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    沙苑子的保肝作用實驗研究

    2018-09-18 08:41:14李紅俠
    關鍵詞:沙苑子四氯化碳

    李紅俠

    【摘 要】 目的:研究沙苑子對急性化學性肝損傷的保護作用。方法:各藥物組灌胃相應藥物,正常對照組與模型組灌胃生理鹽水,1次/d,共7d。末次給藥后1h,除正常對照組外,其余各組以小鼠腹腔注射0.1mL/10g體重的10%四氯化碳油溶液制備急性肝損傷模型24h后,檢測各組小鼠血清AST、ALT活性及肝組織中CAT、GSH活性變化。結果:與模型組比較,沙苑子在300mg生藥/kg體重劑量下,可明顯降低AST、ALT活性(P<0.05);并顯著升高CAT、GSH活性(P<0.01)。結論:沙苑子對四氯化碳致小鼠急性化學性肝損傷有一定的保護作用。

    【關鍵詞】 沙苑子;急性肝損傷;四氯化碳

    【中圖分類號】R-332 【文獻標志碼】 A 【文章編號】1007-8517(2018)07-0019-02

    Abstract:Objective To study the protective effect of Semen Astragali Complanati for acute chemical liver damage mouse induced by carbon tetrachloride.Methods All animals were given different doses of Semen Astragali Complanati,then the acute liver damage model were prepared. The contents of ALT、AST in serum of all animals and the activity of CAT、GSH in the liver of the acute liver injury animals inducted by carbon tetrachloride. Results Compared with animals model group, Semen Astragali Complanati could significantly reduced the active of AST, ALT(P<0.05)at the dosage of 300mg/kg;the activities of CAT and GSH in the carbon tetrachloride-injured liver were significantly increased(P<0.01).Conclusion Semen Astragali Complanati have the protective effect for acute chemical liver damage mouse induced by carbon tetrachloride.

    Keywords:Semen Astragali Complanati;Acute Liver Damage;Carbon Tetrachloride

    沙苑子來源于豆科(Leguminosee)植物扁莖黃芪Astragalus complanatus R.Br.的干燥成熟種子,其性味甘溫,歸肝、腎二經(jīng),具有養(yǎng)肝明目、補腎助陽、固精縮尿止帶的功效。實驗以四氯化碳制備小鼠急性化學性肝損傷模型,研究沙苑子的保肝作用,以期為肝病的防治,提供更為廣泛的藥源。

    1 材料

    1.1 動物 SPF級昆明種小鼠,雄性,體重18~22g,由陜西省中醫(yī)藥研究院實驗動物中心提供,動物合格證號是陜醫(yī)動證字第08-025號。

    1.2 藥物 沙苑子購于華芝堂藥店,經(jīng)渭南職業(yè)技術學院孫教授鑒定為正品沙苑子,然后制備成濃度為600mg生藥/mL、300mg生藥/mL、150mg生藥/mL的水煎液,按1mL/kg體重的劑量給藥,分為三個計量組:高(600mg生藥/kg體重)、中(300mg生藥/kg體重)、低(150mg生藥/kg體重)。雙環(huán)醇片(規(guī)格25mg/片,批號:130815,北京協(xié)和藥廠)。

    1.3 試劑 四氯化碳(CCL4,批號:20151030,廣州光華化學廠有限公司)制備成10%的花生油油劑。丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

    1.4 儀器 UV-754紫外可見分光光度計(上??茖W精密儀器有限公司)。

    2 方法

    2.1 分組 將小鼠隨機分為6組,每組10只,即正常對照組,模型組,雙環(huán)醇陽性對照組,沙苑子高(600mg生藥/kg體重)、中(300mg生藥/kg體重)、低(150mg生藥/kg體重)劑量組。

    2.2 試驗方法 除正常對照組與模型組灌胃生理鹽水,其余藥物組灌胃相應藥物,1次/d,連續(xù)7d。末次灌胃后1h,除正常對照組外,其余各組腹腔注射四氯化碳花生油油劑造模24h,眼眶靜脈采血,靜置1h,3000rpm離心10min,取血清100μL,測定ALT、AST活性。取小鼠肝臟,用生理鹽水制成10%的肝組織勻漿,離心,取上清,測定CAT、GSH活性。

    2.3 統(tǒng)計方法 采用SPSS13.0統(tǒng)計分析軟件處理數(shù)據(jù),計量資料以均數(shù)加減標準差(x±s)表示,采用t檢驗,P<0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

    3 結果

    與正常組對比,模型組ALT、AST顯著升高(P<0.01),CAT、GSH顯著降低(P<0.01),說明模型制備成功。沙苑子高劑量組可降低血清ALT(P<0.05),降低AST但無統(tǒng)計學差異(P>0.05),升高肝組織中CAT、GSH活性(P<0.01);中劑量組與雙環(huán)醇陽性對照組均可降低血清ALT(P<0.01),降低AST(P<0.05),升高肝組織中CAT、GSH活性(P<0.01);低劑量組對四氯化碳引起的小鼠血清ALT、AST升高均無明顯作用(P>0.05),但可以顯著升高肝組織中CAT活性(P<0.01)。見表1。

    4 討論

    反應肝臟毒性的血清酶指標是丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST),二者存在于機體肝細胞內(nèi),當肝細胞細胞膜結構破壞,通透性改變,可從細胞內(nèi)逸出而進入血液循環(huán)[1]。研究表明[2]氧化應激能夠損傷肝細胞,在肝臟疾病中起重要作用。大量的ROS可氧化不飽和脂質導致脂質過氧化,加劇線粒體功能障礙。此外,抗氧化物質的缺乏使ROS滅活障礙,進一步增加ROS對線粒體的損傷作用,致使AST、ALT流出細胞,消耗細胞內(nèi)的抗氧化物質,導致過氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽(GSH)缺乏,形成惡性循環(huán),從而引起肝臟疾病。試驗結果顯示以300mg生藥/kg體重沙苑子灌胃給藥,可達到陽性對照藥雙環(huán)醇的效果,均能顯著降低血清ALT(P<0.01),降低AST(P<0.05),顯著升高肝組織中CAT、GSH活性(P<0.01),表明沙苑子在300mg生藥/kg體重劑量下,可通過升高肝組織中CAT、GSH活性來降低AST、ALT,以達到保護肝臟免受CCL4所致的急性化學性損傷,其機制還需后續(xù)深入研究。

    參考文獻

    [1]Jain AK,Jaiswal AK.Phosphorylation of tyrosine 568 controis nuclear export of nrf2[J].J Biol Chem,2006, 281(17) ∶12132-12142.

    [2]Matsuzawa NN,Takamura T,Ando H,et al.Increased oxidative stress precedes the onsetofhigh-fatdiet-induced insulin resistance and obesity[J].Metabolism,2008,57(8) ∶1071-1077.

    (收稿日期:2012-02-27 編輯:程鵬飛)

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