中、西藥物在防控豬藍(lán)耳病中的效果評(píng)估

李孝文，王清宇，馮士彬

（1．南京農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，江蘇 南京 210095；2.平度市畜牧局，山東 平度 266700；3.安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院，安徽 合肥 230061）

豬藍(lán)耳病，又稱為豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS），是一種可以造成生豬養(yǎng)殖國(guó)家重大經(jīng)濟(jì)損失的重要豬病[1]。豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）作為病原于20世紀(jì)90年代初被鑒定，這種免疫抑制性豬病與登革熱和貓傳染性腹膜炎相似[2]，且可以通過抗體依賴性增強(qiáng)作用（ADE）提高病毒的感染。此過程

在提高病毒入侵靶細(xì)胞的機(jī)會(huì)和增加豬藍(lán)耳病[3-4]、登革熱[5]和貓傳染性腹膜炎[6]感染的嚴(yán)重程度上扮演著重要的角色。作為豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）在豬呼吸道病綜合征（PRDC）和豬圓環(huán)病毒相關(guān)疾?。≒CVAD）中的共感染因子，PRRS主要以亞臨床感染狀態(tài)存在[7]。有研究表明，通過免疫豬只PCV2疫苗可以明顯增加肥育豬的日增重和減少保育豬的死亡率[8]。盡管關(guān)于PRRSV的研究已經(jīng)將近30年，當(dāng)前的管理策略主要集中在利用疫苗免疫來阻止PRRSV感染[9]。然而，當(dāng)前市場(chǎng)上的減毒活疫苗不能有效清除病毒或?qū)ωi只提供完全的免疫保護(hù)。一些研究正在努力去鑒定一些在體外和體內(nèi)對(duì)PRRSV治療有效的藥物[10]。然而，并沒有十分有效的商業(yè)化藥物可以在豬體內(nèi)阻止PRRSV的感染。

替米考星是一種來自泰樂菌素B新型半合成大環(huán)內(nèi)酯類抗生素[11]，對(duì)革蘭氏陽性菌和部分革蘭氏陰性菌有效[12]。最新研究表明，替米考星可以呈劑量依賴性抑制PRRSV在豬肺泡巨噬細(xì)胞中的復(fù)制，從而起到顯著的抗病毒效果[13]。研究表明，在飼糧中添加替米考星飼喂感染PRRSV的豬只，與未處理組相比，豬只淋巴結(jié)肥大程度、肺部病變和病毒血癥程度都明顯降低[14]。此外，替米考星模型系統(tǒng)在體內(nèi)和體外的應(yīng)用證明此種抗生素具有潛在的免疫調(diào)節(jié)和抗炎癥反應(yīng)效果[15-17]。另有研究表明，替米考星可以單獨(dú)顯著降低感染動(dòng)物的病毒血癥，最終提高感染PRRSV豬只日增重[18]。

頭孢噻呋是第1個(gè)專門用于動(dòng)物的第3代頭孢類抗生素，經(jīng)肌肉注射或皮下注射吸收迅速，對(duì)豬胸膜肺炎放線桿菌、金黃色葡萄球菌、鏈球菌、大腸桿菌、副豬嗜血桿菌、巴氏桿菌等多種細(xì)菌敏感，用于治療畜禽呼吸道、泌尿道感染等多種疾病。有研究報(bào)道，相比其他抗生素，頭孢噻呋能夠顯著降低PRRSV、鏈球菌共感染豬只的致死率[19]。Ahrens認(rèn)為這可能與其能穿過血腦屏障，降低對(duì)β-內(nèi)酰胺酶的敏感性有關(guān)，或者因?yàn)槠湎啾绕渌股鼐哂懈鼜?qiáng)的組織穿透力。

隨著集約化養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，臨床上呈現(xiàn)的病毒性疾病與細(xì)菌性疾病混合感染的現(xiàn)象日趨嚴(yán)重，主要以雙重感染、三重感染或多重感染的形式出現(xiàn)[20]。王旭榮等[21]報(bào)道PRRSV、PCV2、大腸桿菌和沙門氏菌等四重混合感染可造成豬只大量死亡。副豬嗜血桿菌作為一種機(jī)會(huì)致病菌，很容易感染免疫力低下的動(dòng)物，因此，對(duì)臨床樣本進(jìn)行檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)，感染HP-PRRSV的血清、組織中副豬嗜血桿菌量明顯增加，副豬嗜血桿菌的繼發(fā)感染導(dǎo)致豬只的致死率也明顯增加[22]。此外，另有試驗(yàn)表明，PRRSV能增強(qiáng)對(duì)豬肺炎支原體的易感性[23]及能導(dǎo)致新生仔豬對(duì)豬鏈球菌的易感性增加。

國(guó)內(nèi)外學(xué)者在研究PRRS防控方面做了大量的工作，在疫苗預(yù)防和西藥防治方面取得一定的進(jìn)展。疫苗免疫是目前防控PRRS最有效的措施。但由于PRRSV變異速度之快及極易發(fā)生重組，加之疫苗選擇不當(dāng)、免疫程序不合理等因素常常導(dǎo)致免疫失敗。由于PRRSV是嚴(yán)格的胞內(nèi)寄生，需依賴細(xì)胞的多種功能而復(fù)制，因此，西藥較難發(fā)揮其功效。中藥在防控病毒病方面具有獨(dú)特的優(yōu)越性。中藥抗病毒不僅能直接在阻止病毒的吸附、穿入、復(fù)制等方面起到抗病毒作用，還能調(diào)節(jié)機(jī)體的免疫功能，參與機(jī)體的免疫反應(yīng)，起到免疫監(jiān)視和抗病毒作用。尤其是中藥在PRRSV的治療上已取得一些研究進(jìn)展。冼瓊珍等采用對(duì)病毒的阻斷、抑制和直接殺滅3種方式觀察16種中藥體外抗PRRSV的作用，結(jié)果發(fā)現(xiàn)魚腥草、菊花、知母、桂枝、赤芍是綜合上述3種作用抗PRRSV最強(qiáng)的中藥[24]。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

試驗(yàn)于2015年10—12月在福建省某豬場(chǎng)進(jìn)行。

1.2 材料

1.2.1 主要試劑 10%頭孢噻呋晶體注射液（美國(guó)某公司生產(chǎn)）、10%頭孢噻呋混懸液（國(guó)產(chǎn)某獸藥公司生產(chǎn)），石膏、麻黃、杏仁、淡竹葉、黃芪、黃連、黃芩、茯苓、魚腥草、大青葉、知母、甘草等中藥材購(gòu)于永生公大藥房連鎖店。阿莫西林注射粉針、替米考星預(yù)混劑、阿莫西林可溶性粉等為豬場(chǎng)常規(guī)使用藥品。

1.2.2 主要儀器 粉碎機(jī)、蒸汽滅菌器、電子天平、電子秤等。

1.3 方法

1.3.1“十二味”中藥湯劑的制備

（1）中藥材的挑揀除雜與稱重：將中藥材放于挑揀臺(tái)上，挑揀出雜質(zhì)。稱重：按重量份數(shù)稱取石膏1 000 g，麻黃 1 000 g，杏仁 500 g，淡竹葉 1 000 g，黃芪 1 500 g，黃連 500 g，黃芩 1 000 g，茯苓 1 000 g，魚腥草 1 000 g，大青葉 500 g，知母 500 g，甘草 500 g。

（2）浸泡：將重量份中藥材稱重組合后，共10 kg，與純凈水比例為 1∶10，浸泡 30 min。

（3）水煎：將按照1∶10比例的組方中藥在非鐵質(zhì)容器中加熱至沸騰，文火煎45 min，然后過濾水煎液備用，重新按照1∶10比例添加純凈水，重復(fù)上述水煎操作，得到水煎濾液，棄掉藥渣。

（4）濃縮：將兩次水煎液合并，加熱至沸騰，持續(xù)沸騰濃縮還原至原中藥1∶10，即10 kg中藥濃縮至水煎液100 L。

（5）分裝與保存：將中藥水煎濃縮液分裝至玻璃瓶、扎蓋、滅菌、保存、備用。

1.3.2 藥物臨床應(yīng)用方法 選取確診正在發(fā)生藍(lán)耳病的產(chǎn)房仔豬進(jìn)行試驗(yàn)，同一棟單元產(chǎn)房仔豬，選取1胎母豬10頭，2胎以上30頭（2～6胎平均分布取樣），選取仔豬共40窩，初生日齡相近，初生重大于0.9 kg仔豬，每窩5公5母，按照性別隨機(jī)分為4組，合計(jì)仔豬400頭，為試驗(yàn)各組備用，產(chǎn)房期間按照常規(guī)的生產(chǎn)管理措施進(jìn)行操作。仔豬斷奶時(shí)，在備用的400頭仔豬中各組選擇90頭健康仔豬，根據(jù)體重和公母平均分布各處理組，打耳牌標(biāo)記，同步稱重、轉(zhuǎn)群和各試驗(yàn)組處理。各試驗(yàn)組斷奶轉(zhuǎn)保育舍后按照30頭/欄編入各單獨(dú)保育欄，進(jìn)入試驗(yàn)測(cè)試階段，保育結(jié)束對(duì)比各考察指標(biāo)。試驗(yàn)時(shí)間為斷奶轉(zhuǎn)群后保育階段6周。試驗(yàn)分組及處理情況見表1。

表1 試驗(yàn)分組及處理情況

1.3.3 藥物使用效果分析

（1）臨床癥狀觀察。

對(duì)試驗(yàn)組的豬只進(jìn)行臨床癥狀觀察，包括體溫變化、精神狀態(tài)、死亡判定等。死亡判定根據(jù)實(shí)際情況試驗(yàn)中做出了調(diào)整，當(dāng)遭遇類似烈性疾病無法恢復(fù)時(shí)，為了減少試驗(yàn)造成的損失，本組內(nèi)仔豬轉(zhuǎn)入其他單元注射抗生素治療和隔離處理，本組數(shù)據(jù)按照死亡處理，當(dāng)遇到疾病不嚴(yán)重致死的情況下不干預(yù)繼續(xù)進(jìn)行試驗(yàn)觀察和記錄。

（2）死淘率。

死淘率=死淘頭數(shù)/平均存欄數(shù)

（3）日增重。

日增重=總增重/試驗(yàn)天數(shù)

（4）藥物經(jīng)濟(jì)回報(bào)。

通過經(jīng)濟(jì)模型，對(duì)試驗(yàn)組前后豬只價(jià)值、藥費(fèi)投資和死亡損失3項(xiàng)作為主要研究對(duì)象，對(duì)每個(gè)試驗(yàn)組進(jìn)行資產(chǎn)分類和使用藥物投資對(duì)比，考察藥物投資貢獻(xiàn)比和藥費(fèi)回報(bào)值。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

所得數(shù)據(jù)采用SPSS 13.0進(jìn)行方差分析與LSD多重比較分析，數(shù)據(jù)為百分?jǐn)?shù)時(shí)先經(jīng)平方根反正弦轉(zhuǎn)換后，再加以分析和比較。

2 結(jié)果

2.1 臨床癥狀觀察

各試驗(yàn)組按照試驗(yàn)設(shè)計(jì)要求進(jìn)行分組和實(shí)施藥物干預(yù)后分欄飼養(yǎng)，保育舍同單元內(nèi)飼養(yǎng)6周，D組轉(zhuǎn)群后1周內(nèi)即出現(xiàn)了嚴(yán)重的發(fā)燒和呼吸道癥狀，發(fā)燒比例40%以上，咳喘50%以上，并且轉(zhuǎn)群后3 d內(nèi)出現(xiàn)倒地神經(jīng)癥狀4頭，死亡1頭，另外3頭倒地?zé)o法站立。

3個(gè)藥物組均經(jīng)過兩次抗生素注射，A組配合中藥湯劑飲水中使用。觀察中注射兩種頭孢噻呋注射液豬只均無應(yīng)激反應(yīng)，轉(zhuǎn)群后1周內(nèi)無特別不良變化，A組中藥湯劑飲水中使用，采用每天上午集中飲水全天量，即 100 mL（10 g生藥）/頭，采用飲水桶稀釋后飲水給藥，試驗(yàn)組設(shè)置臨時(shí)獨(dú)立水線，仔豬飲水正常，無特別外觀的不適感，連續(xù)使用2周。

2.2 死亡情況

轉(zhuǎn)群后第1周和第4周D組出現(xiàn)了兩次明顯的呼吸道疾病和高死亡率，并且仔豬外觀皮毛雜亂、扎堆、眼屎多、腿部腫脹比例最大至20%，發(fā)燒與氣喘伴隨。3個(gè)藥物組試驗(yàn)至第4周時(shí)同樣出現(xiàn)了呼吸道疾病問題，B、C兩組較為突出，發(fā)燒中出現(xiàn)了死亡，B組死亡更加明顯，整體狀況相對(duì)最差。

2.3 日增重

4個(gè)試驗(yàn)組豬只轉(zhuǎn)群3周后日增重出現(xiàn)了差異，D組最小，A組最大，B、C組差異不顯著。圖1顯示各試驗(yàn)組的增重速度和死淘率的對(duì)比結(jié)果，發(fā)現(xiàn)其增重速度與死淘率成反比，也表明保育豬由豬藍(lán)耳病（PRRS）導(dǎo)致的疾病威脅中各種處理干預(yù)方案對(duì)豬只生產(chǎn)和成活率的影響。其中A組死淘率最低（3.39%），增重速度最快，B、C兩組增重差異不顯著，B組死淘率比C組高2.38個(gè)百分點(diǎn)，D組死淘率高達(dá)22.27%，增重明顯受阻。表2給出各試驗(yàn)組的生產(chǎn)成績(jī)。

圖1 各試驗(yàn)組日增重與死淘率

表2 各試驗(yàn)組生產(chǎn)成績(jī)

2.4 藥物經(jīng)濟(jì)回報(bào)

2.4.1 基礎(chǔ)數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì) 本次核算中藥的成本組成和各試驗(yàn)組的藥物組合成本，詳見表3和表4。

表4 各試驗(yàn)組藥費(fèi)組成

2.4.2 藥物經(jīng)濟(jì)回報(bào)結(jié)果 按照模型生產(chǎn)數(shù)據(jù)，D組因死淘率過高在生產(chǎn)試驗(yàn)后資產(chǎn)差為虧損1 720元，各組與之對(duì)比差額，藥費(fèi)貢獻(xiàn)比最高為B組，為150.55，C組為9.08最低，A組為48.50，但是藥費(fèi)回報(bào)由高到低的順序?yàn)椋篈組、B組和C組，B組與C組差異為402.41元（表5）。

表5 各試驗(yàn)組經(jīng)濟(jì)回報(bào)

如圖2和圖3所示，3個(gè)藥物組相對(duì)于D組均起到了藥物的效果，未出現(xiàn)虧損的負(fù)資產(chǎn)，且3個(gè)藥物組在生產(chǎn)后剩余資產(chǎn)方面趨勢(shì)明顯，A組高于B和C兩組；藥費(fèi)貢獻(xiàn)比方面B組最高，與之投資低成本的藥費(fèi)有關(guān)，但是低成本的藥費(fèi)投資雖然提高了藥費(fèi)貢獻(xiàn)比，但是其生產(chǎn)后剩余資產(chǎn)低于A組8 415.62元，平均每頭仔豬減少資產(chǎn)93.5元。通過對(duì)比各項(xiàng)指標(biāo)分析藥費(fèi)回報(bào)是更科學(xué)和有價(jià)值的指標(biāo)。

圖2 各試驗(yàn)組藥費(fèi)經(jīng)濟(jì)回報(bào)對(duì)比

圖3 各試驗(yàn)組資產(chǎn)額與經(jīng)濟(jì)回報(bào)對(duì)比

2.5 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)

2.5.1 死淘率統(tǒng)計(jì)結(jié)果 死淘率各組進(jìn)行多重比較，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，A組死淘率顯著低于B組（P＜0.05），同時(shí)與C組死淘率差異不顯著（P＞0.05），B組與C組差異不顯著，D組豬只死淘率極顯著高于其他 3個(gè)藥物處理組（P＜0.01），見圖 4。

圖4 平均死淘率在不同試驗(yàn)組中的多重比較分析

2.5.2 平均日增重統(tǒng)計(jì)結(jié)果 平均日增重各組進(jìn)行多重比較，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，A組的平均日增重均顯著高于B、C、D組（P＜0.05），B組與 C 組平均增重差異不顯著，D組豬只的平均日增重均極顯著低于3個(gè)藥物處理組（P＜0.01，圖5）。

圖5 平均日增重在不同試驗(yàn)組中的多重比較分析

3 討論

本試驗(yàn)研究遭受藍(lán)耳病威脅的仔豬群藥物防治細(xì)菌性疾病繼發(fā)感染的效果和使用價(jià)值，通過頭孢噻呋注射液的兩針保健，避免了仔豬轉(zhuǎn)群應(yīng)激導(dǎo)致細(xì)菌性疾病的加重，可以降低發(fā)病率，平穩(wěn)度過轉(zhuǎn)群第1周和保育中后期的細(xì)菌感染。中藥湯劑中采用了退燒、平喘、抗病毒、提高免疫力的藥物組合，滿足標(biāo)和本兼有的保健藥物的需要。因此，在PRRS防控體系中除了采用閉群管理等策略，在活躍期的非常時(shí)期使用抗生素針對(duì)細(xì)菌性感染保健，實(shí)施藥物干預(yù)使易感豬群度過該階段的高峰期在生產(chǎn)實(shí)踐中很有現(xiàn)實(shí)意義。

通過試驗(yàn)分組確保各組仔豬的一致性和合理性，使得各組仔豬處于同一狀態(tài)下的使用效果。通過死淘率和增重速度的考察，國(guó)產(chǎn)頭孢噻呋注射液+“十二味”中藥湯劑組死淘率顯著低于單獨(dú)使用國(guó)產(chǎn)頭孢噻呋注射液組（P＜0.05），同時(shí)與頭孢噻呋晶體注射液組死淘率差異不顯著，說明中藥在仔豬保健的過程中起到了一定輔助效果。同樣，兩個(gè)單獨(dú)使用頭孢噻呋注射液的B組與C組差異不顯著，再次說明中藥湯劑在提高成活率方面輔助效果的有效性。

平均日增重統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示，中藥湯劑組（A組）在平均日增重均極顯著高于其他兩個(gè)藥物組和空白對(duì)照組（P＜0.01），同時(shí)，國(guó)產(chǎn)頭孢噻呋注射液組與頭孢噻呋晶體注射液組平均增重差異不顯著，說明中藥湯劑更多地表現(xiàn)在提高仔豬的增重方面，其價(jià)值更多在控制呼吸道病提高飼料轉(zhuǎn)化率以及提高豬只的健康方面的作用。同時(shí)，兩個(gè)頭孢噻呋注射針劑在豬只增重速度方面差異不明顯。

通過運(yùn)用經(jīng)濟(jì)模型，剖析藥物的使用效果和使用價(jià)值，單一地分析藥物貢獻(xiàn)比方面，單獨(dú)使用國(guó)產(chǎn)頭孢噻呋注射液，其價(jià)格低，控制死淘率方面效果也有效，相比中西藥組合和國(guó)外高價(jià)格的同類產(chǎn)品，其貢獻(xiàn)比遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他試驗(yàn)組。但是，單一地考察一個(gè)指標(biāo)可能將失去更客觀的指標(biāo)，選擇“性價(jià)比”高的產(chǎn)品更是獸醫(yī)工作的價(jià)值，通過對(duì)藥物經(jīng)濟(jì)回報(bào)的分析中發(fā)現(xiàn)，A組的中西藥組合產(chǎn)生的經(jīng)濟(jì)回報(bào)遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他組，并且相對(duì)于國(guó)外同類單一產(chǎn)品其價(jià)值更高，更能夠在生產(chǎn)實(shí)踐中推廣使用。

4 小結(jié)

4.1中西組合保健組提高成活率方面與國(guó)外產(chǎn)品相當(dāng)，強(qiáng)于單獨(dú)使用西藥組，平均日增重方面高于其他各試驗(yàn)組。

4.2中西組合保健組藥費(fèi)經(jīng)濟(jì)回報(bào)最高，在生產(chǎn)和臨床上藥費(fèi)經(jīng)濟(jì)回報(bào)評(píng)估更加客觀。