懷化市屠宰場(chǎng)常見(jiàn)病毒隱性感染情況的監(jiān)測(cè)與分析

丁美月，舒思傳，楊愛(ài)梅，楊謹(jǐn)慈，舒曉亮

（懷化市動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，湖南 懷化 418000）

1 試驗(yàn)方法

1.1 扁桃體樣本采集

1.1.1 采集地點(diǎn)和時(shí)間 樣品來(lái)自懷化市內(nèi)2個(gè)生豬定點(diǎn)屠宰場(chǎng)，2017年3月至2018年2月，每月在其中一個(gè)屠宰場(chǎng)采集不同來(lái)源豬群30份扁桃體。

1.1.2采樣方法 利用扁桃體采樣器采樣。采樣器使用前均須用3%氫氧化鈉水溶液消毒后經(jīng)清水沖洗。采取扁桃體樣品后，用滅菌牙簽挑至滅菌離心管并做標(biāo)記。

1.2 檢測(cè)試劑

核酸提取試劑盒（磁珠法）購(gòu)自杭州愛(ài)康生物技術(shù)有限公司；口蹄疫病毒通用型實(shí)時(shí)熒光RTPCR檢測(cè)試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（NSP2 1 594～1 680變異株）實(shí)時(shí)熒光RT-PCR檢測(cè)試劑盒購(gòu)自北京世紀(jì)元亨；口蹄疫病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?、豬瘟病毒/豬藍(lán)耳病病毒/偽狂犬病病毒/豬圓環(huán)病毒2型四通道核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?、豬瘟/高致病性藍(lán)耳病/口蹄疫核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ┵?gòu)自中山大學(xué)達(dá)安基因股份有限公司。

1.3 檢測(cè)方法

核酸提取和熒光RT-PCR，嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。

2 監(jiān)測(cè)結(jié)果

2.1 時(shí)間分布

對(duì)這360份豬扁桃體進(jìn)行了常見(jiàn)病原學(xué)監(jiān)測(cè)，結(jié)果顯示在外觀健康豬群中豬圓環(huán)病毒2型（PCV2）一年四季均有較高的帶毒率，共298份樣品呈PCV2陽(yáng)性，陽(yáng)性率達(dá)到了82.78%，除9月和2月平均帶毒率在26%左右外，其他時(shí)間段的帶毒率都達(dá)到了90%以上；其次分別是豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒（HP-PRRSV）、豬偽狂犬病病毒（PRV）、口蹄疫病毒（FMDV）；豬瘟病毒（CSFV）全部為陰性。PRV 在1、4、5、7、8 和 9 月未檢出；PRRSV 和 HP-PRRSV 僅在 11 月未同時(shí)檢出陽(yáng)性，F(xiàn)MDV 在 5、8、9、10 月有檢出。具體監(jiān)測(cè)結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同月份外觀健康豬群監(jiān)測(cè)結(jié)果

2.2 地域分布

360份豬扁桃體樣品中215份來(lái)自懷化本地，其余來(lái)自湖南省內(nèi)湘潭、婁底等地區(qū)和重慶、貴州等地。經(jīng)過(guò)分析發(fā)現(xiàn)，不同地區(qū)的病原分布差異不明顯，PCV2的帶毒率都較高，其中懷化地區(qū)的最高為87.14%，除來(lái)自湘潭的樣品未監(jiān)測(cè)到FMDV，來(lái)自重慶的樣品未監(jiān)測(cè)到FMDV、PRV外，其他地區(qū)都有一定的病原感染率。不同地域樣品的檢測(cè)陽(yáng)性率見(jiàn)表2。

表2 不同地域樣品的檢測(cè)陽(yáng)性率

2.3 混合感染情況

監(jiān)測(cè)結(jié)果顯示，外觀健康豬群的混合感染情況主要是PRRSV和PCV2，其次是HP-PRRSV和PCV2、PRV和PCV2。PCV2與PRRSV、HP-PRRSV、FMDV、PRV等2～3種病原混合感染率達(dá)到16.39%。混合感染情況統(tǒng)計(jì)結(jié)果見(jiàn)表3。

2.4 總體情況

2017年3月至2018年2月，混合感染樣品占陽(yáng)性樣品的18.83%，除混合帶毒的樣品外，PCV2、PRRSV、HP-PRRSV、PRV、FMDV 的單一病種帶毒率分別為66.39%、5%、0.56%、0.56%、0.56%；檢測(cè)全部為陰性的樣品為10%。

表3 不同月份外觀健康豬群扁桃體樣品混合感染檢出情況

3 分析與討論

近年來(lái)，隨著我國(guó)養(yǎng)豬業(yè)的發(fā)展，豬病也日趨復(fù)雜，免疫失敗、新老疫病的混合感染時(shí)有發(fā)生，在流行特點(diǎn)上以多重感染、繼發(fā)感染、免疫抑制、繁殖障礙癥候、呼吸道病癥候等為主要表征[1-4]。PCV2是一個(gè)基因保守的豬病原體[5]，作為單一病原致病性不高，常作為免疫抑制性條件病原與其他病原混合感染。據(jù)報(bào)道[4]，豬圓環(huán)病毒2型持續(xù)存在，一是污染面大，二是個(gè)體陽(yáng)性率呈上升趨勢(shì)，三是流行毒株類型多。豬藍(lán)耳病近年出現(xiàn)感染反彈，感染毒株類型復(fù)雜，混合感染情況嚴(yán)重。從每個(gè)月的病原陽(yáng)性檢出率來(lái)看，PCV2、PRRSV和HP-PRRSV在外觀健康豬群中一年四季均有一定的帶毒率，表明外觀健康豬群中存在主要疫病病原的帶毒感染，與目前國(guó)內(nèi)疫病的流行形勢(shì)一致[6-8]。豬偽狂犬病疫情呈上升趨勢(shì)，凈化存在一定難度[4，8]。FMDV在外觀健康豬群中仍有檢出，其中10月份有7份陽(yáng)性，經(jīng)調(diào)查有可能與當(dāng)月屠宰場(chǎng)將不同豬群過(guò)夜混養(yǎng)造成相互感染有關(guān)。CSFV的陽(yáng)性率為0，主要可能是多年來(lái)對(duì)豬瘟的強(qiáng)制免疫有效地控制了豬瘟疫情乃至可能一些場(chǎng)達(dá)到了免疫凈化[4]，但由于CSF已于2017年退出強(qiáng)制免疫，CSFV是否會(huì)再次在豬群中流行有待于長(zhǎng)期監(jiān)測(cè)。從此次扁桃體檢出病原的季節(jié)分布來(lái)看，冬春季節(jié)健康豬群的病原帶毒率較高，具有一定的示病意義。