浙貝母SO2的滴定法檢測(cè)與本底調(diào)查

宗侃侃，朱瑜萍，孫彩霞，戴芬，趙學(xué)平

(1.磐安縣中藥材研究所，浙江 磐安 322300； 2.浙江經(jīng)貿(mào)職業(yè)技術(shù)學(xué)院，浙江 杭州 310018；3.浙江省農(nóng)業(yè)科學(xué)院 農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究所，浙江 杭州 310021)

浙貝母為百合科植物浙貝母FritillariathunbergiiMig.的干燥鱗莖，具有清熱散結(jié)、化痰止咳等功效，常用于治療風(fēng)熱犯肺、痰火咳嗽、肺癰、乳癰、瘡毒等[1]，是著名的浙八味之一。在中藥材領(lǐng)域，硫磺熏蒸加工方法作為傳統(tǒng)的中藥材保護(hù)方法，起初用于少數(shù)富含淀粉、不易干燥的中藥材，但由于其能使藥材色澤美觀，延長貯藏期，提高藥材水分含量而獲得更大利益，故硫磺熏蒸在中藥材的初加工和貯存環(huán)節(jié)得到廣泛應(yīng)用[2]。硫磺熏蒸會(huì)改變中藥材的藥性和化學(xué)成分，從而影響藥效，甚至危害人體健康。2005年版《浙江省中藥飲片炮制規(guī)范》及2010年版《中國藥典》都已經(jīng)取消了硫磺熏蒸的加工方法，各浙貝母主產(chǎn)區(qū)也先后頒布了在加工中禁止使用硫磺的規(guī)定。根據(jù)2015年版《中國藥典》，山藥等10種中藥材的SO2殘留量不得超過400 mg·kg-1，其余不得超過150 mg·kg-1。浙貝母并不在山藥等10種中藥材之列，即SO2量不得超過150 mg·kg-1[3-4]。

為了解浙貝母主產(chǎn)區(qū)干燥浙貝母SO2的本底含量，建立了滴定法檢測(cè)浙貝母中SO2的方法，并對(duì)各地采集的新鮮浙貝母經(jīng)過干燥后的產(chǎn)品進(jìn)行了檢測(cè)，為了解浙江省各地浙貝母SO2的本底值提供參考數(shù)據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

浙江省浙貝母生產(chǎn)主要集中在磐安縣、縉云縣、東陽市和寧波市海曙區(qū)等4個(gè)市縣(區(qū))，共計(jì)收集35個(gè)樣品，其中磐安縣13個(gè)，縉云縣10個(gè)，東陽市10個(gè)，寧波市海曙區(qū)章水鎮(zhèn)2個(gè)。浙貝母干樣品主要來自生產(chǎn)基地采集后烘干品，農(nóng)戶將浙貝母樣品采收后，清洗去除泥土，使用自備的烘干機(jī)或者送往集中加工點(diǎn)，在60 ℃左右烘干。樣品采集時(shí)間為2017年5—6月。浙貝母干樣采集后用粉碎機(jī)制成粉末分別放入分裝容器中。于4～8 ℃下保存、備用。

過氧化氫、鹽酸、焦亞硫酸鉀-EDTA、蔗糖、氫氧化鈉、碘、淀粉、溴酚藍(lán)均為分析純，99.5%純氮?dú)庥珊贾萘值職怏w公司提供。

1.2 分析方法

參照2015年版《中國藥典》中SO2的檢測(cè)方法(酸蒸餾-碘滴定)。取5.0 g干浙貝母粉末，精密稱定，置兩頸圓底燒瓶中，加水300 mL，連接分液漏斗，從分液漏斗加入 6 mol·L-1鹽酸溶液10 mL，并導(dǎo)入氮?dú)?流速100 mL·min-1)至瓶底，連接回流冷凝管，在冷凝管的上端連接導(dǎo)氣管，將導(dǎo)氣管插入50 mL 起泡器底部。起泡器內(nèi)加3 mL過氧化氫溶液和淀粉指示液0.1 mL作為吸收液，滴加氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液使過氧化氫溶液呈中性。加熱兩頸圓底燒瓶內(nèi)的溶液至沸，并保持微沸約30 min，控制氮?dú)獾牧魉贋槊棵氘a(chǎn)生1～2個(gè)氣泡。采用0.01 mol·L-1氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定起泡器內(nèi)的溶液，至藍(lán)色或藍(lán)紫色持續(xù)20 s不褪色。

W1=32×103cV/m。

式中：W1為試樣SO2含量；c為氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度；V為滴定耗用氫氧化鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積；32為每摩爾氫氧化鈉相當(dāng)于SO2的質(zhì)量數(shù)值；m為試樣質(zhì)量；103為g與kg的換算系數(shù)。

2 結(jié)果與分析

從表1可以看出，在35個(gè)浙貝母樣品中相對(duì)偏差最大值為5.0%，說明該檢測(cè)方法的準(zhǔn)確性較好。

表1 各來源浙貝母樣品中SO2的檢測(cè)情況

注：-表示未檢出。

磐安采集的13個(gè)樣品中，SO2最低值為22 mg·kg-1，最大值為165 mg·kg-1。SO2超過150 mg·kg-1的樣品有3個(gè)，樣品超標(biāo)率為23.1%，含量超標(biāo)分別為4.6%、4.6%和10.0%。縉云采集的10個(gè)樣品中，2個(gè)樣品SO2未檢出，檢出最大值樣品為149 mg·kg-1，均未超過150 mg·kg-1的限量標(biāo)準(zhǔn)。東陽采集的10個(gè)樣品中，SO2最低值為16 mg·kg-1，最大值為92 mg·kg-1，均未超標(biāo)。海曙采集的2個(gè)樣品，SO2含量分別為47和70 mg·kg-1，均未超標(biāo)。

總體來看，浙江省浙貝母生產(chǎn)基地SO2本底含量較低，最大含量超標(biāo)率為10.0%，91.4%樣品的本底值符合《中國藥典》(2015年版)的規(guī)定。

3 討論

3.1 SO2檢測(cè)方法的改進(jìn)

目前，SO2常用測(cè)定方法有滴定法[5]、比色法[6]、離子色譜法[7]和頂空氣相色譜法[8]等。其中，滴定法因操作簡單且測(cè)定成本低廉一直被視為經(jīng)典方法沿用至今，主要有直接碘量法、酸蒸餾-碘量法和酸蒸餾-堿滴定法3種。《中國藥典》收錄酸蒸餾-碘量法為SO2測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)方法。酸蒸餾-碘量法的主要原理是氧化還原，將待測(cè)產(chǎn)品中的硫元素經(jīng)過蒸煮氧化，氮?dú)鈳С霾⑽铡z測(cè)結(jié)果以指示劑的變色為終點(diǎn)。該方法受樣品蒸餾時(shí)間、氮?dú)馔ㄈ肓?、吸收液吸收量、滴定終點(diǎn)判斷等因素的控制。在本實(shí)驗(yàn)中，樣品在圓底燒瓶的蒸餾時(shí)間設(shè)置為30 min，起泡器內(nèi)加3 mL過氧化氫溶液作為吸收液，延長蒸餾時(shí)間可以增加待測(cè)產(chǎn)品中硫元素的蒸出，增加吸收液體積可以保證蒸出的SO2吸收完全，但同時(shí)會(huì)降低檢測(cè)工作的效率，增加檢測(cè)過程中的試劑消耗和試驗(yàn)誤差。據(jù)此提出以下建議：1)圓底燒瓶中樣品的蒸餾時(shí)間不宜太短或者太長，可以根據(jù)樣品的數(shù)量和性質(zhì)設(shè)置30 min左右的蒸餾時(shí)間，待測(cè)樣品預(yù)處理研磨成粉末狀有利于SO2的氧化帶出；2)起泡器選擇底面積比較小的，增加吸收液高度，以減少SO2的逸出；3)對(duì)于SO2含量低的樣品，可適當(dāng)降低氫氧化鈉溶液的濃度，以提高檢出靈敏度[9]。

3.2 國內(nèi)外中藥材SO2限量標(biāo)準(zhǔn)的對(duì)比

針對(duì)目前SO2殘留問題，國際上已經(jīng)在食品和中藥材領(lǐng)域制定了相關(guān)的限量標(biāo)準(zhǔn)[10]，如國際食品法典委員會(huì)(CAC)的《General Standard For Food Additives Codex Stan 192—1995》，我國《食品添加劑使用標(biāo)準(zhǔn)》(GB 2760—2014)也規(guī)定了SO2的限量標(biāo)準(zhǔn)(表2)。

表2 國內(nèi)外中藥材及相關(guān)產(chǎn)品SO2限量的比較

相對(duì)于普通食品，現(xiàn)有國內(nèi)外法規(guī)規(guī)定藥材中SO2的限量比較嚴(yán)格，CAC規(guī)定，冷凍水果和干蔬菜中SO2的限量為500 mg·kg-1，而中藥材則為150 mg·kg-1。GB 2760—2014規(guī)定，干制蔬菜SO2的限量為400 mg·kg-1，蜜餞涼果SO2的限量為350 mg·kg-1。

3.3 制定浙貝母SO2限量標(biāo)準(zhǔn)的建議

SO2屬于低毒物質(zhì)，相比較于黃曲霉毒素和農(nóng)藥殘留而言，對(duì)人體健康的危害性不是特別大。僅有特殊人群需要在一定的時(shí)期內(nèi)定量服用中藥材，與普通食品的膳食暴露有很大區(qū)別。因此，從風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估角度，中藥材中SO2的限量不應(yīng)比普通食品的嚴(yán)格。本實(shí)驗(yàn)僅采集了2017年度規(guī)模型浙貝母生產(chǎn)基地的樣品進(jìn)行檢測(cè)，目前，我國對(duì)浙貝母中SO2的本底含量沒有常規(guī)的監(jiān)測(cè)，建議在連續(xù)3～5年常規(guī)監(jiān)測(cè)和風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估的基礎(chǔ)上，制定合理的SO2限量標(biāo)準(zhǔn)。