芹菜籽提取物對高尿酸血癥模型大鼠的血尿酸以及抗氧化能力的影響

張銘 徐薔 肖帆 孫敏

摘 要：目的 本實驗采用腺嘌呤聯(lián)合乙胺丁醇誘導(dǎo)大鼠高血尿酸癥的造模方法，觀察芹菜籽提取物對高尿酸血癥大鼠的降血尿酸及抗氧化作用，并進(jìn)一步觀察大鼠腎臟的病變。方法 雄性SD大鼠105只適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，隨機(jī)分組，每組15只，A組（正常對照組）、B組（模型對照組）、C組（西芹3000組）、D組（別嘌醇組）、E組（低劑量組）、F組（中劑量組）、G組（高劑量組）。模型組及各給藥組分別給予腺嘌呤100 mg/（kg·d）+鹽酸乙胺丁醇300 mg/（kg·d）于造成高尿酸動物模型，每天于造模后4 h給予治療藥物。C組給予西芹3000片，24 mg/100g體重，每100 g給予0.5 ml體積灌胃；D組給予別嘌醇2.4 mg/100g；D、F、G組分別給予芹菜籽提取物70、140、280 mg/100g（E組灌胃按照560 mg/100g體重灌胃一周后改為70 mg/100g體重芹菜籽提取物溶液）。模型組和對照組分別給予等體積的蒸餾水灌胃。大鼠每周記錄體重。實驗的第三周結(jié)束后，禁食12 h，取腹主脈血，檢測腎功能指標(biāo)、血清SOD、T-AOC活性和MDA水平以及腎臟病理切片。結(jié)果 造模過程中大鼠體重明顯降低，藥物治療對大鼠體重?zé)o明顯改善。模型組大鼠腎指數(shù)明顯增加，藥物治療組隊腎臟指數(shù)無明顯改善，但是芹菜籽提取物中劑量的腎臟指數(shù)明顯增加。模型組大鼠尿酸明顯增加，腎功能明顯降低，芹菜籽提取物低劑量和高劑量均能明顯降低尿酸水平，提高大鼠腎臟功能。模型組大鼠血清超氧化物歧化酶活性明顯降低（P<0.001），西芹片和芹菜籽提取物可明顯增加SOD活性。模型組大鼠總抗氧化能力明顯增加，藥物治療對總抗氧化能力無明顯影響。結(jié)論 芹菜籽提取物有明顯降低尿酸的作用，以高劑量為優(yōu)，且降尿酸效果和別嘌呤醇相似，優(yōu)于西芹3000片；芹菜籽提取物對高尿酸大鼠腎功能有明顯保護(hù)作用；芹菜籽提取物有明顯抗氧化作用，表現(xiàn)為降低MDA和增加SOD，對總抗氧化作用不明顯。

關(guān)鍵詞：芹菜籽；高尿酸血癥；血尿酸；SOD；T-AOC；MDA

中圖分類號：R589.7 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2018.13.024

文章編號：1006-1959（2018）13-0084-04

Abstract：Objective By using adenine combined with ethambutanol to induce hyperuricemia in rats，the effects of celery seed extract on serum uric acid and antioxidation in hyperuricemia rats were observed.Methods 105 male SD rats were fed adaptively for one week and were randomly divided into two groups.There were 15 rats in each group，group A（normal control group），group B（model control group），group C（3000 group of celery），group D（allopurinol group），E group（low dose group），F(xiàn) group（middle dose group），G group （high dose group）.The model group and each administration group were given adenine 100 mg/ （kg.d）+ethambutol 300 mg/（kg.d）to cause high uric acid animal model.Each day was given 4 h after making the model.Group C was given 3000 celery tablets，24 mg/100g weight and 0.5 ml volume per 100 g were given to gastric lavage；group D was given allopurinol 2.4 mg/100g；D，F(xiàn)，G group were given celery seed extracts 70，140，280 mg/100g respectively（E group gavage after 560 mg/100g weight to 70 mg/100g weight celery seed extract solution）.The model group and the control group were given the same volume of distilled water to gavage the stomach.The rats recorded weight per week.At the end of the third week of the experiment，fasting for 12 h，taking the main vein blood of the abdomen， detecting the renal function index，serum SOD，T-AOC activity and MDA level，and pathological section of the kidney.Results The body weight of the rats was significantly reduced during the modeling process，and the drug treatment did not significantly improve the body weight of the rats.The kidney index of the model group was significantly increased，and the kidney index of the drug treatment group was not significantly improved，but the kidney index of the dose of celery seed extract was significantly increased.In the model group，the uric acid increased significantly and the renal function was significantly reduced.The low dose and high dose of celery seed extract could significantly reduce the uric acid level and improve the kidney function of rats.Serum superoxide dismutase activity was significantly decreased in the model group（P<0.001），and the celery tablets and celery seed extracts significantly increased SOD activity.The total antioxidant capacity of the model group was significantly increased，and the drug treatment had no significant effect on the total antioxidant capacity.Conclusion The celery seed extract has a significant effect on reducing uric acid.It is superior in high dose，and the effect of reducing uric acid is similar to that of allopurinol.It is superior to celery 3000 tablets.The celery seed extract has obvious protective effect on the renal function of rats with high uric acid；the celery seed extract has obvious anti-oxidation effect，which is shown to reduce MDA and increase SOD，and the total antioxidant effect is not obvious.

Key words：Celery seed；Hyperuricemia；Blood uric acid；SOD；T-AOC；MDA

痛風(fēng)是由單鈉尿酸鹽沉積所致的晶體相關(guān)性關(guān)節(jié)病，與嘌呤代謝紊亂和尿酸排泄減少所致的高尿酸血癥直接相關(guān)。痛風(fēng)最重要的生化基礎(chǔ)是高尿酸血癥。隨著近年來生活水平的提高，高尿酸血癥和痛風(fēng)的發(fā)病率逐年上升。高尿酸血癥與高血壓、糖代謝紊亂、脂代謝紊亂、肥胖、動脈粥樣硬化等癥狀常并存而且相互影響。本實驗采用腺嘌呤聯(lián)合乙胺丁醇誘導(dǎo)大鼠高血尿酸癥的造模方法[1-6]，觀察芹菜籽提取物對高尿酸血癥大鼠的降血尿酸及抗氧化作用 ，并進(jìn)一步觀察大鼠腎臟的病變。

1材料與方法

1.1試劑以及試劑盒 鹽酸乙胺丁醇片（0.25 g×100片），上海上藥信誼藥廠有限公司；別嘌醇片（0.1 g×100片），上海信誼萬象藥業(yè)股份有限公司；西芹3000由安徽中森生物提供；腺苷酸，Solarbio Life Science；芹菜籽提取物，由安徽中森生物提供；T-AOC、MDA、SOD試劑盒，購自南京建成生物工程研究所。

1.2動物 雄性SD大鼠（嚙齒目、鼠科、大鼠屬）105只，體質(zhì)量（240.01±10.00） g，購于山東濟(jì)南，飼養(yǎng)于安徽大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院實驗動物中心，溫度為18～26 ℃，相對濕度40%～70%，噪音65 dB以下，氨濃度20 PPm以下，普通大鼠顆粒飼料喂養(yǎng)，大鼠自由飲食飲水。大鼠給藥造模前均處于健康狀況，已通過動物倫理會批準(zhǔn)。

1.3方法

1.3.1造模與給藥 大鼠適應(yīng)性飼養(yǎng)一周，隨機(jī)分組，每組15只，分組如下：A：正常對照組；B：模型對照組；C：西芹3000組；D：別嘌醇組；E：芹菜籽提取物低劑量組（0.5倍劑量）；F：芹菜籽提取物中劑量組（1倍劑量）；G：芹菜籽提取物高劑量組（2倍劑量）。

模型組及各給藥組分別給予腺嘌呤100 mg/（kg·d）+鹽酸乙胺丁醇[3-6]300 mg/（kg·d）于造成高尿酸動物模型，每天于造模后4 h給予治療藥物。C組給予西芹3000片，24 mg/100g體重，每100 g給予0.5 ml體積灌胃；D組給予別嘌醇2.4 mg/100g；D、F、G組分別給予芹菜籽提取物70 mg/100g、140 mg/100g、280 mg/100g（E組灌胃按照560 mg/100g體重灌胃1周后改為70 mg/100g體重芹菜籽提取物溶液）。模型組和對照組分別給予等體積的蒸餾水灌胃。大鼠每周記錄體重。

1.3.2指標(biāo)檢測 實驗的第3周結(jié)束后，禁食12 h，稱重，取腹主脈血，離心分離血清，腎功能指標(biāo)送艾迪康生物檢測公司檢測，并按照說明書方法測血清SOD、T-AOC活性和MDA水平。取腎臟部分浸入福爾馬林，送至公司測定病理。

1.4統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS20.0對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1實驗過程中大鼠體重記錄 造模過程中大鼠體重明顯降低，藥物治療對大鼠體重?zé)o明顯改善，見表1。

2.2芹菜籽提取物對高尿酸血癥大鼠腎指數(shù)的影響 模型組大鼠腎指數(shù)明顯增加，藥物治療組隊腎臟指數(shù)無明顯改善，但是芹菜籽提取物中劑量的腎臟指數(shù)明顯增加，見表2。

2.3芹菜籽提取物對高尿酸血癥大鼠抗氧化作用 模型組大鼠血清超氧化物歧化酶（SOD）活性明顯降低（P<0.0001），西芹片和芹菜籽提取物可明顯增肌SOD活性。模型組大鼠總抗氧化能力明顯增加，藥物治療對總抗氧化能力無明顯影響。模型組大鼠血清丙二醛（MDA）明顯增加（P<0.01），芹菜籽提取物低中高濃度均使MDA明顯增加（P<0.05），而對照藥西芹片和別嘌呤醇對MDA無明顯作用，見表3。

2.4芹菜籽提取物對高尿酸血癥大鼠尿酸和腎功能的影響 模型組大鼠尿酸明顯增加，腎功能明顯降低，表現(xiàn)為Cr和BUN明顯增加，別嘌呤醇能明顯降低尿酸，芹菜籽提取物低劑量和高劑量均能明顯降低尿酸水平，作用優(yōu)于西芹片。別嘌呤醇和西芹3000片對高尿酸導(dǎo)致的大鼠腎功能降低無改善作用，但是芹菜籽提取物，尤其是高劑量能明顯降低Cr和BUN，提高大鼠腎臟功能。見表4。

3討論

痛風(fēng)其實是機(jī)體蛋白質(zhì)代謝紊亂，尿酸的合成增加或排出減少，造成高尿酸血癥，當(dāng)血尿酸濃度過高時，尿酸即以鈉鹽的形式沉積在關(guān)節(jié)、軟組織、軟骨和腎臟中，引起組織的異物炎性反應(yīng)。尿酸由嘌呤代謝而來，正常人從飲食中攝取的嘌呤僅占20%左右，其余的嘌呤是在機(jī)體代謝過程中產(chǎn)生的。高尿酸血癥是指在正常嘌呤飲食狀態(tài)下，非同日兩次空腹血尿酸水平男性高于420 μmol/L，女性高于360 μmol/L。

芹菜籽就是取自芹菜小小的花朵中，因而種子的體形也非常之小，呈卵形，顏色多為棕褐色或深棕色，含桉油醇、磷甲氧基酚，傘花內(nèi)酯、芹菜素、亞麻酸、揮發(fā)性油脂、黃酮、硼，礦物質(zhì)（鈣、鎂、鈉、鋅等）。芹菜籽中芹菜素含量是芹菜中的50倍，對于降低血尿酸有著很好的效果。

本實驗采用腺嘌呤聯(lián)合乙胺丁醇誘導(dǎo)大鼠高血尿酸癥的造模方法，有效還原了人體內(nèi)高尿酸血癥形成過程。在本實驗造模時間內(nèi)，芹菜籽提取物有明顯降低尿酸的作用，以高劑量為優(yōu)，且降尿酸效果和別嘌呤醇相似，優(yōu)于西芹3000片；芹菜籽提取物對高尿酸大鼠腎功能有明顯保護(hù)作用，進(jìn)一步作用有待于病理切片證實，而別嘌呤醇和西芹3000片對腎功能無保護(hù)作用；芹菜籽提取物有明顯抗氧化作用，表現(xiàn)為降低MDA和增加SOD，對總抗氧化作用不明顯。

參考文獻(xiàn)：

[1]徐玲玲，劉靜，徐熠.痛風(fēng)顆粒各部位對高尿酸血癥大鼠尿酸和黃嘌呤氧化酶活性的影響[J].現(xiàn)代藥物與臨床，2013，28（4）：500-503.

[2]呂軍，呂芳，方和金，等.高尿酸血癥并急性痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎大鼠模型的建立[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志，2013，23（27）：11-16.

[3]黃敬群，孫文娟，王四旺，等.槲皮素對大鼠痛風(fēng)性關(guān)節(jié)炎抗炎抗氧化活性研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志，2012，18（2）：169-173.

[4]陳光亮，武松，那莎，等.萆薢總皂苷對慢性高尿酸血癥大鼠尿酸排泄指標(biāo)的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2014，34（1）：75-80.

[5]陳光亮，朱立然，那莎，等.萆薢總皂苷對大鼠慢性高尿酸血癥和腎小管尿酸轉(zhuǎn)運體1表達(dá)的影響[J].中國中藥雜志，2013，38（14）：2348-2353.

[6]迪麗達(dá)爾·希力甫，趙平，宋麗娟，等.酵母膏聯(lián)合氧嗪酸鉀構(gòu)建高尿酸血癥模型大鼠繼發(fā)的心血管病變[J].中國組織工程研究，2012，16（11）：1994-1998.

收稿日期：2018-3-23；修回日期：2018-4-3

編輯/楊倩