，曹永彤 ?

（1.赤峰寶山醫(yī)院 檢驗(yàn)科，內(nèi)蒙古 024076；2.中日友好醫(yī)院 檢驗(yàn)科；3.婦產(chǎn)科，北京 100029）

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤之一，2012年居全球女性最常見惡性腫瘤的第4位[1]。人乳頭狀瘤病毒（human papillomavirus，HPV）感染是致使患者出現(xiàn)癌前病變的重要因素之一，HPV存在高度的種屬性，感染宿主后，病毒基因整合至宿主基因，造成宿主細(xì)胞增殖紊亂、分化功能喪失，引起宮頸病變，進(jìn)而引起宮頸癌[2]。相關(guān)研究顯示HPV感染長(zhǎng)病程（＞10年）者發(fā)生宮頸癌概率約為50%[3]，而宮頸液基薄層細(xì)胞學(xué)檢測(cè)（thinprep cytologic test，TCT）是目前早期篩查宮頸癌前病變的常用手段。TCT聯(lián)合HPV檢測(cè)可提高宮頸病變的檢出率，對(duì)宮頸癌早期篩查診斷和早期治療具有重要意義。

表1 各年齡段HPV陽(yáng)性率及TCT陽(yáng)性率比較 n（%）

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集2017年1月～12月間6384例中日友好醫(yī)院婦科門診女性患者標(biāo)本，同時(shí)進(jìn)行HPV和TCT檢查，患者年齡17～90歲，中位年齡34歲。

1.2 標(biāo)本采集和檢測(cè)方法

TCT標(biāo)本采集前將研究對(duì)象宮頸分泌物擦干凈，用特制的毛刷從受試對(duì)象宮頸順時(shí)針旋轉(zhuǎn)5圈后立即放入裝有細(xì)胞保存液的小瓶中，TCT標(biāo)本經(jīng)離心后分離標(biāo)本中的黏液、血液和炎性細(xì)胞，細(xì)胞經(jīng)自然沉淀轉(zhuǎn)移到涂有黏附劑的載玻片上，制成直徑為20mm的超薄層細(xì)胞。

HPV標(biāo)本采集方法與TCT相同，HPV DNA（包括 16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、68、82）檢測(cè)采用上海之江生物科技股份有限公司的HPV的基因分型檢測(cè)試劑盒。

1.3 結(jié)果判讀

HPV的4種混合液在FAM和VIC通道均無(wú)Ct值，則判定為陰性：Ct值≤38.0且擴(kuò)增曲線呈典型的S型，判定為HPV陽(yáng)性；Ct在38.0～40.0之間，需重復(fù)測(cè)定.若仍在38.0～40.0之間且擴(kuò)增曲線呈典型S型，則判定為陽(yáng)性，反之為陰性。任何一種HPV亞型陽(yáng)性，即為HPV陽(yáng)性：2種及以上亞型同時(shí)陽(yáng)性，即為多重感染，多重感染重復(fù)計(jì)數(shù)。

對(duì)患者進(jìn)行TCT檢測(cè)后，其診斷標(biāo)準(zhǔn)采用伯塞斯達(dá)系統(tǒng)（TBS）分級(jí)系統(tǒng)：無(wú)上皮內(nèi)病變或惡性病變（NILM），不典型鱗狀細(xì)胞（ASC）包括ASC不能明確意義（ASC-US）和ASC不除外上皮內(nèi)高度病變（ASC-H）、鱗狀上皮內(nèi)低度病變（LSIL）、鱗狀上皮內(nèi)高度病變（HSIL）、鱗狀細(xì)胞癌（SCC）和腺癌（AC），結(jié)果以出現(xiàn) ASC、LSIL、HSIL 為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)數(shù)資料組間比較采用χ2檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

2.1 宮頸組織細(xì)胞學(xué)檢查結(jié)果

6384例患者中無(wú)宮頸上皮內(nèi)瘤變者5857例（91.74%）、不典型鱗狀細(xì)胞 （ASC）者 273例（4.28%）、低度鱗狀上皮細(xì)胞內(nèi)病變 （low-grades quamous intraepithelial lesion，LSIL）170例（2.66%）、高度鱗狀上皮內(nèi)病變（high-grade squamous intraepithelial lesion，HSIL）84例（1.32%）。

2.2 HPV感染年齡分布及差異

表1示，6384例婦科就診人群中HPV陽(yáng)性1539例（單一或多重感染），總感染率為24.11%，15種HPV基因型均有檢出。17～30歲年齡組感染率高于其它年齡組（均P＜0.01）。單一感染各年齡組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05），多重感染中17～30歲年齡組陽(yáng)性率（11.67%）顯著高于其它年齡組（均P＜0.01）。HPV陽(yáng)性標(biāo)本中單一型感染占比 （74.14%）顯著高于多重感染 （25.86%）（P＜0.01）。各年齡組間TCT檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（均 P＞0.05）。

2.3 單一感染、多重感染與TCT的相關(guān)性

表2示，多重感染組的TCT陽(yáng)性率31.66%（126/398）顯著高于單一感染組 （24.45%，P＜0.01）。

表2 單一感染與多重感染中TCT陽(yáng)性數(shù)

2.4 HPV感染亞型分布

1545例HPV陽(yáng)性標(biāo)本中，單一亞型感染型別較高的依次分別是 52型 （19.28%）、16型（17.7%）、58型（16.83%），多重感染型別較高的 3種亞型與單一感染一致。

TCT陽(yáng)性結(jié)果中，感染亞型最多的是16型（20.17%）、58型（13.56%）、52型（11.86%）； TCT陰性結(jié)果中感染亞型最多的是52型 （19.25%）、58型（15.21%）和 16型（13.53%）。

2.5 TCT各組HPV感染率比較

根據(jù)TBS分組后，HPV在HSIL組陽(yáng)性率為91.67%，LSIL組為 77.65% ，ASC組為 71.79%，NILM組為19.36%。ASC組、LSIL組、HSIL組與NILM組HPV感染率具有顯著差異（均P<0.01）。HSIL組HPV感染率顯著高于LSIL組和ASC組（均P＜0.01），ASC組HPV感染率顯著高于NILM組（P＜0.01）。 HSIL 組中，HPV16型占 58.33%，顯著高于本組其他HPV亞型。

3 討論

研究表明，75%以上的性活躍女性在一生中會(huì)感染一種或者一種以上類型的HPV[4]，但是其中90%的感染患者在感染后1年左右能夠通過(guò)自身的免疫系統(tǒng)將病毒清除，只有10%患者不能清除而成為持續(xù)感染者。由于宮頸癌早期一般發(fā)病較為隱匿，癥狀較不典型[5]，一旦發(fā)生，對(duì)患者的心理和生理均造成嚴(yán)重的影響，而持續(xù)的高危型人乳頭瘤病毒（HPV）感染是宮頸癌的首要病因，95%～99.7%的宮頸癌患者可以檢出HPV[6]。宮頸癌是目前僅有的少數(shù)幾個(gè)可以早期發(fā)現(xiàn)、早期治療、并可治愈的惡性腫瘤之一[7]。由于在宮頸癌發(fā)生前會(huì)有較長(zhǎng)一段時(shí)間的癌前病變[8]，此期間只要采取有效的干預(yù)措施，就可降低宮頸癌的發(fā)生率，因此對(duì)HPV陽(yáng)性患者及時(shí)進(jìn)行干預(yù)可有效預(yù)防宮頸癌。

3.1 HPV感染與年齡的關(guān)系

本研究中發(fā)現(xiàn)高危型HPV的感染與年齡相關(guān)。17～30歲年齡組總感染率（29.83%）及多重感染率（11.67%）最高，可能與此年齡人群性活躍度高并缺少相應(yīng)的保護(hù)措施以及免疫系統(tǒng)未被致敏而導(dǎo)致了感染原因有關(guān)，雖然感染率較高，但病毒則易被清除，此階段感染大部分為暫時(shí)性[9]。其次是50～60歲組（24.97%），這與本組女性機(jī)體內(nèi)雌激素水平減低和免疫功能減退、機(jī)體清除病毒能力下降以及就診時(shí)宮頸已發(fā)生病變有關(guān)，≥60歲的女性感染率有所下降，與智艷芳等[10]研究報(bào)告的年齡段與HPV感染率呈“U”型曲線關(guān)系布略有不同，可能與人群分布引起偏差有關(guān)。

3.2 HPV亞型感染率

在HPV感染的各亞型中，單一感染與多重感染型別前 3 位均是 HPV52、HPV16、HPV58，與2015年本院統(tǒng)計(jì)結(jié)果 （單一型別感染率較高的3種依次為HPVl6、52、58；多重感染型別感染率較高的是HPVl6、58、和52型）[11]略有差別，說(shuō)明HPV52亞型感染例數(shù)已經(jīng)超過(guò)HPV16亞型成為單一感染和多重感染數(shù)量最多的亞型。這也與北京天壇醫(yī)院史從寧等[12]、重慶地區(qū)徐薇等[13]研究結(jié)果一致。這也為本地區(qū)HPV流行現(xiàn)狀、相關(guān)疫苗的研制提供了數(shù)據(jù)支持。在本研究中，單一感染明顯高于多重感染，但是多重感染患者中TCT陽(yáng)性率高于單一感染TCT陽(yáng)性率，符合Harper等[14]的研究發(fā)現(xiàn)，說(shuō)明多重感染相對(duì)于單一感染對(duì)于宮頸細(xì)胞學(xué)改變具有更大的作用，故多重HPV感染更應(yīng)該引起臨床重視。

3.3 HPV感染亞型與TCT病變級(jí)別的相關(guān)性

本研究中HSIL組HPV感染率91.67%，LSIL組77.65% ，ASC組71.79%，NILM組19.36%，說(shuō)明HPV感染率隨著TCT結(jié)果的嚴(yán)重程度升高而不斷增加，與傅祝能等[15]研究類似。在2016年美國(guó)陰道鏡和宮頸病理學(xué)會(huì)（ASCCP）新指南提出：對(duì)于宮頸細(xì)胞學(xué)無(wú)異常而HPV陽(yáng)性的30歲以上的婦女，如其為HPV16、18感染者，應(yīng)立即進(jìn)行陰道鏡檢查；HPV16是發(fā)生高度上皮內(nèi)瘤變（HSIL）風(fēng)險(xiǎn)最高的亞型[16]。而在本次研究HSIL組中，HPV16亞型感染率為58.33%，明顯高于本組其他亞型感染率、也高于其他各組HPV16感染率；而在HPV總感染人次中HPV52亞型占17.15%，HPV16亞型占15.41%，HPV58亞型占14.74%，但感染不同型別疾病進(jìn)展和預(yù)后不近相同，HPV16亞型的患者進(jìn)一步進(jìn)展為HSIL和宮頸癌的可能性較感染HPV52亞型高，檢出HPV16感染后更應(yīng)該積極治療，對(duì)未感染HPV16女性應(yīng)積極接種HPV16價(jià)疫苗，但有HPV58與HPV52型檢出也不應(yīng)忽視，與邱峰等[17]研究結(jié)果基本一致。本研究結(jié)果顯示，HPV檢測(cè)結(jié)果陰性而TCT細(xì)胞學(xué)結(jié)果陽(yáng)性病例達(dá)122例（23.15%），其中ASC組77例，LISL組38例，HISL組7例，可能與HPV數(shù)量低于檢測(cè)范圍下限或存在其它不包含在本研究檢測(cè)范圍內(nèi)的高危亞型有關(guān)，也可能與取材等原因有關(guān)。綜上所述，本研究對(duì)HPV各種亞型感染情況分布及與TCT相關(guān)性進(jìn)行了分析和匯總，為本地區(qū)HPV流行現(xiàn)狀的分析研究、相關(guān)疫苗的研制開發(fā)及不同亞型HPV的預(yù)防治療提供依據(jù)。

4 參考文獻(xiàn)