禽類(lèi)卵泡抗苗勒管激素研究現(xiàn)狀與展望

潘愛(ài)鑾 卓桂梅 申杰 蒲躍進(jìn) 吳艷 皮勁松 孫靜 梁振華 張昊 杜金平

摘要：簡(jiǎn)要介紹了禽類(lèi)生殖生理與卵泡發(fā)育特性，概述了抗苗勒管激素（Anti-Mullerian hormone，AMH）的特點(diǎn)、檢測(cè)方法，綜述了禽類(lèi)AMH研究進(jìn)展，提出了AMH在禽類(lèi)繁殖潛能評(píng)估上的應(yīng)用前景。

關(guān)鍵詞：禽類(lèi)；卵泡；抗苗勒管激素；繁殖潛能

中圖分類(lèi)號(hào)：S814.1 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

文章編號(hào)：0439-8114（2018）16-0009-05

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2018.16.002 開(kāi)放科學(xué)（資源服務(wù)）標(biāo)識(shí)碼（OSID）：

The Research Status and Prospect of Anti-Mullerian Hormone in Poultry Follicle

PAN Ai-luan1，ZHUO Gui-mei2，SHEN Jie1，PU Yue-jin1，WU Yan1，PI Jin-song1，

SUN Jing1，LIANG Zheng-hua1，ZHANG Hao1，DU Jin-ping1

（1.Institute of Animal Husbandry and Vetervinary，Hubei Academy of Agricultural Science/Hubei Innovation Center of

Agricultural Science and Technology/ Hubei Key Lab of Animal Embryo Technology and Molecular Breeding，Wuhan 430064，China；

2.Animal Husbandry & Veterinary and Fishery Bureau of Baoting County in Hainan Province，Baoting 572300，Hainan，China）

Abstract： The poultry reproductive physiology and follicular features were briefly introduced； the resistance and test method of anti-Mullerian hormone （AMH） were summarized. And then the AMH research progress of poultry was reviewed. The AMH in poultry breeding potential assessment on the application prospect was put forward.

Key words： poultry； follicular； anti-Mullerian hormone； reproductive potential

抗苗勒管激素（Anti-Mullerian hormone，AMH）又稱(chēng)苗勒管抑制物質(zhì)（Mullerian inhibitory substance，MIS），因其在哺乳動(dòng)物雄性胎兒的發(fā)育過(guò)程中，具有引起苗勒管退化的重要作用而得名。最初對(duì)其的研究重點(diǎn)在于對(duì)胚胎發(fā)育及性別分化的作用，近年來(lái)其與卵巢功能的關(guān)系逐漸成為研究的熱點(diǎn)[1]。AMH是反映人類(lèi)卵巢健康和預(yù)測(cè)卵巢儲(chǔ)備功能的可靠標(biāo)志物，在監(jiān)測(cè)卵泡生長(zhǎng)狀態(tài)等方面具有重要的應(yīng)用價(jià)值[2-4]?，F(xiàn)在隨著AMH在預(yù)測(cè)人卵巢儲(chǔ)備功能方面研究的不斷深入，AMH在畜禽中的作用也逐漸受到關(guān)注。關(guān)于禽類(lèi)AMH的研究報(bào)道雖然不多，但已引起人們的重視。為此，對(duì)近年來(lái)禽類(lèi)卵泡AMH的研究進(jìn)展進(jìn)行綜述，旨在為促進(jìn)AMH在禽類(lèi)繁殖中的深入研究和應(yīng)用提供參考。

1 禽類(lèi)生殖生理與卵泡發(fā)育特性

1.1 禽類(lèi)生殖生理特性

與哺乳動(dòng)物相比，禽類(lèi)在生殖解剖學(xué)構(gòu)造和生理學(xué)機(jī)能等方面具有其特異性。主要表現(xiàn)在雌禽生殖器官由卵巢和輸卵管組成[5]，成年雌禽僅左側(cè)的卵巢和輸卵管發(fā)育正常，而右側(cè)的卵巢和輸卵管在胚胎孵化中后期及個(gè)體早期生長(zhǎng)過(guò)程里就停止發(fā)育，并逐漸退化[6]；禽類(lèi)卵巢外觀似一串葡萄，通過(guò)系膜韌帶懸于腹腔的背壁上，含有不同發(fā)育階段的許多卵泡，是卵生動(dòng)物；在一定的時(shí)間內(nèi)，卵巢上的卵泡可以連續(xù)發(fā)育、成熟并排卵，但排卵后沒(méi)有黃體形成，因而也沒(méi)有哺乳動(dòng)物那樣的規(guī)律發(fā)情周期；禽類(lèi)的卵子較大，雌禽受精卵在體內(nèi)發(fā)育時(shí)期所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)由輸卵管分泌供給，隨后以蛋的形式出現(xiàn)；受精蛋在體外保存，在條件適宜時(shí)，受精蛋可孵化發(fā)育為胚胎，孵化出雛用時(shí)短，沒(méi)有妊娠期，胚胎發(fā)育所需營(yíng)養(yǎng)主要由受精蛋的蛋黃供應(yīng)，而非依賴(lài)于母體供應(yīng)[7]。

1.2 禽類(lèi)卵泡的發(fā)育特性

禽類(lèi)卵巢分為皮質(zhì)部和髓質(zhì)部，皮質(zhì)部含有各級(jí)卵泡，包括原始卵泡、生長(zhǎng)卵泡（包括初級(jí)卵泡、次級(jí)卵泡）和成熟卵泡[8]；髓質(zhì)部主要是結(jié)締組織，具有眾多的血管、神經(jīng)和平滑肌[9]。每一個(gè)卵泡包含一個(gè)卵子及其周?chē)穆雅菁?xì)胞，呈球狀，卵泡細(xì)胞中的顆粒細(xì)胞（Granulosa cell，GC）和膜細(xì)胞（Theca cell，TC）對(duì)卵泡發(fā)育以及卵子的成熟、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)積累起到至關(guān)重要的作用[10]。

在出雛后不久，雌禽卵巢中的卵子開(kāi)始被體細(xì)胞包圍，形成原始卵泡；禽類(lèi)性成熟時(shí)，部分原始卵泡經(jīng)初始募集被激活，并發(fā)育為生長(zhǎng)卵泡（包含初級(jí)卵泡和次級(jí)卵泡），根據(jù)直徑大小可將生長(zhǎng)卵泡分為三類(lèi)，其中小白卵泡（Small white follicle，SWF）直徑小于1 mm，大白卵泡（Large white follicle，LWF）直徑為2～4 mm，小黃卵泡（Small yellow follicle，SYF）直徑5～10 mm，大部分生長(zhǎng)卵泡會(huì)在發(fā)育過(guò)程中閉鎖[11，12]。在排卵期，每天有一個(gè)大體積的SYF被選擇并發(fā)育成為排卵前卵泡，且從大到小依次排序[13]，卵巢所含有的體積最大的5～6個(gè)成熟卵泡伸向腹腔，從大到小依次用F1、F2、F3…表示，被稱(chēng)為等級(jí)卵泡，并依次排卵[14，15]。初級(jí)卵泡埋在皮質(zhì)內(nèi)，位于皮質(zhì)淺層，體積較小，由毛細(xì)血管包圍其外，卵母細(xì)胞周?chē)鷥H有一層顆粒細(xì)胞及基膜包繞，無(wú)卵泡膜；次級(jí)卵泡中的顆粒細(xì)胞增殖至2～3層，基膜外的結(jié)締組織分化形成卵泡膜；成熟卵泡不是位于卵巢皮質(zhì)內(nèi)，而是完全突出于卵巢組織表面，并逐漸被卵巢上皮包圍，僅通過(guò)結(jié)締組織形成的卵泡柄與卵巢相連[16]。成熟的卵泡內(nèi)無(wú)卵泡腔，也沒(méi)有卵泡液，只在卵泡膜中分布有大量的毛細(xì)血管。即將排卵的卵泡有一條幾乎沒(méi)有血管的灰色破裂線，排卵時(shí)，卵子自卵泡膜上的破裂線排出，排卵后，卵泡膜的破裂線很整齊，邊緣光滑，沒(méi)有組織撕裂現(xiàn)象，破裂的卵泡膜很快皺縮成一薄腔空囊附著在卵巢上，約10 d后縮成一遺痕，卵泡結(jié)構(gòu)很快退化，不形成黃體，不具備規(guī)律的發(fā)情周期，無(wú)月經(jīng)[8]。初生母雛卵巢中大約有48萬(wàn)個(gè)卵子，經(jīng)卵泡選擇后，只有數(shù)百個(gè)卵子能夠發(fā)育成熟并排卵[17]。在產(chǎn)蛋期，禽類(lèi)卵巢中總有陸續(xù)成熟、大小不等的卵泡存在，成熟卵泡按大小等級(jí)排列，逐一排卵[18]。禽類(lèi)的成熟卵母細(xì)胞（俗稱(chēng)卵黃或蛋黃）營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)豐富，含有約51%的水分、33%的類(lèi)脂物和16%的蛋白質(zhì)，是禽類(lèi)胚胎發(fā)育的主要營(yíng)養(yǎng)源[19]。

2 AMH特點(diǎn)

2.1 AMH的結(jié)構(gòu)

AMH是由兩個(gè)相同的約70 kD的單體亞基經(jīng)二硫鍵連接為糖蛋白的二聚體，是分子量為140 kD的糖蛋白激素[20]。人類(lèi)AMH基因位于第19號(hào)染色體短臂上，長(zhǎng)度為2.4～2.8 kb，包含5個(gè)外顯子，編碼560個(gè)氨基酸殘基蛋白質(zhì)前體[21]。家雞祖先紅色原雞的AMH基因位于第28號(hào)染色體，長(zhǎng)度為4 024 bp，包含5個(gè)外顯子，AMH蛋白含有644個(gè)氨基酸殘基[22]。

2.2 AMH的特性

人類(lèi)醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)，血清AMH水平具有相對(duì)變異性與相對(duì)穩(wěn)定性。相對(duì)變異性指育齡期女性血清AMH水平隨著年齡增長(zhǎng)而逐漸下降。女性出生時(shí)血清AMH水平最低，幼年期后逐漸升高，青春期后血清AMH水平會(huì)進(jìn)入到平臺(tái)期，并一直維持到25周歲，25周歲后血清AMH水平與年齡呈負(fù)相關(guān)，隨年齡增長(zhǎng)，AMH水平逐漸降低[23]。另外，AMH水平有種族差異，相同年齡段的東南亞黃種女性的AMH值比白種女性低，表明AMH水平與遺傳背景有關(guān)[24]。相對(duì)穩(wěn)定性是指月經(jīng)周期內(nèi)和周期間的AMH水平相對(duì)穩(wěn)定，主要表現(xiàn)為血清AMH水平不受下丘腦-垂體-卵巢（HPO）軸分泌的促性腺激素、外源性促性腺激素類(lèi)似物、避孕藥等的影響[25]，在整個(gè)月經(jīng)周期無(wú)明顯波動(dòng)[26]，相對(duì)于卵泡刺激素（FSH）、黃體生成素（LH）水平等傳統(tǒng)的評(píng)價(jià)女性卵巢功能的“生殖激素六項(xiàng)”指標(biāo)而言，AMH在檢測(cè)者月經(jīng)周期中保持恒定，血清AMH的水平不會(huì)隨著性腺激素的波動(dòng)而變化，表明AMH更能精確地評(píng)估卵巢儲(chǔ)備能力[27]，這是目前預(yù)測(cè)卵巢儲(chǔ)備功能最好的血清標(biāo)記物質(zhì)[25，28]，也是外周血可以檢測(cè)到的卵泡最早產(chǎn)生的物質(zhì)[1]。不過(guò)有少數(shù)的臨床研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)期內(nèi)或經(jīng)期間的AMH水平會(huì)發(fā)生小幅波動(dòng)，但不影響其臨床測(cè)量意義[29]。

另外，對(duì)奶牛的研究表明，血漿AMH濃度可數(shù)月保持不變[30]，每頭牛的AMH含量存在一個(gè)自身的循環(huán)特點(diǎn)，AMH測(cè)量值的有效期至少1年[31]。

2.3 AMH的功能

AMH在卵泡發(fā)育過(guò)程中，主要調(diào)控卵泡的募集和優(yōu)勢(shì)卵泡選擇過(guò)程，AMH只在性腺產(chǎn)生，在卵巢生長(zhǎng)卵泡的顆粒細(xì)胞中表達(dá)，僅表達(dá)于健康卵泡，在閉鎖卵泡中不表達(dá)[32]，能防止原始卵泡池過(guò)早耗盡、維持卵巢儲(chǔ)備功能，并保持卵泡募集、生長(zhǎng)發(fā)育及閉鎖的動(dòng)態(tài)平衡[33，34]。

在哺乳動(dòng)物的胚胎發(fā)育過(guò)程中，胎兒可生長(zhǎng)出兩對(duì)生殖管道，一對(duì)是中腎管（The ghvbmesonephric），也稱(chēng)沃爾夫管（Wolffian ducts），其將分化為雄性生殖器官中的輸精管、附睪、精囊；另一對(duì)是副中腎管（The paramesonephric），也稱(chēng)苗勒氏管（Mullerian ducts），其將分化為雌性生殖器官的輸卵管、子宮、陰道上部。因此，對(duì)于正常雄性、雌性個(gè)體來(lái)說(shuō)，胎兒中只能有其中一對(duì)生殖管繼續(xù)發(fā)育，而另一對(duì)則必須退化[35]。1947年，法國(guó)科學(xué)家Alfred Jost發(fā)現(xiàn)，AMH是由睪丸未成熟的支持細(xì)胞分泌，具有抑制雄性胚胎苗勒氏管發(fā)育、誘導(dǎo)苗勒氏管退化的作用，可促使中腎管演變成雄性生殖系統(tǒng)[36，37]。當(dāng)缺乏AMH時(shí)，苗勒氏管則分化、發(fā)育成為子宮、輸卵管和陰道上部[38]。

AMH由初級(jí)卵泡產(chǎn)生，通過(guò)旁分泌抑制原始卵泡進(jìn)入生長(zhǎng)卵泡池，從而調(diào)控卵泡的起始募集。對(duì)AMH轉(zhuǎn)基因小鼠的觀測(cè)結(jié)果表明，AMH可能抑制原始卵泡的啟動(dòng)，導(dǎo)致生長(zhǎng)卵泡減少[39]。女性有腔卵泡中AMH表達(dá)量最高；隨著卵泡的生長(zhǎng)，AMH表達(dá)逐漸下降，這有利于對(duì)優(yōu)勢(shì)卵泡的選擇[40]。

2.4 AMH分泌規(guī)律

醫(yī)學(xué)研究表明，對(duì)于雄性，AMH最早是由5周的胚胎睪丸內(nèi)的支持細(xì)胞合成；而對(duì)于雌性，AMH最早是由妊娠36周的胚胎卵巢內(nèi)的卵泡顆粒細(xì)胞合成[41，42]；女性出生時(shí)，血清內(nèi)幾乎檢測(cè)不到AMH[43]；出生后幾周血清AMH濃度開(kāi)始緩慢上升；青春期女性體內(nèi)的AMH 濃度保持相對(duì)的穩(wěn)定，處于平臺(tái)期[44]；青春期晚期，女性血清AMH濃度達(dá)到高峰，并在整個(gè)生育年齡持續(xù)存在，但隨著年齡的增長(zhǎng)，濃度逐漸下降，絕經(jīng)后又無(wú)法檢測(cè)到[45]，AMH主要由未受FSH刺激的“小卵泡”產(chǎn)生[46]。生殖晚期女性血清AMH濃度與原始卵泡的數(shù)量呈顯著正相關(guān)[47]，但是研究者在生殖早期的小鼠上發(fā)現(xiàn)，原始卵泡數(shù)量下降而血清AMH濃度卻相對(duì)穩(wěn)定[48]，表明血清AMH濃度與原始卵泡數(shù)量間的正相關(guān)關(guān)系可能僅局限于生殖晚期。

在雞卵泡中，AMH在直徑為1 mm的卵泡里表達(dá)量最高；在3～5 mm的卵泡里表達(dá)量有所降低；在6～8 mm的卵泡里表達(dá)量差異不顯著，但顯著低于前述小卵泡；在9 mm以上的成熟卵泡里幾乎無(wú)表達(dá)[49]。但是在豬卵泡里觀測(cè)不同大小直徑的卵泡AMH濃度后，并未發(fā)現(xiàn)顯著差異，其原因尚不明了[50]。

3 AMH檢測(cè)方法

AMH檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展日新月異，已經(jīng)從早期的免疫細(xì)胞化學(xué)分析及放射免疫分析技術(shù)（Radioimmunoassay，RIA）到酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定技術(shù)（Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA），再到目前的全自動(dòng)AMH檢測(cè)技術(shù)。

AMH技術(shù)最早可追溯到1982年，那時(shí)Tran等[51]利用RIA技術(shù)檢測(cè)了AMH在牛塞爾托利氏細(xì)胞中的定位，該技術(shù)側(cè)重于AMH在動(dòng)物組織中的定位、功能及含量分析，但無(wú)法應(yīng)用于臨床診斷[52]。此后，AMH ELISA檢測(cè)技術(shù)經(jīng)歷了第一代和第二代的發(fā)展歷程；為滿(mǎn)足AMH的臨床檢測(cè)需求，1990年Hudson等[53]率先建立了AMH ELISA檢測(cè)方法；而后，Immunotech（IOT）與Diagnostic Systems Laboratories（DSL）分別推出了商品化ELISA檢測(cè)試劑盒，即第一代ELISA檢測(cè)試劑盒。由于這兩種試劑盒的檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)不一樣，因而其檢測(cè)結(jié)果差異較大，而且易受樣品儲(chǔ)存等因素影響，穩(wěn)定性較差。為了獲得統(tǒng)一的AMH檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)，Beckman-Coulter（美國(guó)貝克曼庫(kù)爾特有限公司）整合了這兩個(gè)商品化ELISA檢測(cè)試劑盒，Ansh Labs先后推出了超靈敏的AMH ELISA檢測(cè)試劑盒與pico AMH ELISA檢測(cè)試劑盒，建立了第二代ELISA檢測(cè)技術(shù)[54]，該技術(shù)規(guī)避了樣品及操作者的影響，檢測(cè)閾值廣，靈敏度高，結(jié)果可靠，但不同試劑盒各具優(yōu)缺點(diǎn)[55]?，F(xiàn)代AMH檢測(cè)技術(shù)是2014年由羅氏診斷推出的全自動(dòng)AMH檢測(cè)技術(shù)——Elecsys？誖AMH檢測(cè)系統(tǒng)，隨后，Beckman-Coulter也推出了全自動(dòng)的AMH檢測(cè)技術(shù)——Access AMH檢測(cè)系統(tǒng)，采用目前全球最先進(jìn)的免疫標(biāo)記分析技術(shù)——電化學(xué)發(fā)光免疫法（Electrochemiluminescence immunoassay，ECLIA）[56]檢測(cè)人血清AMH濃度，其精密度高、準(zhǔn)確度好，具有良好的線性測(cè)定范圍值[57]，為AMH提供了更準(zhǔn)確、靈敏、快速、方便的檢測(cè)方法并應(yīng)用于臨床檢驗(yàn)[58]；并且人類(lèi)醫(yī)學(xué)上的AMH檢測(cè)技術(shù)發(fā)展能為畜禽AMH檢測(cè)技術(shù)的研發(fā)提供重要借鑒。

4 禽類(lèi)AMH研究進(jìn)展

1996年，Eusebe等[59]克隆了雞的AMH基因，并分析了其基因結(jié)構(gòu)，發(fā)現(xiàn)AMH基因的一般結(jié)構(gòu)，認(rèn)為從轉(zhuǎn)錄起始到聚腺苷酸化位點(diǎn)以及蛋白質(zhì)的主要特征在雞與哺乳動(dòng)物之間是保守的。

有關(guān)AMH基因在禽類(lèi)卵泡發(fā)育中的功能研究起步相對(duì)較晚。2008年，Johnson等[49]首次檢測(cè)了產(chǎn)蛋雞不同等級(jí)卵泡中顆粒細(xì)胞AMH基因的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)AMH基因的mRNA表達(dá)量隨著卵泡的發(fā)育逐漸降低，AMH主要由小卵泡的顆粒細(xì)胞表達(dá)，與哺乳動(dòng)物的表達(dá)模式相一致，表明AMH基因的生物學(xué)功能方面具有高度保守性；認(rèn)為營(yíng)養(yǎng)因素不能直接影響AMH的表達(dá)量，AMH抗體能抑制顆粒細(xì)胞增殖，AMH可通過(guò)自分泌或旁分泌促進(jìn)顆粒細(xì)胞增殖，過(guò)量的AMH會(huì)抑制最佳的卵泡選擇。

Wojtusik等[60]研究發(fā)現(xiàn)，維生素D可能參與母雞AMH的表達(dá)調(diào)控，影響卵泡的選擇。

Luke等[61]對(duì)雞AMH基因進(jìn)行了過(guò)表達(dá)研究，發(fā)現(xiàn)AMH基因過(guò)表達(dá)會(huì)破壞性腺性分化，阻斷性激素的合成，導(dǎo)致性器官分化不明顯，而體重卻表現(xiàn)為與遺傳性別相匹配。

Shen等[62]采用全基因組關(guān)聯(lián)分析方法（GWAS）篩選了影響雞卵泡數(shù)的候選基因，發(fā)現(xiàn)了AMH在雞卵泡發(fā)育中的關(guān)鍵作用，認(rèn)為AMH是預(yù)測(cè)小黃卵泡的一個(gè)極好的候選基因，AMH基因變異可作為小黃卵泡發(fā)育的預(yù)后生物標(biāo)志物。

陳蓉等[63]采用定量PCR技術(shù)檢測(cè)了連城白鴨不同等級(jí)卵泡中AMH等基因的表達(dá)情況，發(fā)現(xiàn)AMH基因的表達(dá)量隨著卵泡的發(fā)育而逐漸降低，認(rèn)為在鴨等級(jí)前卵泡中，AMH基因的高表達(dá)量有助于維持顆粒細(xì)胞未分化的狀態(tài)，抑制原始卵泡的初始募集，進(jìn)而維持卵泡的發(fā)育潛能。

可見(jiàn)，禽類(lèi)AMH激素的基礎(chǔ)研究取得了顯著進(jìn)展。AMH作為目前最好的卵巢儲(chǔ)備功能標(biāo)志物質(zhì)，已在畜牧業(yè)中得到了很好應(yīng)用。薛建華等[64]研究發(fā)現(xiàn)，可以通過(guò)檢測(cè)AMH含量，篩選卵巢儲(chǔ)備功能好的母牛用于超數(shù)排卵，以預(yù)測(cè)牛胚胎生產(chǎn)潛力，從而選擇高產(chǎn)胚胎供體牛提高胚胎生產(chǎn)效率、降低胚胎生產(chǎn)成本。Lahoz等[65]研究了母羊血漿AMH含量，發(fā)現(xiàn)97 pg/mL的AMH濃度是一個(gè)最佳的分界值，血漿AMH濃度≥97 pg/mL的母羊生產(chǎn)能力比AMH<97 pg/mL的高34.8%，認(rèn)為依據(jù)個(gè)體血漿AMH水平來(lái)選擇有更大生產(chǎn)潛力的母羊留種在生產(chǎn)實(shí)踐中可能成為一種簡(jiǎn)便、快捷、低成本的選種方法。但是，AMH在禽類(lèi)繁殖中的應(yīng)用研究卻鮮見(jiàn)報(bào)道，需要迎頭趕上。

5 禽類(lèi)AMH應(yīng)用前景展望

醫(yī)學(xué)研究表明，AMH 在評(píng)價(jià)女性卵巢功能方面有著重要的價(jià)值，是目前預(yù)測(cè)卵巢儲(chǔ)備功能最好的血清標(biāo)記物[66]，有望成為準(zhǔn)確評(píng)價(jià)婦女卵巢功能的可靠指標(biāo)，在臨床的應(yīng)用具有很大的發(fā)展空間[67，68]。目前，AMH醫(yī)學(xué)臨床檢測(cè)技術(shù)迅猛發(fā)展，但國(guó)內(nèi)AMH商品化檢測(cè)系統(tǒng)發(fā)展較為落后，普及率極低，檢測(cè)價(jià)格昂貴，制約了AMH檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用推廣。借鑒國(guó)外AMH檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展及其優(yōu)勢(shì)，嘗試建立快速、穩(wěn)定、準(zhǔn)確、靈敏的AMH檢測(cè)系統(tǒng)，降低AMH檢測(cè)費(fèi)用，將有助于推動(dòng)國(guó)內(nèi)AMH的深入研究和檢測(cè)技術(shù)推廣[69]。AMH作為評(píng)價(jià)卵巢儲(chǔ)備功能的重要指標(biāo)，科技工作者對(duì)畜禽AMH的研究也取得了重要進(jìn)展，但在種畜禽生產(chǎn)中還沒(méi)有被廣泛應(yīng)用。因此，通過(guò)深入研究禽類(lèi)血液AMH與卵巢儲(chǔ)備能力之間的關(guān)系，探明通過(guò)禽類(lèi)血液AMH水平預(yù)測(cè)繁殖潛能的方法，研發(fā)實(shí)用性強(qiáng)、域值廣泛、易操作的種禽AMH快速檢測(cè)技術(shù)產(chǎn)品，將有助于實(shí)現(xiàn)對(duì)高產(chǎn)種禽的早期標(biāo)記輔助選擇，從而選留高繁殖力的種禽，提高種禽養(yǎng)殖效益?？梢灶A(yù)見(jiàn)，隨著人們對(duì)AMH在禽類(lèi)繁殖領(lǐng)域中的深入研究及其檢測(cè)技術(shù)的創(chuàng)新發(fā)展，AMH將在種禽生產(chǎn)應(yīng)用中發(fā)揮出重要作用。

參考文獻(xiàn)：

[1] 張 瑜，楊 菁，張 珺.抗苗勒管激素臨床應(yīng)用的研究進(jìn)展[J].生殖醫(yī)學(xué)雜志，2016，25（12）：1130-1135.

[2] CARLSSON I B，SCOTT J E，VISSER J A，et al. Anti-Mullerian hormone inhibits initiation of growth of human primordial ovarian follicles in vitro[J].Hum Reprod，2006，21（9）：2223-2227.

[3] 李 鍵，喬 杰.抗苗勒氏管激素在卵泡形成中的作用[J].中國(guó)優(yōu)生與遺傳雜志，2007，15（10）：1-3，102.

[4] 張 穎，劉麗麗.抗苗勒管激素影響因素的研究進(jìn)展[J].生殖與避孕，2014，34（6）：492-496.

[5] 邱祥聘，楊 山.家禽學(xué)[M].成都：四川科學(xué)技術(shù)出版社，1993.

[6] 郭光成，賽 娜.大雁卵巢及卵泡的發(fā)育情況觀察[J].黑龍江動(dòng)物繁殖，2005，13（4）：4-6.

[7] 李碧春，秦 潔.雌禽生殖生理研究進(jìn)展[J].中國(guó)畜牧獸醫(yī)，2006，33（1）：36-39.

[8] 張林媛.鴻雁卵泡組織學(xué)研究[D].哈爾濱：東北林業(yè)大學(xué)，2007.

[9] 金艷梅.雞等級(jí)前卵泡顆粒細(xì)胞發(fā)育的激素和營(yíng)養(yǎng)調(diào)控及機(jī)理研究[D].杭州：浙江大學(xué)，2007.

[10] CAICEDO R R E，NIETO M P，KAMIYOSHI M. Effects of steroid hormone in avian follicles[J].Asian-Australas J Anim Sci，2016，29（4）：487-499.

[11] WOJTYSIAK D，OKOLSKI A，SECHMAN A. Structure and steroidogenic activity of the granulosa layer of F1 preovulatory ovarian follicles of the hen（Gallus domesticus）[J].Folia Biol （Krakow），2011，59（1/2）：59-64.

[12] DIAZ F J，ANTHONY K，HALFHILL A N. Early avian follicular development is characterized by changes in transcripts involved in steroidogenesis，paracrine signaling and transcription[J].Mol Reprod Dev，2011，78（3）：212-223.

[13] 魏澤輝，賈存靈.家禽卵泡選擇過(guò)程中顆粒細(xì)胞的分子調(diào)控機(jī)制[J].中國(guó)家禽，2017，39（21）：1-5.

[14] OCON-GROVE O M，POOLE D H，JOHNSON A L. Bone morphogenetic protein 6 promotes FSH receptor and anti-Mullerian hormone mRNA expression in granulose cells from hen prehierarchal follicles[J].Reproduction，2012，143（6）：825-833.

[15] WANG J，ZHAO C，LI J，et al. Transcriptome analysis of the potential roles of FOXL2 in chicken pre-hierar chical and pre-ovulatory granulosa cells[J].Comp Biochem Physiol Part D Genomics Proteomics，2017，21：56-66.

[16] BARRY G M JAMIESON. Reproductive Biology and Phylogeny of Birds：Sexual Selection，Behavior，Conservation，Embryology[M].Enfield，U.S. Science Publishers，2007.

[17] ONAGBESAN O，BRUGGEMAN V，DECUYPERE E. Intra-ovarian growth factors regulating ovarian function in avian species：A review[J].Anim Reprod Sci，2009，111（2/4）：121-140.

[18] 于洪川，張書(shū)起，曹麗蓉，等.禽類(lèi)卵泡生長(zhǎng)發(fā)育和閉鎖的調(diào)節(jié)機(jī)制[J].寧夏農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，20（1）：14-18.

[19] （美）戴維H A，（美）喬治 F G，（美）克萊爾M M.張金國(guó) 譯.鶴類(lèi)生物學(xué)及飼養(yǎng)管理與保護(hù)[M].北京：中國(guó)林業(yè)出版社，2003.

[20] PICARD J Y，JOSSO N.Hormone anti-Mullerienne et lectines：nouvelles perspectives[J].Ann Endocrinol，1980（41）：538-544.

[21] RODOLFO R，CELINE L C，CELINA L，et al.AMH/MIS：What we know already about the gene，the protein and its regulation [J].Molecular and Cellular Endocrinology，2003，211：21-31.

[22] 李鵬程.雞卵巢顆粒細(xì)胞中AMH基因功能的研究[D].陜西楊凌：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2017.

[23] LIE F S，VISSER J A，WELT C K，et al. Serum anti-Mullerian hormone levels in healthy females：A nomogram ranging from infancy to adulthood[J].J Clin Endocrinol Metab，2012，97：4650-4655.

[24] BLEIL M E，GREGORICH S E，ADLER N E，et al. Race/ethnic disparities in reproductive age：An examination of ovarian reserve estimates across four race/ethnic groups of healthy，regularly cycling women[J].Fertil Steril，2014，101（1）：199-207.

[25] STREULI I，F(xiàn)RAISSE T，PILLET C. Serum anti-Müllerian hormone levels remain stable throughout the menstrual cycle and after oral or vaginal administration of synthetic sex steroids[J].Fertility & Sterility，2008，90（2）：385-400.

[26] ALBORZI S，KERAMATI P，YOUNESI M，et al. The impact endometriomas[J].Fertility and Sterility，2014，101（20）：427-434.

[27] SAHMAY S，DEMIRAYAK G，GURALP O，et al. Serum anti-Mullerian hormone，follicle stimulating hormone and antral follicle count measurement cannot predict pregnancy rates in IVF/ICSI cycles[J].Assist Reprod Genet，2012，29：589-595.

[28] IVANOV M，KACEVSKA M，INGELMAN-SUNDBERG M. Epigenomics and interindividual differences in drug response[J].Clin Pharmacol Ther，2012，92（6）：727-736.

[29] KARKANAKI A，VOSNAKIS C，PANIDIS D. The clinical significance of anti-Mullerian hormone evaluation in gynecological endocrinology[J].Hormones，2011，10（2）：95-103.

[30] RICO C，F(xiàn)ABRE S，ME DIGU E，et al. Anti-Mullerian hormone is an endocrine marker of ovarian gonadotropin-responsive follicles and can help to predict superovulatory responses in the cow[J].Biol Reprod，2009，80：50-59.

[31] MONNIAUX D，CLEMENTE N，TOUZE J L，et al. Intrafollicular steroids and anti-Mullerian hormone during normal and cystic ovarian follicular development in the cow[J].Biol Reprod，2008， 79：387-396.

[32] BAARENDS W M，UILENBROEK J T，KRAMER P，et al. Anti-Mullerian hormone and anti-Mullerian hormone type II receptor messenger ribonucleic acid expression in rat ovaries during postnatal development，the estrous cycle，and gonadotropin-induced follicle growth[J].Endocrinology，1995，136（11）：4951-4962.

[33] DURLINGER A L，KRAMER P，KARELS B，et al. Control of primordial follicle recruitment by anti-Müllerian hormone in the mouse ovary[J].Endocrinology，1999，140（12）：5789-5796.

[34] DURLINGER A L，GRUIJTERS M J G，KRAMER P，et al. Anti-Mullerian hormone attenuates the effects of FSH on follicle development in the mouse ovary[J].Endocrinology，2001， 142（11）：4891-4899.

[35] 趙 靜.黃鱔抗苗勒氏管激素（AMH）cDNA克隆及其表達(dá)分析[D].廣州：中山大學(xué)，2007.

[36] JOST A. Problems of fetal endocrinology：The gonadal and hypophyseal hormones[J].Recent Prog Horm Res，1953（8）：379-418.

[37] VISSER J A，THEMMEN A P. Anti-Mullerian hormone and folliculogenesis[J].Mol Cell Endocrinol，2005，234（1/2）：81-86.

[38] LEE M M，DONAHOE P K. Mullerian inhibiting substance：A gonadal hormone with multiple functions[J].Endocr Rev，1993， 14（2）：152-164.

[39] BEHRINGER R R，CATE R L，F(xiàn)ROELICK G J，et al. Abnormal sexual development in transgenic mice chronically expressing mullerian inhibiting substance[J].Nature，1990，345：167-170.

[40] WEENEN C，LAVEN J S E，BERGH A R M V，et al. Anti-Mullerian hormone expression pattern in the human ovary：Potential implications for initial and cyclic follicle recruitment[J].Molecular Human Reproduction，2004，10（2）：77-83.

[41]RAJPERT-DE MEYTS E，JORGENSEN N，GRAEM N，et al. Expression of anti-Mullerian hormone during normal and pathological gonadal developmen t：association with differentiation of sertoli and granulose cells[J].J Clin Endocrinol Metab，1999， 84（10）：3836-3844.

[42] DULINGER A L，VISSER J A，THEMMEN A P. Regulation of ovarian function：The role of anti-Mullerian hormone[J].Reproduction，2002，124（5）：601-609.

[43] 陳 玲，項(xiàng)雙衛(wèi).抗苗勒管激素對(duì)卵巢功能的調(diào)節(jié)及預(yù)測(cè)作用[J].醫(yī)學(xué)綜述，2013，19（8）：1400-1402.

[44] KELSEY T W，WRIGHT P，NELSON S M，et al. A validated model of serum anti-Mullerian hormone from conception to menopause[J]. PloS One，2011，6（7）：220-224.

[45] SOWERS M R，EYVAZZADEH A D，MC CONNELL D，et al. Anti-Mullerian hormone and inhibin B in the definition of ovarian aging and the menopause transition[J].J Clin Endocrinol Metab，2008，93（9）：3478-3483.

[46] 孫曉衛(wèi)，趙中權(quán)，張家驊.抗苗勒管激素（AMH）在草食家畜繁殖中的研究及應(yīng)用[J].中國(guó)畜牧雜志，2016，52（3）：72-75.

[47] HANSEN K R，HODNETT G M，KNOWLTON N，et al. Correlation of ovarian reserve tests with histologically determined primordial follicle number[J].Fertil Steril，2011，95（1）：170-175.

[48] KEVENAAR M E，MEERASAHIB M F，KRAMER P，et al. Serum anti-Mullerian hormone levels reflect the size of the primordial follicle pool in mice[J].Endocrinology，2006，147（7）：3228-3234.

[49] JOHNSON P A，KENT T R，URICK M E，et al. Expression and regulation of anti-Mullerian hormone in an oviparous species，the hen[J].Biol Reprod，2008，78（1）：13-19.

[50] MONNIAUX D，DROUILHET L，RICO C，et al. Regulation of anti-Mullerian hormone production in domestic animals[J].Bioresource Technology，2012，101（22）：8762-8771.

[51] TRAN D，JOSSO N. Localization of anti-Mullerian hormone in the rough endoplasmic reticulum of the developing bovine sertoli cell using immunocytochemistry with a monoclonal antibody[J].Endocrinology，1982，111（5）：1562-1567.

[52] BEZARD J，VIGIER B，TRAN D，et al. Immunocytochemical study of anti-Mullerian hormone in sheep ovarian follicles during fetal and post-natal development[J].J Reprod Fertil，1987，80（2）：509-516.

[53] HUDSON P L，DOUGAS I，DONAHOE P K，et al. An immunoassay to detect human müllerian inhibiting substance in males and females during normal development[J].J Clin Endocrinol Metab，1990，70（1）：16-22.

[54] KUMAR A，KALRA B，PATEL A，et al. Development of a second generation anti-Mullerian hormone（AMH）ELISA[J].J Immunol Methods，2010，362（1/2）：22-31.

[55] SU H I，SAMMEL M D，HOMER M V，et al. Comparability of anti-Mullerian hormone levels among commercially available immunoassays[J]. Fertil Steril，2014，101（6）：1766-1772.

[56] 田潤(rùn)華，鄭春喜，王士珍.電化學(xué)發(fā)光免疫分析與臨床應(yīng)用[J].齊魯醫(yī)學(xué)雜志，2004，19（5）：464-465.

[57] 曾 玉，吳 畏，姚 輝，等.羅氏公司Cobas E602電化學(xué)發(fā)光分析儀檢測(cè)抗苗勒管激素的方法學(xué)評(píng)價(jià)[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，37（23）：3338-3340.

[58] VAN H J，WEISKIRCHEN R. Performance of the two new fully automated anti-Mullerian hormone immunoassays compared with the clinical standard assay[J].Hum Reprod，2015，30（8）：1918-1926.

[59] EUSEBE D，DI CLEMENTE N，REY R，et al. Cloning and expression of the chick anti-Mullerian hormone gene[J].Journal of Biological Chemistry，1996，271（9）：4798-4804.

[60] WOJTUSIK J，JOHNSON P A. Vitamin D regulates anti-Mullerian hormone eapression in granulose cells of the hen[J].Biol Reprod，2012，86（3）：1-7.

[61] LUKE S L，KIRSTEN R M. Overexpression of anti-Mullerian hormone disrupts gonadal sex differentiation，blocks sex hormone synthesis，and supports cell autonomous sex development in the chicken[J].Endocrinology，2016，157（3）：1258-1275.

[62] SHEN M M，SUN H Y，QU L，et al. Genetic architecture and candidate genes identified for follicle number in chicken[R].Scientific Reports 7，Article number：16412，2017-11-27，DOI：10.1038/s41598-017-16557-1.

[63] 陳 蓉，應(yīng)詩(shī)家，陳 哲，等.AMH及其相關(guān)基因在鴨不同等級(jí)卵泡中的表達(dá)[J].江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào)，2018，34（1）：87-92.

[64] 薛建華，呂小青，孫鳳俊，等.血漿抗苗勒氏管激素水平預(yù)測(cè)荷斯坦牛胚胎生產(chǎn)能力的研究初報(bào)[J].中國(guó)奶牛，2014（13）：21-23.

[65] LAHOZ B，ALABART J L，MONNIAUX D，et al. Anti-Mullerian hormone plasma concentration in prepubertal ewe lambs as a predictor of their fertility at a young age[J].BMC Vet Res，2012（8）：118-124.

[66] IVANOV M，KACEVSKA M，INGELMAN-SUNDBERG M.Epigenomics and interindividual differences in drug response[J].Clin Pharmacol Ther，2012，92（6）：727-736.

[67] 高雪林，劉 瑩，王一青.抗苗勒管激素臨床研究應(yīng)用新進(jìn)展[J].中華生殖與避孕雜志，2017，37（6）：507-510.

[68] 王冬雪，吳小華.抗苗勒管激素的臨床研究進(jìn)展[J].現(xiàn)代婦產(chǎn)科進(jìn)展，2016，25（12）：954-956，960.

[69] 張小剛，劉 霞，劉 飛，等.AMH檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J].食品與藥品，2017，19（5）：372-377.