乳腺癌患者腫瘤異常蛋白表達的影響因素研究*

成琳，楊良根，許凌云，陳偉賢，裴蓓，朱玉蘭

（南京醫(yī)科大學附屬常州第二人民醫(yī)院 乳腺外科，江蘇 常州 213003）

在我國，乳腺癌的發(fā)病率和死亡率均位于女性癌癥的前列[1]。乳腺癌復發(fā)、轉(zhuǎn)移是乳腺癌治療失敗的主要原因[2-3]。在腫瘤發(fā)生初期，原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變，繼而產(chǎn)生腫瘤異常蛋白（tumor abnormal protein, TAP）[4]。所以腫瘤的發(fā)生、發(fā)展常伴隨著體內(nèi)TAP表達的升高[5-6]。近年來，TAP作為一種診斷手段在臨床中應用廣泛[7]。但是TAP在乳腺癌的相關研究較少。本研究就乳腺癌患者TAP表達水平與臨床病理特征的關系進行分析。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2014年1月-2016年1月南京醫(yī)科大學附屬常州第二人民醫(yī)院經(jīng)手術確診為乳腺癌的84例女性患者的臨床資料。排除標準：①合并TAP檢測陽性干擾因素，包括骨折尚未愈合、自身免疫性疾病、糖尿病等；②合并其他良惡性腫瘤；③妊娠或哺乳期女性。

1.2 方法

TAP圖像分析系統(tǒng)檢測儀（產(chǎn)品型號RS2011-A）、TAP檢測試劑盒購自浙江瑞生醫(yī)療科技有限公司。所有患者采集空腹末梢靜脈血，TAP檢測方法如下：①用采集的靜脈血制作血涂片；②將事先準備好的凝集素滴在血涂片上；③待其自然干燥后，由專業(yè)的檢驗科醫(yī)生在TAP圖像分析系統(tǒng)檢測儀上觀察凝聚物顆粒，另外的醫(yī)生核對并且測量凝聚物面積[8]。顯微鏡下觀察凝聚物顆粒面積≥121μm2，邊緣完整，橢圓形、不規(guī)則圓形或多邊形，具有折光性，中央淡染區(qū)，視為TAP陽性（見圖1A）。凝聚物顆粒面積＜121μm2，斑點呈樹枝狀、雪花狀，無弧形條帶狀小顆粒者，視為TAP陰性（見圖1B）。

圖1 凝聚物顆粒

比較不同臨床病理特征患者TAP表達情況。根據(jù)年齡、有無腋窩淋巴結轉(zhuǎn)移、雌激素受體（estrogen receptor, ER）、孕激素受體（progesterone receptor, PR）、人表皮生長因子受體（human epidermal growth factor receptor-2, HER-2）表達情況將乳腺癌患者進行分組，比較各組TAP表達差異，分析TAP表達水平與患者年齡、有無腋窩淋巴結轉(zhuǎn)移、ER、PR、HER-2表達情況等病理特征的關系。

1.3 統(tǒng)計學方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 20.0統(tǒng)計軟件，計量資料以均數(shù)±標準差（±s）表示，比較用t檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同年齡患者的TAP表達水平比較

84例患者中，年齡≥65歲16例，年齡＜65歲68例，其TAP蛋白相對表達量分為（178.8±32.8）和（131.0±8.3），經(jīng)t檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（t=2.006，P=0.045），年齡＞65歲乳腺癌患者的TAP表達水平高于＜65歲患者。

2.2 不同腋下淋巴結轉(zhuǎn)移患者的TAP表達水平比較

84例患者中，無腋下淋巴結轉(zhuǎn)移48例，腋下淋巴結轉(zhuǎn)移36例，其TAP蛋白相對表達量分為（121.4±9.5）和（152.4±15.6），經(jīng)t檢驗，差異有統(tǒng)計學意義（t=2.079，P=0.041），腋下淋巴結轉(zhuǎn)移患者的TAP表達水平高于無腋下淋巴結轉(zhuǎn)移患者。

2.3 不同HER-2表達患者的TAP表達水平比較

84例患者中，HER-2表達陰性57例，HER-2表達陽性27例，其TAP蛋白相對表達量分為（139.4±9.5）和（122.3±11.6），經(jīng)t檢驗，差異無統(tǒng)計學意義（t=1.076，P=0.285）。

2.4 不同激素受體表達患者的TAP表達水平比較

84例患者中，ER和/或PR表達陽性55例，ER和PR表達陰性29例，其TAP蛋白相對表達量分為（130.1±9.2）和（141.6±12.8），經(jīng)t檢驗，差異無統(tǒng)計學意義（t=0.774，P=0.457）。

3 討論

有研究表明，TAP與甲胎蛋白聯(lián)合檢測可以提高肝癌的檢出率[9]。TAP與惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預后存在一定關聯(lián)[10-11]。目前研究證明，TAP在惡性腫瘤癌前病變早期篩查中具有優(yōu)勢，特別是針對膀胱癌、胃腸道腫瘤等有較高的敏感性與特異性[12-13]。在國內(nèi)，一些臨床科室亦將TAP作為腫瘤指標的輔助檢查，列為腫瘤患者的常規(guī)檢查[14]。但TAP在乳腺癌患者中的應用尚不多見。國內(nèi)少量研究證明，乳腺癌患者腫瘤直徑越大、病理分級越高、轉(zhuǎn)移淋巴結數(shù)目越多，常伴有TAP凝聚物面積異常升高，提示在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展中，TAP表達及其相關通路的改變可能起非常重要的作用[4]。

國內(nèi)的研究病例數(shù)較少，并且無針對乳腺癌不同分子分型進行分層分析。本研究結果表明，年齡≥65歲患者的TAP表達水平高于年齡＞65歲患者，淋巴結轉(zhuǎn)移患者的TAP表達水平高于無淋巴結轉(zhuǎn)移患者，然而，針對不同乳腺癌分子分型，比如ER、PR及HER-2不同表達的乳腺癌患者，TAP的表達水平無差異。本研究證實，TAP的表達水平與年齡、淋巴結轉(zhuǎn)移相關，與乳腺癌分子分型無明顯關聯(lián)。分析其可能原因為：①在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中，糖鏈蛋白可造成腫瘤細胞黏附能力下降，導致腫瘤細胞遷移能力提高[15]。②多數(shù)糖基化修飾酶在細胞惡變早期失活，甚至某些胚胎成熟時期靜止的酶類被重新激活，造成TAP合成增加，并表現(xiàn)為血清中TAP表達升高[16]。TAP在高齡和淋巴結轉(zhuǎn)移患者中的診斷價值更高，但對于乳腺癌不同分子分型的指導價值偏低。當然，這些研究結果也可能與本研究病例數(shù)較少有關，下一步筆者將收集更多的病例進行研究。

綜上所述，不同類型乳腺癌患者末梢血TAP表達水平不同，TAP及其相關蛋白表達水平可能在乳腺癌病情進展中有所改變，這對臨床工作具有指導意義。但是，在臨床腫瘤診療中，TAP大多仍停留在表觀學層面上，探究其深層機制或通路的研究少之又少，仍需要大量的體內(nèi)外實驗進一步研究TAP的表達及相關通路與乳腺癌或是其他惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展的關系。