• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    分散固相萃取-氣相色譜-質譜法測定茶葉中18種多氯聯(lián)苯

    2018-10-11 07:45:26劉騰飛楊代鳳章雪明董明輝
    色譜 2018年10期

    劉騰飛, 楊代鳳*, 章雪明, 毛 健, 董明輝

    (1. 江蘇太湖地區(qū)農業(yè)科學研究所, 江蘇 蘇州 215155; 2. 蘇州市農產品質量安全監(jiān)測中心, 江蘇 蘇州 215128)

    多氯聯(lián)苯(PCBs)是一類人工合成的氯代聯(lián)苯類芳烴化合物,曾作為優(yōu)質工業(yè)添加劑(熱載體、阻燃劑、增塑劑、絕緣材料等)應用于印刷、化工、電力等領域[1]。PCBs隨著相關產品在生產、使用、處置、廢棄以及一些工業(yè)生產過程(如金屬冶煉、廢棄物焚燒、電力生產)[2-4]中的非故意生成和排放,被逐漸釋放到環(huán)境中,從而對生態(tài)環(huán)境造成影響,并通過食物鏈影響到人類健康。研究[5-7]表明,PCBs具有很強的生物毒性,能夠導致生物體內分泌紊亂以及免疫和生殖系統(tǒng)破壞,誘發(fā)癌癥和神經(jīng)性疾病。20世紀70年代開始,PCBs已在全球范圍內停產和使用,但由于其高穩(wěn)定、半揮發(fā)等特性,使其在環(huán)境中殘留并積累,在空氣[8]、土壤[9]、水體[10]、沉積物[11]、食品[12]等各類介質中不斷被檢出,已成為一類普遍存在的持久性有機污染物,被列入斯德哥爾摩公約首批控制污染物名單[13]。因此建立快速簡便的分析方法以檢測此類物質具有十分重要的意義。

    目前PCBs的檢測方法主要有氣相色譜-電子捕獲檢測器法(GC-ECD)[4,8]、氣相色譜-質譜法(GC-MS)[3,12]和氣相色譜-串聯(lián)質譜法(GC-MS/MS)[10]等,其中GC-MS不僅能準確定性定量,且儀器相對便宜,容易大范圍的配備和使用,是目前測定PCBs最常用的方法,也是國家或行業(yè)標準推薦采用的方法[14,15]。但上述方法采用的樣品前處理技術主要為液液萃取[4,12]、索氏提取[9]、加速溶劑萃取[12]、微波輔助萃取[16]等萃取技術,以及固相萃取[4,10,12]、濃硫酸磺化[17]、固相微萃取[18]、分散液液微萃取[19]等凈化方法,它們往往過程繁瑣、費時,溶劑消耗量大,分析成本偏高。

    近年來,分散固相萃取(dSPE)技術以其操作簡單、快速、高效、成本低廉等優(yōu)點得到迅速發(fā)展,并在環(huán)境、食品等領域得到了廣泛應用。該技術基于吸附原理,將吸附劑直接加入到樣品提取液中,通過渦旋振蕩等方式,與基質干擾物充分接觸,使干擾物吸附在吸附劑上,達到樣品凈化的目的[20]。常用的吸附劑有N-丙基乙二胺(PSA)、石墨化炭黑(GCB)、C18等,但其對復雜基質的凈化效果并不理想,而且價格相對較高。碳納米管是一種新型納米碳材料,與PSA、C18、GCB相比,具有比表面積大、吸附容量高、吸附性能佳、選擇性高、價格低廉等優(yōu)點,近年來被作為分散固相萃取吸附劑廣泛應用于水體、土壤、食品等樣品中農藥、獸藥、重金屬等污染物的檢測[21-23],有效地提高了前處理效率,降低了檢測成本。但將碳納米管作為分散固相萃取吸附劑用于茶葉中PCBs的檢測尚未見報道。

    茶葉作為世界公認的天然健康飲料作物,其安全問題在全球范圍內備受關注。研究[24-29]表明,國內外茶葉均不同程度地受到PCBs的污染。莊惠生等[24]采用間接競爭酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測出鐵觀音茶葉中含有3,4-二氯聯(lián)苯(PCB12),其含量為 0.004 3 μg/L。Amakura等[25]報道了5種保健茶中類二惡英類PCBs的含量水平,為0.6~30.8 pg/g。目前關于茶葉中PCBs的研究相對較少,且只涉及茶葉中少數(shù)幾種PCBs,同時快速檢測茶葉中18種PCBs的方法未見報道。

    本文針對茶葉基質的特點,以碧螺春茶、鐵觀音茶、普洱茶3種茶葉為研究對象,采用吸附性能好、凈化效率高的羧基化多壁碳納米管(MWCNTs-COOH)作為dSPE的吸附劑,結合GC-MS,建立了同時檢測18種PCBs的分析方法。該方法操作簡單,凈化效果好,分析成本低,準確度高,穩(wěn)定性好,可用于不同種類茶葉基質中PCBs的測定,對于保證茶葉質量安全具有重要意義。

    1 實驗部分

    1.1 儀器、試劑與材料

    7890B-5977A氣相色譜-質譜聯(lián)用儀(美國Agilent公司); KQ-500DE超聲波清洗器(昆山超聲儀器公司); TG16-WS臺式高速離心機(湖南湘儀實驗儀器公司); K600粉碎機(德國博朗公司); HSC-24B氮吹儀(天津恒奧科技公司); Direct-Q 5 UV型超純水機(美國Millipore公司)。

    18種PCBs混合標準溶液:2,4,4′-三氯聯(lián)苯(PCB28)、2,2′ ,5,5′-四氯聯(lián)苯(PCB52)、2,2′ ,4,5,5′-五氯聯(lián)苯(PCB101)、2,3′ ,4,4′ ,5-五氯聯(lián)苯(PCB118)、2,2′ ,4,4′ ,5,5′-六氯聯(lián)苯(PCB153)、2,2′ ,3,4,4′ ,5′-六氯聯(lián)苯(PCB138)、2,2′ ,3,4,4′ ,5,5′-七氯聯(lián)苯(PCB180)、3,4,4′ ,5-四氯聯(lián)苯(PCB81)、3,3′ ,4,4′-四氯聯(lián)苯(PCB77)、2′ ,3,4,4′ ,5-五氯聯(lián)苯(PCB123)、2,3,4,4′ ,5-五氯聯(lián)苯(PCB114)、2,3,3′ ,4,4′-五氯聯(lián)苯(PCB105)、3,3′ ,4,4′ ,5-五氯聯(lián)苯(PCB126)、2, 3′ ,4,4′ ,5,5′-六氯聯(lián)苯(PCB167)、2,3,3′ ,4,4′ ,5-六氯聯(lián)苯(PCB156)、2,3,3′ ,4,4′ ,5′-六氯聯(lián)苯(PCB157)、3,3′ ,4,4′ ,5,5′-六氯聯(lián)苯(PCB169)、2,3,3′ ,4,4′,5,5′-七氯聯(lián)苯(PCB189),質量濃度均為10 mg/L,購于美國o2si公司。

    多壁碳納米管(長度:10~30 μm,外徑:10~20 nm,內徑:5~10 nm,純度:>95% ,比表面積:>200 m2/g)、羥基化多壁碳納米管(MWCNTs-OH,長度:10~30 μm,外徑:10~20 nm,內徑:5~10 nm,純度:>95% ,比表面積:>200 m2/g)、MWCNTs-COOH(長度:10~30 μm,外徑:10~20 nm,內徑:5~10 nm,純度:>95% ,比表面積:>200 m2/g)、PSA(粒度40~60 μm)、GCB(粒度40~120 μm)、C18(粒度40~60 μm)均購于天津艾杰爾公司;弗羅里硅土(Florisil, 60~100目,農殘級)購于美國ROE公司;正己烷(色譜純,瑞典歐普森公司);丙酮、乙酸乙酯、乙腈、甲苯、氯化鈉、無水硫酸鈉(用前于450 ℃灼燒4 h)、無水硫酸鎂(用前于620 ℃灼燒4 h)均為分析純(上海國藥集團公司)。

    碧螺春茶、鐵觀音茶、普洱茶樣品均購自蘇州當?shù)爻小H∵m量樣品粉碎,混勻,過20目篩,備用。

    1.2 標準溶液配制

    準確量取1 mL 10 mg/L 的18種PCBs混合標準溶液,置于10 mL容量瓶中,用正己烷定容,配制成1 mg/L 的混合標準儲備液,于4 ℃冰箱冷藏保存;使用前于室溫下用正己烷逐級稀釋成5、10、50、100和500 μg/L 的混合標準工作溶液。

    取1 g空白茶葉樣品,按照提取凈化條件處理后,加入1.0 mL不同濃度的混合標準工作溶液,振蕩混勻,過0.22 μm有機濾膜,得到對應濃度的基質匹配標準溶液。

    1.3 樣品前處理

    稱取粉碎后的茶葉樣品1 g(精確至0.01 g),置于50 mL塑料離心管中,加入1 g無水硫酸鈉和15 mL正己烷-丙酮(1∶1, v/v),渦旋混勻,在500 W功率下超聲提取15 min(期間取出振搖2次),以 8 000 r/min 離心4 min,取7.5 mL上清液至玻璃試管中,氮吹濃縮至0.5 mL,加入1 mL甲苯,繼續(xù)氮吹至0.5 mL,然后用甲苯定容至5 mL,待凈化。

    將上述5 mL甲苯溶液轉移至填裝有0.14 g MWCNTs-COOH、0.13 g PSA和0.1 g無水硫酸鎂的凈化管中,渦旋2 min,以 9 000 r/min 離心5 min,取上清液氮吹至近干,定量加入0.5 mL正己烷,渦旋混勻,過0.22 μm有機膜,供GC-MS分析。

    1.4 氣相色譜-質譜條件

    色譜柱:HP-5MS石英毛細管柱(30 m×0.25 mm, 0.25 μm);進樣口溫度:250 ℃;載氣:高純氮氣;流速:1.2 mL/min,恒流模式;不分流進樣;進樣量:1.0 μL。升溫程序:初始溫度80 ℃,保持2 min;以20 ℃/min 的速率升溫至180 ℃,保持2 min;再以3 ℃/min 的速率升溫至230 ℃,保持2 min;再以10 ℃/min 的速率升溫至280 ℃,保持2 min。

    離子源:電子轟擊(EI)離子源;離子源溫度:280 ℃;電離電壓:70 eV;四極桿溫度:150 ℃;傳輸線溫度:280 ℃;檢測方式:選擇離子掃描(SIM);溶劑延遲:5 min。18種PCBs的保留時間、特征離子及其相對豐度比見表1。

    表 1 18種PCBs的保留時間、特征離子及其相對豐度

    *Quantitative ion.

    2 結果與討論

    2.1 分析條件的優(yōu)化

    PCBs為弱極性化合物,因此選用弱極性、低流失的HP-5MS毛細管柱進行色譜分離,并根據(jù)靈敏度和分析時間,調整升溫程序、載氣流速、進樣口溫度等參數(shù),最終確定色譜條件。

    在選定的色譜條件下,利用GC-MS全掃描方式,在m/z50~450范圍內,對500 μg/L 的18種PCBs混合標準溶液進行分析,得到總離子流(TIC)色譜圖,并根據(jù)NIST標準譜庫進行檢索,確定各目標物的保留時間,并在扣除背景后的質譜圖中選擇響應豐度高、相對分子質量大且基質干擾少的特征離子分時段分別監(jiān)測。

    18種PCBs混合標準溶液(500 μg/L)的色譜圖見圖1。可以看出,18種目標物均得到了良好的分離,且具有較高的靈敏度。

    圖 1 18種PCBs混合標準溶液(500 μg/L)的色譜圖Fig. 1 Chromatogram of the 18 PCBs mixed standard solution (500 μg/L)

    2.2 提取條件的優(yōu)化

    2.2.1提取溶劑的選擇

    為了確定合適的提取溶劑,實驗以茶多酚和色素含量較高的碧螺春茶為基質,在10 μg/kg 的加標水平下,分別以正己烷、乙腈、乙酸乙酯、正己烷-丙酮(1∶1, v/v)、正己烷-乙酸乙酯(4∶1, v/v)為提取溶劑,比較了18種目標物的提取效率。如圖2a所示,當以正己烷-丙酮(1∶1, v/v)為提取溶劑時,18種目標物的回收率均較好,達82%以上。因此選擇正己烷-丙酮(1∶1, v/v)作為最佳提取溶劑。

    圖 2 不同提取凈化條件對18種PCBs回收率的影響(n=3)Fig. 2 Effects of different extraction and purification conditions on the recoveries of the 18 PCBs (n=3) a. type of extraction solvent; b. volume of extraction solvent; c. ultrasonic extraction time; d. volume of toluene; e. amount of carboxylated multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs-COOH); f. amount of primary secondary amine (PSA); g. clean-up time.

    圖 2 (續(xù))Fig. 2 (Continued)

    2.2.2提取體積的選擇

    選擇正己烷-丙酮(1∶1, v/v)為提取溶劑,以加標水平10 μg/kg 的碧螺春茶為基質,以回收率為指標,考察不同提取體積(5、8、10、12和15 mL)對各目標物提取效率的影響。如圖2b所示,隨著提取體積的增大,目標物的提取效率增加,當提取體積為15 mL時,提取效率最佳,18種PCBs的回收率為93% ~108% ,因此選擇15 mL為最佳提取體積。

    2.2.3提取方法及提取時間的選擇

    超聲提取法具有條件溫和、速度快、批量處理能力強的特點[4,17],因此實驗采用超聲提取法進行前處理。

    提取時間對目標物的提取效果影響較大。用時過短無法充分提取目標物,用時過長則會導致溶劑的損失,同時增加樣品中雜質的溶出量,影響檢測的準確性。實驗以加標水平10 μg/kg 的碧螺春茶為基質,考察不同超聲提取時間(5、10、15和20 min)對目標物回收率的影響。如圖2c所示,隨著超聲提取時間的增加,目標物的回收率增大。當超聲提取時間為15 min時,各目標物的回收率均能達到95%以上,繼續(xù)延長超聲時間至20 min,各目標物的回收率變化不大,部分目標物如PCB28、PCB52、PCB101、PCB180的回收率有小幅下降。因此選擇超聲提取時間為15 min。

    2.3 凈化條件的優(yōu)化

    茶葉提取液中含有大量的茶多酚、兒茶素、色素等干擾雜質,若不經(jīng)凈化直接進入質譜儀會影響檢測結果的準確性,并可能污染儀器。實驗采用分散固相萃取凈化去除雜質,并考察了吸附劑的種類和用量、凈化吸附時間等因素對凈化效果的影響。

    2.3.1吸附劑種類和用量的選擇

    吸附劑需滿足去除基質中主要雜質的同時對目標物不產生吸附。實驗以Florisil、C18、PSA、GCB、MWCNTs、MWCNTs-OH、MWCNTs-COOH等7種填料為凈化吸附劑,考察其對茶葉提取液中色素的去除效果。如圖3所示,茶葉提取液未經(jīng)凈化時,呈墨綠色渾濁狀。MWCNTs-COOH對色素具有良好的吸附去除作用,提取液經(jīng)凈化處理后,呈無色透明狀態(tài),而采用其他凈化填料凈化后,溶液均有一定顏色。PSA對茶葉中色素的吸附能力較弱,但能有效去除茶多酚和兒茶素類物質[30,31]。因此,本實驗將MWCNTs-COOH和PSA混合使用對茶葉提取液進行凈化,以有效除去提取液中色素、茶多酚、兒茶素等雜質成分。

    圖 3 不同吸附劑對茶葉提取液凈化效果的影響Fig. 3 Effect of different adsorbents on the purification effect of the tea extraction A: without adsorbent; B: Florisil; C: C18; D: PSA; E: graphitized carbon black (GCB); F: multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs)-OH; G: MWCNTs; H: MWCNTs-COOH.

    吸附劑用量是影響樣品凈化效果和目標物回收率的重要因素,用量少時凈化效果不明顯,用量多時回收率偏低,不能滿足分析要求。實驗發(fā)現(xiàn),在加標水平為10 μg/kg 的茶葉提取液中,當加入MWCNTs-COOH凈化處理后,僅有PCB52、PCB101、PCB153、PCB138、PCB180 5種目標物的回收率大于80% ,符合檢測要求,其余13種目標物的回收率均較差,低于67% ,其中有4種PCBs的回收率為0,說明MWCNTs-COOH在去除色素雜質的同時,對目標物產生了強烈吸附,導致回收率偏低。實驗在濃縮過程中用甲苯對提取液正己烷-丙酮(1∶1, v/v)進行溶劑置換,然后再進行凈化,發(fā)現(xiàn)所有目標物的回收率均得到顯著提高,回收率增至98% ~106% ,解決了MWCNTs-COOH對目標物產生吸附的問題。

    實驗進一步考察了甲苯用量(2、3、4、5和6 mL)對目標物凈化回收率的影響。如圖2d所示,隨著甲苯用量的增加,目標物的回收率逐漸增大,當用量為5 mL時,回收率均在94% ~105%之間,滿足分析要求,繼續(xù)增大甲苯用量,回收率無明顯變化,且雜質會被溶解下來,引起基質效應。因此選擇甲苯的最佳用量為5 mL。

    在此基礎上,以加標水平10 μg/kg 的碧螺春茶為基質,按1.3節(jié)所述方法進行前處理,考察了不同MWCNTs-COOH用量(0.08、0.10、0.12、0.14和0.16 g)對目標物回收率的影響。如圖2e和圖4所示,MWCNTs-COOH對基質中色素的凈化效果顯著,隨著用量的增大,提取液顏色逐漸變淺,回收率呈下降趨勢,當用量為0.14 g時,溶液顏色趨于澄清透明,且所有目標物的回收率均較好,在91% ~106%之間,滿足分析要求。因此選擇MWCNTs-COOH的用量為0.14 g。

    實驗考察了不同PSA用量(0.12、0.13、0.14、0.15和0.16 g)對茶葉提取液的凈化效果及目標物回收率的影響(見圖2f)。結果表明,隨著PSA用量的增加,目標物的回收率逐漸降低,當用量為0.12 g時,部分目標物的回收率大于111% ,用量為0.13 g時,回收率均在89% ~107%之間,滿足分析的要求。茶葉提取液經(jīng)不同質量的PSA凈化后,溶液顏色仍較深且變化不大,這與榮杰峰等[32]的研究結果一致。因此選擇PSA用量為0.13 g。

    2.3.2吸附凈化時間的選擇

    吸附凈化時間會對目標物回收率和凈化效果產生影響。實驗以加標水平10 μg/kg 的碧螺春綠茶為基質,按1.3節(jié)所述方法,將渦旋振蕩時間分別設為1、2、3和4 min,考察凈化劑作用時間對目標物回收率的影響(見圖2g)。結果表明,當凈化時間為2 min時,目標物的整體回收率最好,介于96% ~109%之間;繼續(xù)延長凈化時間,目標物容易被吸附劑吸附,造成回收率下降,不利于目標物的檢測。因此選擇最佳凈化時間為2 min。

    2.4 基質效應

    基質效應普遍存在于痕量物質的分析過程中并會給定量結果造成影響。本實驗以基質匹配標準曲線與純溶劑標準曲線斜率之比來確定基質效應,當斜率比在0.9~1.1之間時,基質效應可忽略,大于1.1時為基質增強效應,小于0.9時則為基質減弱效應[33]。結果表明,同一目標物在不同基質中的基質效應不同,不同目標物在同一基質中的基質效應也各不相同。在3種茶葉基質中,PCB28和PCB118受基質種類影響較小,斜率比在1.035~1.097之間(見表2),基質效應可忽略,其他目標物均表現(xiàn)出不同程度的基質增強效應。因此本實驗采用基質匹配標準溶液進行定量,以補償基質效應對定量結果的影響。

    2.5 線性范圍、檢出限和定量限

    按1.2節(jié)描述分別配制5、10、50、100、500 μg/kg 的基質匹配標準溶液,按1.4節(jié)分析條件進行測定,以目標物的峰面積(Y)為縱坐標、質量濃度(X, μg/kg)為橫坐標進行線性回歸,繪制基質標準曲線(見表2)。結果表明,在5~500 μg/kg 范圍內,18種目標物峰面積與其含量呈線性相關,相關系數(shù)(r)為 0.999 8~1.000 0。在空白茶葉基質中添加不同濃度的標準溶液進行樣品前處理和測定,以特征離子色譜峰信噪比(S/N)≥3確定方法的檢出限(LOD),為0.3~1.7 μg/kg;以S/N≥10且回收率滿足要求的最小添加水平為定量限(LOQ),為5 μg/kg(見表2)。

    2.6 回收率與精密度

    采用標準添加法,在碧螺春茶、鐵觀音茶與普洱茶3種空白基質中分別添加5、10、100 μg/kg 的18種PCBs混合標準溶液,混勻后靜置得到加標樣品,按1.3節(jié)和1.4節(jié)進行前處理和測定,每個水平重復5次,計算回收率和相對標準偏差(RSD)。結果表明,在3個添加水平下,各目標物的平均回收率為90.7% ~115.2% , RSD為0.3% ~10.9%(見表3),方法的準確度高,精密度好。

    2.7 實際樣品檢測

    為驗證本方法的可行性,從蘇州當?shù)爻匈徺I3種不同茶葉樣品(碧螺春茶、鐵觀音茶、普洱茶),利用所建立的方法進行前處理并測定其中18種PCBs的含量。結果表明,所有樣品均未檢出目標污染物。

    3 結論

    本文建立了dSPE-GC-MS測定茶葉中18種PCBs的分析方法。該方法操作簡單,快速準確,靈敏度高,凈化效果好,為開展茶葉中PCBs的研究提供了有效方法。

    别揉我奶头 嗯啊视频| 深爱激情五月婷婷| 亚洲成人av在线免费| 亚洲成人久久爱视频| 91在线精品国自产拍蜜月| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 亚洲欧洲日产国产| 99久久中文字幕三级久久日本| 免费看a级黄色片| 国产高清不卡午夜福利| 国产成人freesex在线| 国产亚洲av嫩草精品影院| 久久久久久伊人网av| 边亲边吃奶的免费视频| 99久久久亚洲精品蜜臀av| 免费看光身美女| 免费无遮挡裸体视频| 免费观看精品视频网站| 精品人妻视频免费看| 一进一出抽搐gif免费好疼| 搞女人的毛片| 成人永久免费在线观看视频| 网址你懂的国产日韩在线| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 免费观看a级毛片全部| 日韩三级伦理在线观看| 欧美一区二区亚洲| 午夜免费激情av| 卡戴珊不雅视频在线播放| 午夜福利在线观看吧| 美女高潮的动态| 高清毛片免费看| 国产美女午夜福利| 亚洲欧美精品综合久久99| 99热这里只有精品一区| 亚洲丝袜综合中文字幕| 欧美+日韩+精品| 亚洲最大成人中文| 久久鲁丝午夜福利片| 看十八女毛片水多多多| 亚洲在线自拍视频| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 在线观看66精品国产| h日本视频在线播放| 国产精品一区二区性色av| 国产精品1区2区在线观看.| 国产精品99久久久久久久久| 夫妻性生交免费视频一级片| 成人亚洲欧美一区二区av| 国语自产精品视频在线第100页| 在线a可以看的网站| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲中文字幕一区二区三区有码在线看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 亚洲自拍偷在线| 国产一区二区三区av在线 | 亚洲欧美清纯卡通| 午夜福利视频1000在线观看| 在线观看午夜福利视频| 少妇的逼好多水| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 国产精品一区www在线观看| 男人狂女人下面高潮的视频| 欧美潮喷喷水| 黄色日韩在线| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 可以在线观看毛片的网站| 国产又黄又爽又无遮挡在线| 伊人久久精品亚洲午夜| 亚洲人成网站在线播放欧美日韩| 日本免费一区二区三区高清不卡| 亚洲精品日韩av片在线观看| 欧美性猛交黑人性爽| 亚洲欧美清纯卡通| 免费看av在线观看网站| 成人综合一区亚洲| 在线a可以看的网站| 国产一区二区三区av在线 | 99热6这里只有精品| 色尼玛亚洲综合影院| 亚洲第一电影网av| 啦啦啦啦在线视频资源| 午夜激情欧美在线| 欧美3d第一页| 亚洲成人精品中文字幕电影| 亚洲一区二区三区色噜噜| 久久热精品热| 欧美bdsm另类| 天堂√8在线中文| 黄片无遮挡物在线观看| 人妻少妇偷人精品九色| 亚洲av免费高清在线观看| 国内精品宾馆在线| 欧美丝袜亚洲另类| 免费人成视频x8x8入口观看| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 亚洲av男天堂| 国产成年人精品一区二区| 国产一区亚洲一区在线观看| 日韩av不卡免费在线播放| 伦理电影大哥的女人| 天天一区二区日本电影三级| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 天天一区二区日本电影三级| 99久久无色码亚洲精品果冻| 成人午夜高清在线视频| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 亚洲欧美清纯卡通| 国产中年淑女户外野战色| 久久精品国产99精品国产亚洲性色| 精品午夜福利在线看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 午夜福利在线观看免费完整高清在 | 亚洲人与动物交配视频| 亚洲精品久久国产高清桃花| 久久久精品94久久精品| www.色视频.com| 2022亚洲国产成人精品| 国产毛片a区久久久久| 日本在线视频免费播放| 久久精品夜色国产| 午夜激情欧美在线| 国产91av在线免费观看| 亚洲在线自拍视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 中国美白少妇内射xxxbb| 欧美高清成人免费视频www| 伦精品一区二区三区| 国产精品国产高清国产av| 国产精品一区二区三区四区免费观看| 国内精品一区二区在线观看| 黄色配什么色好看| 美女脱内裤让男人舔精品视频 | 国产乱人视频| 日韩欧美精品v在线| 高清日韩中文字幕在线| 成年女人永久免费观看视频| 激情 狠狠 欧美| 亚洲高清免费不卡视频| 毛片一级片免费看久久久久| 99九九线精品视频在线观看视频| 丰满乱子伦码专区| 嫩草影院精品99| 99九九线精品视频在线观看视频| 黄色视频,在线免费观看| av在线播放精品| 国产老妇伦熟女老妇高清| 婷婷色av中文字幕| 久久人妻av系列| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 亚洲精品456在线播放app| 高清毛片免费看| 欧美最黄视频在线播放免费| av专区在线播放| 99久久精品一区二区三区| 岛国毛片在线播放| 国产三级中文精品| 成人国产麻豆网| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看 | 久久精品国产亚洲av涩爱 | 日产精品乱码卡一卡2卡三| 久久99精品国语久久久| 美女脱内裤让男人舔精品视频 | 午夜精品在线福利| 一边摸一边抽搐一进一小说| 男人的好看免费观看在线视频| 一个人免费在线观看电影| 亚洲精品色激情综合| 舔av片在线| 国产高清有码在线观看视频| 久久精品国产清高在天天线| 国产 一区精品| 日本与韩国留学比较| 国产私拍福利视频在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 久久久久性生活片| 看黄色毛片网站| 亚洲第一区二区三区不卡| av免费在线看不卡| 国产精品久久视频播放| 亚洲久久久久久中文字幕| 亚洲欧美日韩东京热| 国产精品无大码| 国产视频首页在线观看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久久精品夜色国产| 可以在线观看的亚洲视频| 久久精品国产亚洲网站| 欧美另类亚洲清纯唯美| 少妇的逼水好多| 波野结衣二区三区在线| av.在线天堂| 久久精品人妻少妇| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 男人舔女人下体高潮全视频| 国产精品一及| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 99riav亚洲国产免费| 成人无遮挡网站| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 欧美3d第一页| 色尼玛亚洲综合影院| 欧美最黄视频在线播放免费| 亚洲欧美成人精品一区二区| 亚洲美女搞黄在线观看| 国产色爽女视频免费观看| 少妇的逼水好多| 特级一级黄色大片| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 精品久久久久久久末码| 久99久视频精品免费| 日韩一区二区三区影片| 尤物成人国产欧美一区二区三区| 国产大屁股一区二区在线视频| 一本精品99久久精品77| 国产精品乱码一区二三区的特点| 成人毛片60女人毛片免费| 亚洲av中文av极速乱| 国产精品av视频在线免费观看| 一边亲一边摸免费视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 一级二级三级毛片免费看| 国产精品嫩草影院av在线观看| 一本久久中文字幕| 成人无遮挡网站| 男人狂女人下面高潮的视频| 可以在线观看毛片的网站| 成人特级黄色片久久久久久久| 3wmmmm亚洲av在线观看| 国产精品三级大全| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 99久久九九国产精品国产免费| 在线a可以看的网站| 1000部很黄的大片| 97超视频在线观看视频| 两个人视频免费观看高清| 成人午夜高清在线视频| 最近的中文字幕免费完整| 国产久久久一区二区三区| 亚洲在线自拍视频| 成人欧美大片| 老女人水多毛片| 亚洲四区av| 亚洲人成网站在线播| 精品久久久久久久久久久久久| 舔av片在线| 午夜老司机福利剧场| 国产精品一二三区在线看| 亚洲国产精品国产精品| 亚洲色图av天堂| www日本黄色视频网| 亚洲国产欧美人成| 69av精品久久久久久| 国产亚洲精品久久久com| 亚洲av免费高清在线观看| 少妇熟女欧美另类| 99热这里只有是精品50| 久久鲁丝午夜福利片| 国产精品无大码| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 精品久久久久久久末码| 校园春色视频在线观看| 亚洲国产日韩欧美精品在线观看| 天天一区二区日本电影三级| 天堂中文最新版在线下载 | 久久久久网色| 中文字幕免费在线视频6| 欧美高清成人免费视频www| 人妻夜夜爽99麻豆av| www.色视频.com| 午夜免费激情av| 丝袜喷水一区| 国产精品1区2区在线观看.| 亚洲av中文av极速乱| 国产av不卡久久| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 中文字幕制服av| 欧美日本视频| 小说图片视频综合网站| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 日韩三级伦理在线观看| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 九九爱精品视频在线观看| 国产午夜福利久久久久久| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 爱豆传媒免费全集在线观看| а√天堂www在线а√下载| 给我免费播放毛片高清在线观看| 国产精品伦人一区二区| 亚洲三级黄色毛片| 亚洲第一区二区三区不卡| 亚洲欧洲国产日韩| 校园人妻丝袜中文字幕| 免费在线观看成人毛片| 特级一级黄色大片| 精品一区二区免费观看| 美女内射精品一级片tv| 久久草成人影院| 亚洲在线自拍视频| 一个人看的www免费观看视频| 最好的美女福利视频网| 91久久精品国产一区二区三区| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产91av在线免费观看| 看黄色毛片网站| 不卡一级毛片| АⅤ资源中文在线天堂| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 欧美成人免费av一区二区三区| 国产成人午夜福利电影在线观看| 日本黄色视频三级网站网址| 深夜a级毛片| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 日本一二三区视频观看| 中文字幕人妻熟人妻熟丝袜美| .国产精品久久| 久久99热这里只有精品18| 一级毛片久久久久久久久女| 国产v大片淫在线免费观看| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 亚洲最大成人中文| 日韩人妻高清精品专区| 国产成人福利小说| 国产真实乱freesex| 一级毛片aaaaaa免费看小| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 国产精品一区二区三区四区免费观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产一区二区激情短视频| 久久久久九九精品影院| 国产在视频线在精品| 国产午夜福利久久久久久| 国产精品久久久久久精品电影| 青青草视频在线视频观看| 久久精品国产亚洲网站| 在线国产一区二区在线| 悠悠久久av| 有码 亚洲区| 久久人人爽人人片av| 欧美变态另类bdsm刘玥| 大型黄色视频在线免费观看| 日韩欧美三级三区| 国产老妇伦熟女老妇高清| 亚洲成av人片在线播放无| 国产不卡一卡二| 一本久久精品| 亚洲不卡免费看| 日本在线视频免费播放| 亚洲欧美日韩东京热| 欧美bdsm另类| 能在线免费看毛片的网站| 免费看av在线观看网站| 真实男女啪啪啪动态图| 欧美日本视频| 22中文网久久字幕| 久久综合国产亚洲精品| 亚洲国产精品国产精品| 边亲边吃奶的免费视频| 亚洲成人久久性| 中文精品一卡2卡3卡4更新| АⅤ资源中文在线天堂| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产三级在线视频| 亚洲av男天堂| 性插视频无遮挡在线免费观看| 国产精品蜜桃在线观看 | 黄色一级大片看看| 久久99热这里只有精品18| 久久九九热精品免费| 日韩一区二区视频免费看| 国产91av在线免费观看| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片| 国产日本99.免费观看| 免费av不卡在线播放| 国产男人的电影天堂91| 99在线视频只有这里精品首页| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 伦理电影大哥的女人| 亚洲18禁久久av| 老司机影院成人| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 精品午夜福利在线看| 美女 人体艺术 gogo| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 一区福利在线观看| 免费观看的影片在线观看| 伦精品一区二区三区| 亚洲内射少妇av| 免费看日本二区| 两个人的视频大全免费| 高清毛片免费观看视频网站| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产亚洲精品久久久久久毛片| 男女边吃奶边做爰视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 美女大奶头视频| 久久久久网色| 亚洲成人av在线免费| 校园人妻丝袜中文字幕| 免费一级毛片在线播放高清视频| 91aial.com中文字幕在线观看| 男女视频在线观看网站免费| 日韩成人伦理影院| 丰满人妻一区二区三区视频av| 精品人妻熟女av久视频| 国产极品精品免费视频能看的| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 中文字幕久久专区| 男女做爰动态图高潮gif福利片| 少妇人妻精品综合一区二区 | 12—13女人毛片做爰片一| 一夜夜www| 国产 一区 欧美 日韩| 久久国产乱子免费精品| 欧美色视频一区免费| 久久久久国产网址| 久久精品综合一区二区三区| 又爽又黄a免费视频| 大型黄色视频在线免费观看| 亚洲av第一区精品v没综合| 欧美一级a爱片免费观看看| 九九久久精品国产亚洲av麻豆| 精品欧美国产一区二区三| 麻豆成人av视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 中文字幕制服av| 日本与韩国留学比较| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 免费一级毛片在线播放高清视频| 国产精品久久久久久精品电影| 久久久久性生活片| 又粗又爽又猛毛片免费看| 乱系列少妇在线播放| 我的老师免费观看完整版| 九草在线视频观看| 久久久久久久久大av| 性色avwww在线观看| 欧美日韩国产亚洲二区| 丰满人妻一区二区三区视频av| 成人午夜高清在线视频| 国产欧美日韩精品一区二区| 婷婷六月久久综合丁香| 久久久国产成人免费| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 国产成人a∨麻豆精品| 免费人成在线观看视频色| 日本色播在线视频| 午夜爱爱视频在线播放| 美女脱内裤让男人舔精品视频 | a级毛片免费高清观看在线播放| 夜夜夜夜夜久久久久| 黄色日韩在线| 又粗又硬又长又爽又黄的视频 | 午夜久久久久精精品| 1000部很黄的大片| 亚洲av第一区精品v没综合| 在线播放国产精品三级| av在线蜜桃| 美女内射精品一级片tv| 午夜免费男女啪啪视频观看| 日日撸夜夜添| 99久久人妻综合| 美女大奶头视频| 99久久精品国产国产毛片| 久久久a久久爽久久v久久| 成人三级黄色视频| 能在线免费看毛片的网站| 久久久久免费精品人妻一区二区| 免费观看a级毛片全部| 久久午夜福利片| 黄色配什么色好看| 舔av片在线| 一本久久中文字幕| av女优亚洲男人天堂| 赤兔流量卡办理| 九色成人免费人妻av| 国产黄色小视频在线观看| 中文字幕熟女人妻在线| 欧美高清性xxxxhd video| 欧美又色又爽又黄视频| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 久久这里有精品视频免费| 久久精品国产亚洲av香蕉五月| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产成人freesex在线| 国产精品女同一区二区软件| 国产亚洲精品av在线| 国产私拍福利视频在线观看| 青春草国产在线视频 | 99热全是精品| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 美女脱内裤让男人舔精品视频 | 日韩三级伦理在线观看| 国产一级毛片在线| 国产精品一区二区性色av| 国产精华一区二区三区| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看| 99热只有精品国产| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久久久久久久久久免费av| 丰满乱子伦码专区| 亚洲在线观看片| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 91久久精品国产一区二区成人| 欧美成人免费av一区二区三区| av.在线天堂| 深爱激情五月婷婷| 国产v大片淫在线免费观看| 欧美精品一区二区大全| 在现免费观看毛片| 麻豆久久精品国产亚洲av| 69av精品久久久久久| 亚洲丝袜综合中文字幕| 草草在线视频免费看| 如何舔出高潮| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 国产美女午夜福利| 亚洲电影在线观看av| 一级二级三级毛片免费看| 黄色欧美视频在线观看| 日韩制服骚丝袜av| 久久精品久久久久久久性| 久久热精品热| 久久久久网色| 亚洲国产高清在线一区二区三| 观看美女的网站| 国产精品不卡视频一区二区| 噜噜噜噜噜久久久久久91| 色5月婷婷丁香| 精品久久国产蜜桃| 日本一本二区三区精品| 久久婷婷人人爽人人干人人爱| 日韩 亚洲 欧美在线| 日本黄色视频三级网站网址| 青青草视频在线视频观看| 天堂影院成人在线观看| 1000部很黄的大片| 久久久久九九精品影院| 国产伦理片在线播放av一区 | 国产成年人精品一区二区| 一级av片app| 国产精品久久久久久亚洲av鲁大| 久久午夜亚洲精品久久| 免费无遮挡裸体视频| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲人成网站高清观看| 草草在线视频免费看| 一级av片app| 91aial.com中文字幕在线观看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 插逼视频在线观看| 欧美成人一区二区免费高清观看| 联通29元200g的流量卡| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 久久欧美精品欧美久久欧美| 在现免费观看毛片| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 久久午夜福利片| 亚洲色图av天堂| 久久人人爽人人爽人人片va| 男女那种视频在线观看| 国产精品一及| 又爽又黄a免费视频| 久久99热这里只有精品18| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 久久国产乱子免费精品| 女人被狂操c到高潮| 日本黄色视频三级网站网址| 一区二区三区四区激情视频 | www.色视频.com| 午夜福利成人在线免费观看| av天堂在线播放| 女人被狂操c到高潮| 18禁黄网站禁片免费观看直播| 亚洲人与动物交配视频| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 午夜激情福利司机影院| 亚洲激情五月婷婷啪啪| 99热6这里只有精品| 波多野结衣高清无吗| 最近中文字幕高清免费大全6| 国产精品99久久久久久久久| 天美传媒精品一区二区| 少妇高潮的动态图| 国模一区二区三区四区视频| 99视频精品全部免费 在线| 欧美在线一区亚洲| 久久久久国产网址| 狠狠狠狠99中文字幕| 免费看光身美女| 欧美激情在线99| 99久久九九国产精品国产免费| 综合色丁香网| 日韩国内少妇激情av| 久久综合国产亚洲精品| 欧美+日韩+精品| 青青草视频在线视频观看| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | 国产探花在线观看一区二区| 亚洲熟妇中文字幕五十中出| 老女人水多毛片| 亚洲综合色惰| 亚洲在线自拍视频| 色吧在线观看| 国产日韩欧美在线精品| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 男女那种视频在线观看| 国产成人精品婷婷| av专区在线播放|