• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    膽汁在法醫(yī)毒物學中的應(yīng)用研究進展

    2018-10-09 08:19:58紀佼佼
    中國司法鑒定 2018年5期
    關(guān)鍵詞:可卡因檢材毒物

    紀佼佼,嚴 慧,沈 敏

    (1.華東政法大學,上海200042;2.司法鑒定科學研究院 上海市法醫(yī)學重點實驗室上海市司法鑒定專業(yè)技術(shù)服務(wù)平臺,上海200063)

    鑒定結(jié)果的可靠性、科學性是法醫(yī)毒物鑒定中最為重要的要求,而生物檢材的選擇對于鑒定結(jié)果有著重要的影響。目前法醫(yī)毒物鑒定實踐中,通常采用血液和尿液檢材來證明近期毒物的攝入情況,判斷是否攝毒、中毒以及確定死因。在死后毒物學領(lǐng)域,當毒物半衰期短,以及血液檢材不可獲得或可靠性存疑時,探尋毒物和代謝物濃度高、定性認定能力強的生物檢材或血液的替代檢材顯得尤為重要。

    膽汁排泄是毒物及其代謝物的重要消除途徑之一,較傳統(tǒng)生物檢材膽汁,具有毒物和代謝物濃度高、檢測時限長等特性,這在死后毒物學領(lǐng)域具有優(yōu)勢和潛力。目前國外仍將膽汁作為常規(guī)生物檢材采集并檢測[1],并有大量的應(yīng)用研究報道,而在國內(nèi)的鑒定實踐中膽汁并未受到應(yīng)有的關(guān)注和重視。本文回顧了近20余年的文獻報道,綜述了膽汁構(gòu)成和毒物的轉(zhuǎn)運消除,膽汁中毒物分析的研究成果,提供了300余例案件中100多個毒藥物的膽汁和血液定量結(jié)果數(shù)據(jù),探討了膽汁毒物定性、定量分析的特點、價值及其問題,并對其應(yīng)用前景進行了展望。

    1 膽汁概述

    1.1 膽汁的構(gòu)成

    膽汁是人體中一種不含有消化酶的消化液,儲存于膽囊之中。人體中75%的膽汁由肝細胞分泌產(chǎn)生,25%由膽管細胞產(chǎn)生,成人每日的分泌量大約在600~1 000 mL,膽汁中約95%的成分為水,同時還含有膽汁酸和膽紅素,膽汁的顏色由膽紅素的含量所決定。此外,膽汁中含有卵磷脂、膽固醇、鈉、鉀、鈣、磷酸鹽和碳酸鹽等,以及少量蛋白質(zhì)等成分,其pH約為7.4。膽汁的分泌是一個連續(xù)的不間斷的過程,其分泌量會隨著人體的運動、飲食情況而發(fā)生變化,在不進行消化時,人體所分泌的膽汁儲存在膽囊之中并進行濃縮,而當人體需要進行消化時,在受到刺激的情況下儲存在膽囊中的膽汁進入十二指腸幫助消化作用。

    1.2 肝腸循環(huán)

    毒藥物在體內(nèi)的排泄主要是通過腎臟、膽汁、乳腺等渠道進行。毒藥物經(jīng)肝臟轉(zhuǎn)化,以代謝物或原藥的形式進入膽汁,后經(jīng)過膽汁總管進入十二指腸,其中一部分被小腸吸收,由門靜脈流回肝臟,然后再經(jīng)膽汁進入腸道,如此往復(fù),形成肝腸循環(huán)。肝腸循環(huán)存在兩種方式:一種是通過胃腸道的重吸收,另一種是結(jié)合型代謝物經(jīng)腸道中細菌和酶(如β-葡萄糖醛酸酶)水解釋放出毒藥物原體進而在小腸內(nèi)重新吸收。肝腸循環(huán)可使毒藥物反復(fù)循環(huán)于肝臟、膽汁、腸道之間,延長毒藥物的半衰期,從而延緩排泄而使血藥濃度維持時間延長。肝腸循環(huán)提高了藥物的利用效率,但對于毒性物質(zhì)而言則增強了對人體的損害,如嗎啡、秋水仙堿、勞拉西泮或地高辛等物質(zhì)都受肝腸循環(huán)作用的影響,在藥動學上表現(xiàn)為藥時曲線出現(xiàn)多峰現(xiàn)象,半衰期延長,從而延長毒藥物對機體的作用時間[2]。

    1.3 膽汁排泄及其影響因素

    膽汁排泄是外源性毒藥物的重要消除途徑之一。雖然膽汁排泄是毒藥物原體的次要排泄途徑,但卻是多數(shù)代謝物尤其是水溶性代謝物的主要排泄途徑。在肝細胞內(nèi)的毒藥物滲透可以通過被動擴散或通過轉(zhuǎn)運體的主動轉(zhuǎn)運,一般而言,化合物的分子量或親水性越高,其擴散就越依賴于主動轉(zhuǎn)運。外源性物質(zhì)的膽汁排泄需要穿過兩個細胞膜:在血竇側(cè)的肝細胞的基底外側(cè)膜,以及形成膽汁管的頂膜。

    毒藥物及其代謝物經(jīng)膽汁排泄往往是主動過程,膽汁排泄的影響因素一直是多年來研究的熱點。早在20世紀70年代就有研究報道膽汁排泄分子量的閾值:大鼠約為 325 g/mol,人類約為500~600 g/mol[3-4]。該研究認為分子量低于上述數(shù)值的化合物不太可能在膽汁中被排出,但筆者認為隨著分析方法及分析水平的不斷進步該閾值會有所降低。最近的研究表明,分子量不足以預(yù)測膽汁中藥物的濃度,因此以位阻效應(yīng)、滲透性、溶解度、極化性等理化性質(zhì)為基礎(chǔ)的更為復(fù)雜的定量結(jié)構(gòu)-藥代動力學參數(shù)關(guān)系或基于生理的藥代動力學模型得以建立[1]。還有報道提出膽汁排泄的另一個決定性因素是位于肝細胞竇和小管膜上的轉(zhuǎn)運體的親和力[5-6],而這些研究主要聚焦于內(nèi)源性的物質(zhì),涉及藥物間的相互作用或某些治療類的抑制劑,如抗癌、抗生素和抗病毒藥物,而在法醫(yī)毒理方面關(guān)注較少。

    腎和肝膽是人體重要的排泄器官,兩者的排泄能力存在相互代償現(xiàn)象,這對于腎功能或肝功能不全者的毒物分析結(jié)果解釋具有一定的指導意義。

    2 膽汁毒物分析研究現(xiàn)狀及進展

    定性篩選分析是法醫(yī)毒物分析中最重要、最基本的環(huán)節(jié),1972年Hoffman等[7]首次報道了利用凍干法關(guān)聯(lián)薄層色譜對膽汁中常見未知毒藥物進行篩選。之后高效液相色譜/二極管陣列檢測器(HPLC-DAD)、氣相色譜/質(zhì)譜(GC-MS)、液相色譜/質(zhì)譜(LC-MS)等篩選分析方法不斷應(yīng)用,對膽汁中毒藥物的研究和應(yīng)用逐漸增多。

    表1總結(jié)了300多個案例中血液和膽汁中毒物濃度,以供比較分析和結(jié)果解釋。值得關(guān)注的是,約80%的毒藥物膽汁/血液濃度比大于1。Vanbinst等[121]報道了膽汁及血液中36種濫用藥物的篩查情況,結(jié)果顯示膽汁中檢出可卡因、2-乙基-1,5-二甲基-3,3-苯基吡咯烷(EDDP)、 MDMA、美沙酮、嗎啡和可待因等物質(zhì)而血液中上述物質(zhì)的檢出率僅為63.7%(n=44),提示了膽汁可以應(yīng)用于毒藥物的大規(guī)模篩查。

    然而,有部分研究中也出現(xiàn)血液檢出毒藥物而膽汁未檢出的情形。如Vanbinst等[121]對44個案例進行血液和膽汁的比較研究,結(jié)果有6例(13.6%)膽汁中未檢出氯巴占、可卡因、可待因、3,4-甲氧基苯丙胺(MDA)等成分,而血液中檢出。作者認為可能是死者攝毒后快速死亡,或血液檢材分析方法靈敏度優(yōu)于膽汁。

    同時,研究表明不同的毒物在膽汁中的存在情況及其與血液濃度之間的關(guān)系上有所不同。

    表1 涉毒死者血液和膽汁中毒藥物濃度

    續(xù)表1

    續(xù)表1

    續(xù)表1

    2.1 乙醇

    血液中乙醇含量鑒定是最為常見的法醫(yī)毒物鑒定項目。由于尸體腐敗、死后再分布、死后生成、血液缺失等因素可致無法準確獲得血液乙醇濃度,故在20世紀末膽汁作為可替代檢材成為人們研究的熱點。Winek、Budd等人研究結(jié)果顯示膽汁乙醇濃度與血液乙醇濃度存在良好的相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)分別為 r=0.927,n=37[122];r=0.9107,n=189[24];r=0.94,n=100[123]。盡管如此因受攝入到死亡時間間隔、乙醇濃度等因素的影響,不能簡單使用膽汁乙醇濃度來推算血液乙醇濃度。Gilliland等[124]對55例腐敗尸體研究結(jié)果顯示:在膽汁和血液中檢出乙醇,而在尿液及玻璃體液中僅檢出低濃度乙醇或未檢出。對此作者認為膽汁類似其他生物基質(zhì),細菌污染可能導致死后生成乙醇,篩查乙醇代謝物乙醛葡萄糖醛酸苷有助于鑒別乙醇來源。乙基葡萄糖醛酸苷主要通過膽汁排泄,膽汁濃度遠高于血液是其優(yōu)勢。另外,也有報道將膽汁中乙醇濃度與其他基質(zhì)的分析結(jié)果進行關(guān)聯(lián)性分析用于研究死亡環(huán)境以及評估乙醇是否系死后生成。

    2.2 阿片類

    嗎啡在體內(nèi)與葡萄糖醛酸結(jié)合形成代謝物嗎啡-3-葡糖苷酸(M3G)和嗎啡-6-葡糖苷酸(M6G),嗎啡及其結(jié)合型代謝物主要通過膽汁排泄并存在肝腸循環(huán),故以較高濃度分布于膽汁并有較長的檢出時限。Crump等[125]對膽汁及血液中嗎啡及可待因的濃度進行對比分析,結(jié)果顯示兩種物質(zhì)在血液及膽汁中存在良好的相關(guān)性(r≥0.99)。 Tassoni等[126]報道了一起海洛因中毒案例,在末次注射海洛因后144h,膽汁中仍可檢出(21.3μg/mL嗎啡)而血液中呈陰性,為攝入海洛因后較長時間內(nèi)的鑒定提供了方法及依據(jù)。丁丙諾啡及其代謝物去甲丁丙諾啡表現(xiàn)為大量通過膽汁排泄,平均膽汁/血液濃度比達9638(n=12)。

    2.3 大麻類

    Fabritius等[25]報道四氫大麻酚(THC)的膽汁/血液濃度比較低,但其代謝物11-羥基-四氫大麻酚(11-OH-THC)、11-去甲-9-羧基-四氫大麻酚(THCCOOH)、THC和 THCCOOH葡萄糖醛酸苷等則有較高的膽汁/血液濃度比。Lin等[127]報道了在50例涉大麻死亡的交通事故案例中,總THCCOOH(包括游離THCCOOH及THCCOOH葡萄糖醛酸苷)膽汁/血液濃度比范圍為17.2~888,同時作者提出膽囊中存在的THCCOOH葡萄糖醛酸苷易被腸道菌群水解并且被重吸收,這也提示肝腸循環(huán)對于延長大麻類物質(zhì)的檢測時限具有一定的效能。Gronewold等[128]對大麻類物質(zhì)在人體的分布情況進行了研究,結(jié)果顯示THCCOOH葡萄糖醛酸苷和THCCOOH在膽汁中存在較高的濃度,峰值濃度分別為11 160和990 ng/mL,且膽汁與血液中THCCOOH葡萄糖醛酸苷呈現(xiàn)出良好的相關(guān)性(r>0.99)。 在膽汁中同時檢出了四氫大麻酚(THC)、大麻酚(CBN)、大麻二酚(CBD)和 11-羥基-四氫大麻酚(11-OH-THC)等物質(zhì),而在心血、股靜脈血及尿液中則無法檢出較低濃度的大麻類物質(zhì)。Fabritius等[25]證實了上述結(jié)果,并且提出CBD/THC比值較高可以作為藥用大麻攝入的反映,同時得出膽汁與血液中上述物質(zhì)存在良好的相關(guān)性且相關(guān)系數(shù)均大于0.997,由此作者認為膽汁可以作為一種良好的生物檢材用于較低濃度的大麻類代謝物的分析及其在人體分布情況的考察。

    2.4 可卡因

    Fernández等[129]應(yīng)用放射免疫法測定了 20例可卡因中毒案件,其中膽汁/血液濃度比為 2.15~107.53(=30.79)。 Agarwal等[130]報道了 50 例案件中可卡因及其代謝物膽汁/血液濃度比值為5~7。兩項研究在數(shù)值上存在的差異可能與放射免疫法不能有效區(qū)分可卡因及其代謝物有關(guān)。Fernández等[131]還通過了對30例案件中膽汁可卡因及其代謝物苯甲酰愛康寧進行分析,結(jié)果顯示可卡因陽性90%、苯甲酰愛康寧陽性100%,膽汁中苯甲酰愛康寧濃度高于可卡因的占83%。同時膽汁中可卡因濃度顯著高于血液,濃度比為 2.2~470.6(=64.8)。 作者還報道了20例可卡因中毒死者的血液及膽汁結(jié)果,膽汁中可卡因濃度高于血液,濃度比范圍為2.15~107.53(=30.76),但呈弱相關(guān)性(r=0.48)。 對此,作者認為膽汁僅可作為血液的替代檢材,證明是否攝入過可卡因,而不能準確地用于推算血藥濃度。

    2.5 苯二氮卓類

    Hasegawa等[132]報道了一例服用過量氟硝西泮而致死的案例,對其13種體液和組織中氟硝西泮及其代謝物7-氨基氟硝西泮的濃度進行分析。結(jié)果顯示除脂肪組織外,其余人體體液和組織中7-氨基氟硝西泮的濃度均高于原體氟硝西泮且在膽汁中尤為顯著,同時膽汁與血液氟硝西泮、7-氨基氟硝西泮呈現(xiàn)良好的相關(guān)性,相關(guān)系數(shù)分別為0.9996和0.9995。其他研究也給出了膽汁與血液良好相關(guān)性的發(fā)現(xiàn),如地西泮(r=0.9983)、去甲地西泮(r=1)、溴西泮(r=0.9896)。 由此可見,膽汁可以作為有價值的檢材應(yīng)用于涉苯二氮卓類及其代謝物中毒等案件。Robertson等[133]比較了19例涉苯二氮卓類藥物(硝基苯二氮平、氟硝西泮、氯硝西泮)死者血液和膽汁中母體藥物及其7-氨基代謝物的濃度,結(jié)果顯示母體藥物的相關(guān)系數(shù)為0.695,代謝物相關(guān)系數(shù)為0.829。作者還對其他可供選擇的檢材(玻璃體液、肝臟、尿液)進行了比較分析并認為:通過不同種類的生物檢材分析,可相互補充,客觀地評價苯二氮卓類藥物的中毒案件。

    2.6 其他物質(zhì)

    Fanton[134]報道了128例甲丙氨酯使用過量死亡的案例,分析結(jié)果表明膽汁中甲丙氨酯的濃度較血液低,但兩者間具有顯著的相關(guān)性(r=0.994),據(jù)此作者認為膽汁可以作為檢測甲丙氨酯的替代檢材。同時研究也表明,當血液濃度較高時(≥100 mg/L),膽汁濃度結(jié)果較為分散,但兩種檢材之間仍存在一定的相關(guān)性(r=0.66),故作者認為膽汁和血液中甲丙氨酯濃度的相關(guān)性與個體的藥代動力學的消除模式有關(guān),同時也受毒物的相互作用、甲丙氨酯攝取到死亡的時間間隔等因素的影響,故血液甲丙氨酯濃度不能從膽汁推算。Bevalot等[135]也提出了同樣的觀點,其研究認為對于甲丙氨酯膽汁/血液濃度比較低(接近于1),雖然兩種檢材之間存在著顯著的相關(guān)性,但也存在著不可忽略的分散度,因此作者建議使用統(tǒng)計學的方法由膽汁推算血液中的濃度,從而估計不確定性。

    Tennakoon[136]報道了8例卡巴呋喃中毒案件,膽汁中檢出率為20%。Hopenwasser等[58]報道的喹硫平中毒案件,膽汁中檢出率為62.5%(n=8)。Tominaga等[137]考察了2009—2014年中毒死亡案件,對尸體膽汁及血液中毒物濃度的相關(guān)性進行分析,結(jié)果顯示,撲爾敏、雙氫可待因、苯海拉明、氯丙嗪等存在相關(guān)性,而唑吡坦、帕羅西汀、咖啡因等則顯示出弱相關(guān)性及分散性結(jié)果。但上述具有相關(guān)性的物質(zhì)能否從膽汁濃度推算血液濃度還需進行大量的研究來證明。

    Bevalot等[135]將動物實驗與系列案例結(jié)合起來,以6種目標物(甲丙氨酯,嗎啡,氰美馬嗪,咖啡因,地西泮和西酞普蘭)評估膽汁作為血液的替代檢材定性和定量分析的可行性。膽汁定性分析可檢出血液中檢出的所有目標物,動物實驗顯示膽汁較血液有更寬的時間檢測窗口。定量結(jié)果解釋較為有限,具有高膽汁/血液濃度比值的嗎啡、西酞普蘭、氰美馬嗪的兩者相關(guān)性較差。地西泮動物實驗血液與膽汁濃度的相關(guān)性良好(r=0.961,n=20),但案例數(shù)據(jù)相關(guān)性較差 (r=0.447, n=23)。

    3 膽汁毒物分析結(jié)果評價

    3.1 膽汁與血液毒物分析的相關(guān)性

    法醫(yī)毒物鑒定的主要目的在于評估毒物的攝入量及其與死亡之間的關(guān)系,根據(jù)生物檢材中毒物的定性及定量結(jié)果可以對此提供信息并做出解釋,而這通常是基于血液濃度來進行的。然而當毒物暴露水平較低或中毒延緩死亡、毒物半衰期較短時,以及血液檢材不可獲得或可靠性存疑時,膽汁可以作為一種較為理想的替代檢材。有學者認為膽汁由于其自身的成分(膽汁鹽等)及堿性,不易滋生細菌,不易造成檢材的污染[2]。大量案例報告及研究表明,膽汁中毒物濃度通常高于血液且濃度比可能達到較高數(shù)值。膽汁較血液的優(yōu)勢尤其表現(xiàn)在檢測時限方面,采用同樣的分析方法膽汁較血液通常具有更寬的檢測窗口,對于定性篩查具有明顯優(yōu)勢。雖然關(guān)于膽汁中毒藥物濃度的定量解釋的研究較少,但部分研究顯示膽汁和血液濃度之間存在著顯著的相關(guān)性,因此,膽汁可以為血液中毒物濃度分析提供補充與驗證。

    毒藥物在血液和膽汁中的不同存在情況及濃度差異表明膽汁具有較長的檢測窗口,對于毒物暴露水平較低、攝毒延緩死亡和毒物半衰期較短的情形尤其具有優(yōu)勢,如海洛因(6-單乙酰嗎啡)(半衰期 6~25 min)、嗎啡(半衰期 2~3 h)、秋水仙堿(半衰期20 min)等。此外,膽汁中毒藥物代謝物的存在可為陽性結(jié)果確認提供可靠證據(jù)。因此,有學者認為僅依據(jù)血液篩查陰性結(jié)果而無膽汁篩查進一步補充確認時,其毒藥物陰性結(jié)論的可靠性存疑。

    3.2 死后再分布

    對于死后再分布現(xiàn)象,通常認為通過尸體心血與外周血之間的毒藥物濃度比可以評估是否有死后再分布發(fā)生[138]。目前文獻報道的死后再分布研究主要集中在二個層面:一是膽囊膽汁作為死后再分布的可能來源。MDMA的家兔實驗研究結(jié)果顯示[139],死亡時膽汁濃度高于肝臟濃度,死亡后膽汁濃度隨時間延長下降,而肝臟濃度則呈升高的趨勢,表明膽囊膽汁中的毒藥物可向低濃度的鄰近組織擴散。另有海洛因靜脈注射后根據(jù)胃嗎啡濃度的檢出結(jié)果提出膽汁釋放、腸胃反流的假設(shè)。二是認為胃可能是膽汁死后再分布的主要來源[2]。De Letter等[139]通過將MDMA注入胃或氣管(模擬胃食管反流)的方法模擬了這一過程。還有研究對死后的家兔用氯胺酮進行灌胃,取灌胃后96 h內(nèi)的膽汁進行分析[140]。上述研究結(jié)果顯示當胃內(nèi)存在高濃度的外源性毒藥物時,膽囊會受到輕微的污染,胃內(nèi)的毒藥物會向左側(cè)肝臟和膽囊擴散,但對膽囊的擴散程度要小于肝臟,同時研究顯示隨著時間的推移胃內(nèi)毒藥物向較低濃度的鄰近組織中擴散呈現(xiàn)降低的趨勢。研究結(jié)果表明,如死亡時胃內(nèi)毒藥物處于吸收相或吸收不完全,則可能構(gòu)成毒藥物的儲備源。

    3.3 局限性

    相較于血液及尿液,膽汁的局限性首先體現(xiàn)在采樣較為復(fù)雜。膽汁的可獲得性取決于膽囊的完整性,取樣時不僅要考慮進餐時間與死亡時間的關(guān)系,還需考慮膽汁可能會受到肝膽疾病或死亡過程的影響,例如因肝病變、膽囊炎、膽結(jié)石等疾病而造成膽汁分泌物的改變或因膽囊損傷后血管周圍擴散或脫水情況而造成膽汁成分的改變[2]。其次膽汁排泄途徑與毒藥物分子量、親脂性和對肝細胞膜轉(zhuǎn)運體的親和力有關(guān),適用范圍仍需進一步考察。再者部分目標物膽汁與血液中的濃度顯示出弱相關(guān)性及分散性結(jié)果,故無法僅依據(jù)膽汁濃度外推血液濃度?,F(xiàn)有研究表明膽汁與血液濃度的相關(guān)性會受到死亡時間、藥物間的相互作用等因素的影響,因此,在依據(jù)膽汁濃度進行解釋時,必須謹慎或使用統(tǒng)計學的方法來由膽汁外推血液中的濃度,從而估計不確定性。

    4 展望

    在毒物鑒定實踐中,當血液檢材缺失、污染或因受其他因素影響(毒物暴露水平較低、毒物半衰期較短)導致鑒定結(jié)果可靠性存疑時,需要尋找適宜的替代檢材。膽汁較血液具有較長的檢測窗口,對半衰期較短的毒物有明顯的檢測優(yōu)勢。同時,因其自身成分的性質(zhì)決定了膽汁不易滋生細菌,產(chǎn)生污染。另外,部分研究顯示,膽汁與血液濃度之間存在著顯著的相關(guān)性且其受死后再分布影響較小。綜上,膽汁可以作為較為理想的替代檢材為血液中毒物濃度分析提供補充及質(zhì)量控制,其在死后毒物學領(lǐng)域具有優(yōu)勢和潛在的應(yīng)用價值。

    目前,部分國家仍將膽汁作為法醫(yī)毒物鑒定的常規(guī)檢材,而國內(nèi)關(guān)于膽汁中毒物分析的研究還較少。因此,對于膽汁在鑒定實踐中的研究及應(yīng)用尚有待深入與推廣。

    猜你喜歡
    可卡因檢材毒物
    快跑!有毒物 絕密毒藥報告
    毒物——水銀
    疑難生物檢材DNA的檢驗探究
    AMDIS在法醫(yī)毒物分析中的應(yīng)用
    微量接觸類生物檢材的游離DNA問題分析
    直接擴增法提取脫落細胞DNA
    海峽科學(2015年11期)2015-09-19 06:48:18
    科學家找到抑制可卡因上癮新方法等
    科技手段在優(yōu)質(zhì)檢材獲取中的應(yīng)用
    河南科技(2014年5期)2014-02-27 14:08:22
    鉛:一種全球性毒物
    世界科學(2013年5期)2013-03-11 18:09:30
    可卡因成癮之謎
    祝您健康(1998年11期)1998-12-25 10:18:52
    亚洲国产精品一区二区三区在线| 久久久精品免费免费高清| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲男人天堂网一区| 国产成人精品无人区| 国产一区二区三区av在线| 亚洲国产欧美在线一区| 又黄又粗又硬又大视频| av线在线观看网站| 五月开心婷婷网| 久久九九热精品免费| 国产精品 欧美亚洲| 老司机深夜福利视频在线观看 | 亚洲九九香蕉| 中文字幕人妻丝袜制服| bbb黄色大片| 午夜老司机福利片| 窝窝影院91人妻| 久久久精品区二区三区| 午夜福利,免费看| 亚洲国产欧美一区二区综合| svipshipincom国产片| 老司机深夜福利视频在线观看 | 国产精品欧美亚洲77777| 无限看片的www在线观看| 国产精品影院久久| 视频区欧美日本亚洲| 后天国语完整版免费观看| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 岛国在线观看网站| 天天影视国产精品| 交换朋友夫妻互换小说| 国产精品 欧美亚洲| 手机成人av网站| 日韩电影二区| 啪啪无遮挡十八禁网站| 中文字幕最新亚洲高清| 妹子高潮喷水视频| 在线精品无人区一区二区三| bbb黄色大片| 黄色毛片三级朝国网站| 日本五十路高清| 90打野战视频偷拍视频| 两人在一起打扑克的视频| 91精品国产国语对白视频| 妹子高潮喷水视频| 久久久国产精品麻豆| 精品熟女少妇八av免费久了| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久久久久久国产电影| 免费高清在线观看日韩| 精品欧美一区二区三区在线| 色婷婷久久久亚洲欧美| 少妇被粗大的猛进出69影院| 最近最新免费中文字幕在线| 69精品国产乱码久久久| 欧美日韩一级在线毛片| 香蕉国产在线看| 久久久国产成人免费| 69精品国产乱码久久久| 成人国产av品久久久| 一本大道久久a久久精品| av天堂在线播放| 国产不卡av网站在线观看| 深夜精品福利| 亚洲久久久国产精品| videosex国产| 免费观看av网站的网址| 亚洲精品乱久久久久久| 欧美日韩精品网址| 午夜福利,免费看| 欧美成狂野欧美在线观看| 国产精品一区二区免费欧美 | 亚洲av电影在线进入| 日韩精品免费视频一区二区三区| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 久久中文看片网| 黄片小视频在线播放| 国产又色又爽无遮挡免| 久久久久精品人妻al黑| 母亲3免费完整高清在线观看| 嫁个100分男人电影在线观看| √禁漫天堂资源中文www| 国产精品熟女久久久久浪| 精品亚洲成a人片在线观看| 超碰97精品在线观看| 欧美国产精品va在线观看不卡| 国产片内射在线| 9色porny在线观看| 九色亚洲精品在线播放| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 青草久久国产| 黑人欧美特级aaaaaa片| 国产精品免费大片| 国产真人三级小视频在线观看| 精品人妻1区二区| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲精品粉嫩美女一区| 日韩三级视频一区二区三区| 成人免费观看视频高清| 久久久国产精品麻豆| 黑丝袜美女国产一区| 最近最新免费中文字幕在线| 一区二区av电影网| 我的亚洲天堂| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲精品粉嫩美女一区| 亚洲国产欧美在线一区| av电影中文网址| 亚洲精品在线美女| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产亚洲精品第一综合不卡| 国产精品一二三区在线看| 黄片大片在线免费观看| 嫁个100分男人电影在线观看| 国产欧美日韩综合在线一区二区| 欧美黄色淫秽网站| 色综合欧美亚洲国产小说| 高清在线国产一区| 大码成人一级视频| av又黄又爽大尺度在线免费看| 一本色道久久久久久精品综合| 国产区一区二久久| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 精品久久久久久电影网| av片东京热男人的天堂| tocl精华| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 久久精品亚洲av国产电影网| 狠狠狠狠99中文字幕| 日韩熟女老妇一区二区性免费视频| 久久毛片免费看一区二区三区| 啦啦啦 在线观看视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 国产成人影院久久av| 嫁个100分男人电影在线观看| 伊人亚洲综合成人网| 国产在线免费精品| 成人免费观看视频高清| 狠狠狠狠99中文字幕| 国产精品 国内视频| 久久久国产成人免费| 欧美大码av| 免费一级毛片在线播放高清视频 | 99九九在线精品视频| 精品亚洲成国产av| 在线天堂中文资源库| 香蕉丝袜av| av网站免费在线观看视频| 老司机午夜十八禁免费视频| 久久久精品94久久精品| 国产精品1区2区在线观看. | 丝袜在线中文字幕| 成年美女黄网站色视频大全免费| 久久热在线av| 亚洲精品中文字幕在线视频| 少妇被粗大的猛进出69影院| 在线天堂中文资源库| 高清黄色对白视频在线免费看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 男女高潮啪啪啪动态图| 亚洲精品一区蜜桃| 欧美日韩成人在线一区二区| 高清欧美精品videossex| 日韩欧美一区视频在线观看| 一区二区av电影网| 欧美日韩精品网址| 亚洲国产看品久久| 国产精品.久久久| 91成年电影在线观看| 亚洲七黄色美女视频| 亚洲色图 男人天堂 中文字幕| 欧美另类亚洲清纯唯美| 美女国产高潮福利片在线看| 国产一卡二卡三卡精品| 精品一区二区三区四区五区乱码| 99热全是精品| www.av在线官网国产| 亚洲人成电影观看| 人人妻人人澡人人看| 亚洲精品国产色婷婷电影| 国产精品久久久久成人av| 下体分泌物呈黄色| 久久天堂一区二区三区四区| av片东京热男人的天堂| 亚洲精品国产区一区二| 天天操日日干夜夜撸| 国产日韩一区二区三区精品不卡| 新久久久久国产一级毛片| 国产免费福利视频在线观看| 性少妇av在线| 欧美精品av麻豆av| 高清欧美精品videossex| 超碰97精品在线观看| 一本一本久久a久久精品综合妖精| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 下体分泌物呈黄色| 最近中文字幕2019免费版| 黑人猛操日本美女一级片| 好男人电影高清在线观看| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 精品久久蜜臀av无| 精品第一国产精品| 亚洲欧美清纯卡通| 日本五十路高清| videosex国产| 午夜久久久在线观看| 久久久久久久大尺度免费视频| 天天添夜夜摸| 叶爱在线成人免费视频播放| 麻豆av在线久日| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲av片天天在线观看| 久久久久久人人人人人| 大香蕉久久网| 搡老乐熟女国产| 精品人妻一区二区三区麻豆| 免费高清在线观看视频在线观看| 无限看片的www在线观看| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频| 一本色道久久久久久精品综合| 热99国产精品久久久久久7| 12—13女人毛片做爰片一| 国产av一区二区精品久久| 久久免费观看电影| 国产男女内射视频| 老汉色∧v一级毛片| 肉色欧美久久久久久久蜜桃| 免费在线观看日本一区| kizo精华| 精品欧美一区二区三区在线| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 亚洲专区字幕在线| 99久久人妻综合| 五月开心婷婷网| 91国产中文字幕| 国产男女内射视频| 亚洲中文字幕日韩| 日韩欧美免费精品| 男男h啪啪无遮挡| 久久毛片免费看一区二区三区| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 99热全是精品| 国产亚洲精品久久久久5区| 精品一区在线观看国产| 99热全是精品| avwww免费| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲国产av新网站| 在线观看免费高清a一片| 黄色 视频免费看| 午夜福利免费观看在线| 免费在线观看日本一区| 黄片小视频在线播放| 久久久久国产一级毛片高清牌| 美女视频免费永久观看网站| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 在线观看免费高清a一片| 999久久久国产精品视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 交换朋友夫妻互换小说| 老司机午夜十八禁免费视频| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 久久久久精品人妻al黑| 国产精品亚洲av一区麻豆| av电影中文网址| 男女午夜视频在线观看| 亚洲国产日韩一区二区| 波多野结衣一区麻豆| 国精品久久久久久国模美| 久热这里只有精品99| 一区在线观看完整版| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 欧美少妇被猛烈插入视频| 日本五十路高清| 又大又爽又粗| 淫妇啪啪啪对白视频 | 一个人免费看片子| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 最新在线观看一区二区三区| 97精品久久久久久久久久精品| 中文字幕人妻丝袜制服| 亚洲国产欧美网| 亚洲男人天堂网一区| 午夜久久久在线观看| av天堂在线播放| 成人黄色视频免费在线看| 国产精品熟女久久久久浪| 国产在线一区二区三区精| 亚洲精品国产精品久久久不卡| 日本av免费视频播放| 亚洲欧美日韩高清在线视频 | 日韩欧美一区视频在线观看| 十分钟在线观看高清视频www| 丝袜在线中文字幕| 后天国语完整版免费观看| 9热在线视频观看99| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 成人黄色视频免费在线看| 高清在线国产一区| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 美女视频免费永久观看网站| 十八禁网站免费在线| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久久久久久国产电影| 精品熟女少妇八av免费久了| 激情视频va一区二区三区| 天天操日日干夜夜撸| 一本久久精品| 日韩欧美免费精品| 一区二区三区乱码不卡18| 日本精品一区二区三区蜜桃| 极品人妻少妇av视频| 欧美乱码精品一区二区三区| 精品人妻1区二区| 精品国产乱码久久久久久男人| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片| 九色亚洲精品在线播放| 日韩人妻精品一区2区三区| av不卡在线播放| 一个人免费在线观看的高清视频 | 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 视频区图区小说| 国产亚洲av高清不卡| 十八禁网站网址无遮挡| 制服诱惑二区| 黄片播放在线免费| 欧美日韩亚洲高清精品| 国产精品.久久久| 淫妇啪啪啪对白视频 | 日本撒尿小便嘘嘘汇集6| 成人av一区二区三区在线看 | 国产日韩欧美亚洲二区| 国产97色在线日韩免费| 男女午夜视频在线观看| 免费在线观看黄色视频的| 老司机亚洲免费影院| 午夜影院在线不卡| 亚洲国产精品一区二区三区在线| 大码成人一级视频| 国产老妇伦熟女老妇高清| 大香蕉久久网| 中文字幕高清在线视频| 久久久国产精品麻豆| 亚洲精品av麻豆狂野| 亚洲久久久国产精品| 国产精品一区二区免费欧美 | 成年人免费黄色播放视频| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 欧美中文综合在线视频| 一本综合久久免费| 亚洲,欧美精品.| 一进一出抽搐动态| 亚洲精品国产av成人精品| 国产一区二区三区在线臀色熟女 | 国产成人精品在线电影| 国产免费一区二区三区四区乱码| 精品久久久久久久毛片微露脸 | 免费在线观看影片大全网站| 亚洲av电影在线进入| 国产97色在线日韩免费| 秋霞在线观看毛片| 国产一区二区激情短视频 | 亚洲第一青青草原| 亚洲av电影在线观看一区二区三区| 美女午夜性视频免费| 精品国产一区二区久久| 久久久久久久大尺度免费视频| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久ye,这里只有精品| 欧美精品一区二区免费开放| 国产av国产精品国产| 久久久国产欧美日韩av| 久久人妻福利社区极品人妻图片| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 五月天丁香电影| 黄片小视频在线播放| 操美女的视频在线观看| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 亚洲国产日韩一区二区| 两人在一起打扑克的视频| 一二三四在线观看免费中文在| 亚洲av美国av| 国产区一区二久久| 国产亚洲av高清不卡| 99国产综合亚洲精品| 中文字幕最新亚洲高清| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 18在线观看网站| 久久久久网色| 免费看十八禁软件| 韩国高清视频一区二区三区| 国产熟女午夜一区二区三区| 纯流量卡能插随身wifi吗| 18禁黄网站禁片午夜丰满| 热re99久久精品国产66热6| 国产精品 国内视频| 久久精品国产综合久久久| 日韩精品免费视频一区二区三区| 欧美日韩成人在线一区二区| netflix在线观看网站| 国产精品久久久av美女十八| 国产熟女午夜一区二区三区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产欧美日韩一区二区精品| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 午夜精品国产一区二区电影| 99久久国产精品久久久| 日本91视频免费播放| 中文字幕色久视频| 黑人巨大精品欧美一区二区蜜桃| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 亚洲精品av麻豆狂野| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频 | 美女脱内裤让男人舔精品视频| 久久青草综合色| 国产欧美亚洲国产| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 国产伦人伦偷精品视频| 丝袜脚勾引网站| 一级,二级,三级黄色视频| 亚洲成人免费电影在线观看| 在线观看免费午夜福利视频| 日本91视频免费播放| 国产极品粉嫩免费观看在线| 亚洲欧美激情在线| 丝袜美腿诱惑在线| 青春草亚洲视频在线观看| 丝袜喷水一区| 香蕉国产在线看| 亚洲精品一卡2卡三卡4卡5卡 | 久久青草综合色| 国产欧美日韩精品亚洲av| 99国产精品99久久久久| 免费观看av网站的网址| 久久国产精品影院| 一区在线观看完整版| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 老司机午夜十八禁免费视频| 精品国产一区二区三区四区第35| av天堂久久9| 十八禁网站免费在线| 精品高清国产在线一区| 亚洲七黄色美女视频| 无限看片的www在线观看| av有码第一页| 精品一区在线观看国产| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 黄色片一级片一级黄色片| 秋霞在线观看毛片| a级毛片在线看网站| 亚洲欧美激情在线| 黄色片一级片一级黄色片| 一个人免费看片子| 欧美精品av麻豆av| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 精品国产一区二区三区久久久樱花| 亚洲欧洲精品一区二区精品久久久| 久久人人97超碰香蕉20202| 十八禁人妻一区二区| 手机成人av网站| 天天操日日干夜夜撸| 国产精品一二三区在线看| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 免费黄频网站在线观看国产| www.熟女人妻精品国产| 大香蕉久久网| 老司机亚洲免费影院| 免费高清在线观看视频在线观看| 日韩制服丝袜自拍偷拍| 亚洲avbb在线观看| kizo精华| 久久ye,这里只有精品| 久久狼人影院| 99热网站在线观看| 婷婷成人精品国产| 国产黄色免费在线视频| 欧美性长视频在线观看| 叶爱在线成人免费视频播放| 超碰成人久久| 视频在线观看一区二区三区| 亚洲 国产 在线| 婷婷丁香在线五月| 国产精品二区激情视频| 午夜福利影视在线免费观看| 久久久久国内视频| 亚洲av成人不卡在线观看播放网 | 人妻一区二区av| 国产av国产精品国产| 精品人妻熟女毛片av久久网站| 久久国产精品人妻蜜桃| 两个人免费观看高清视频| 极品人妻少妇av视频| 亚洲国产成人一精品久久久| 超色免费av| 亚洲中文字幕日韩| 欧美日韩一级在线毛片| 美女午夜性视频免费| 黄色a级毛片大全视频| 美女脱内裤让男人舔精品视频| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产av又大| 久久久国产欧美日韩av| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 美女高潮到喷水免费观看| 五月天丁香电影| 欧美日韩成人在线一区二区| 韩国高清视频一区二区三区| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 在线 av 中文字幕| 热99久久久久精品小说推荐| 国产国语露脸激情在线看| 悠悠久久av| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产一区有黄有色的免费视频| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 亚洲人成77777在线视频| 女人爽到高潮嗷嗷叫在线视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 国产成人精品久久二区二区免费| 欧美黑人欧美精品刺激| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 国产免费av片在线观看野外av| 夫妻午夜视频| 老汉色av国产亚洲站长工具| 在线 av 中文字幕| av福利片在线| 午夜福利乱码中文字幕| 91精品伊人久久大香线蕉| 电影成人av| 91字幕亚洲| 国产亚洲午夜精品一区二区久久| 99国产精品免费福利视频| 亚洲专区字幕在线| 欧美成狂野欧美在线观看| 少妇精品久久久久久久| 久久影院123| 亚洲av美国av| 亚洲精品久久午夜乱码| 亚洲国产精品999| 精品第一国产精品| 欧美老熟妇乱子伦牲交| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 欧美黑人欧美精品刺激| 丝袜美足系列| 亚洲精品久久久久久婷婷小说| 精品人妻一区二区三区麻豆| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 国产精品av久久久久免费| 一区二区三区激情视频| 色婷婷av一区二区三区视频| 亚洲,欧美精品.| 又黄又粗又硬又大视频| 男人操女人黄网站| 精品视频人人做人人爽| 男男h啪啪无遮挡| 亚洲精品自拍成人| 国产无遮挡羞羞视频在线观看| 日本av免费视频播放| 亚洲精品在线美女| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 丰满饥渴人妻一区二区三| 超色免费av| 久久久久久免费高清国产稀缺| tocl精华| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 两个人看的免费小视频| 亚洲欧美精品自产自拍| 三上悠亚av全集在线观看| 国产成人啪精品午夜网站| 国产亚洲欧美在线一区二区| 又紧又爽又黄一区二区| 成人国语在线视频| 欧美日本中文国产一区发布| 老熟妇乱子伦视频在线观看 | 狂野欧美激情性bbbbbb| 桃花免费在线播放| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产成人av激情在线播放| 亚洲中文av在线| 亚洲中文日韩欧美视频| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 午夜日韩欧美国产| av有码第一页| 在线 av 中文字幕| 99久久国产精品久久久| a级片在线免费高清观看视频| 超碰成人久久| 女警被强在线播放| 18禁国产床啪视频网站| 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲 | 在线十欧美十亚洲十日本专区| 在线观看免费午夜福利视频| 国产又色又爽无遮挡免| 欧美人与性动交α欧美软件| 欧美日韩一级在线毛片| 国产欧美日韩一区二区三 | 国产日韩欧美在线精品| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| a级片在线免费高清观看视频| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 亚洲国产日韩一区二区| 亚洲欧美一区二区三区久久| av网站免费在线观看视频| 成人av一区二区三区在线看 | 国产一区二区激情短视频 | 极品人妻少妇av视频| 国产精品二区激情视频| 国产精品99久久99久久久不卡| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 日韩三级视频一区二区三区| 秋霞在线观看毛片|