筍殼魚(yú)暴發(fā)傳染性脾腎壞死病毒病的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估

■ 文｜東莞市長(zhǎng)安鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心 陳智光 麥耀寶

東莞市水生動(dòng)物防疫檢疫站 李本旺 黃永強(qiáng) 陳灼均

筍殼魚(yú)暴發(fā)傳染性脾腎壞死病毒病的病原為傳染性脾腎壞死病毒（Infectious spleen and kidney necrosis virus，ISKNV）。自從1997年首次從鱖魚(yú)上發(fā)現(xiàn)報(bào)道 ISKNV以來(lái)，該病已經(jīng)在中國(guó)大部分的地方被確診，同時(shí)在筍殼魚(yú)、烏鱧、加州鱸等魚(yú)類(lèi)上都發(fā)現(xiàn)了該病，對(duì)我國(guó)水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)造成了巨大的損失。本文主要分析評(píng)估 ISKNV在筍殼魚(yú)上感染暴發(fā)的風(fēng)險(xiǎn)。

1.危害描述

1.1 病原

ISKNV屬于虹彩病毒科（Iridoviridae），是腫大病毒屬（Megalocytivirus）的代表種。虹彩病毒科是一類(lèi)直徑為 120～300nm，呈正二十面體對(duì)稱(chēng)結(jié)構(gòu)，遺傳物質(zhì)為直線雙鏈DNA（大約 150～280kbp）的病毒。虹彩病毒可以感染昆蟲(chóng)、兩棲類(lèi)、魚(yú)類(lèi)等無(wú)脊椎動(dòng)物和脊椎動(dòng)物。虹彩病毒粒子一般包括囊膜、衣殼和核心三個(gè)部分。付小哲等人通過(guò)對(duì) 33株不同宿主來(lái)源的腫大病毒的外膜蛋白進(jìn)行同源性比對(duì)，發(fā)現(xiàn)腫大病毒可以分為 3個(gè)型，I型主要感染海水魚(yú)，II型主要感染淡水魚(yú)，III型主要感染鲆鰈類(lèi)，ISKNV則分為Ⅰ型和Ⅱ型 2種基因型。

1.2 易感動(dòng)物

ISKNV的宿主范圍廣泛，可以感染全世界范圍內(nèi)鱸形目、鳉形目、鯡形目、鲀形目、燈籠魚(yú)目、鯔形目和鰈形目等 50多種海水和淡水魚(yú)類(lèi)。近年來(lái)，在日本、韓國(guó)、新加坡等亞洲國(guó)家，甚至在美國(guó)、德國(guó)、澳大利亞和加拿大等地的觀賞魚(yú)和養(yǎng)殖魚(yú)類(lèi)中陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了ISKNV的感染案例。

1.3 流行病學(xué)

1.3.1 歷史。1997年，吳淑勤等首次在患病的鱖魚(yú)中發(fā)現(xiàn)了傳染性脾腎壞死病毒病。1998年，何建國(guó)等證實(shí)了該病原為 ISKNV。國(guó)內(nèi)最早關(guān)于筍殼魚(yú) ISKNV的報(bào)道是 2009年10月在順德一養(yǎng)殖場(chǎng)暴發(fā)了該病。

1.3.2 臨床癥狀和發(fā)病季節(jié)。感染 ISKNV的筍殼魚(yú)，主要表現(xiàn)為從池塘底層游至水面、游泳失衡、反應(yīng)遲鈍、腹部膨大等；解剖可見(jiàn)脾臟和腎臟腫大，有出血斑點(diǎn)。ISKNV的致病性很強(qiáng)，在水溫20～32℃時(shí)，均可引起魚(yú)發(fā)病，水溫 28～30℃時(shí)致病性最強(qiáng)。試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，在水溫 28℃時(shí)，經(jīng)過(guò)浸泡或注射感染 ISKNV的魚(yú)7～10d后的死亡率可達(dá)100%。

1.3.3 傳播方式。ISKNV主要通過(guò)水平傳播，一方面通過(guò)養(yǎng)殖水體，另一方面通過(guò)魚(yú)體（包括冰鮮）攜帶。此外，在魚(yú)卵上也可檢測(cè)到 ISKNV，可能可以進(jìn)行垂直傳播，但尚未有研究報(bào)道。

1.3.4 危害。筍殼魚(yú)暴發(fā) ISKNV病的危害嚴(yán)重，死亡率最高可達(dá) 100%。東莞市這幾年雖然沒(méi)有大規(guī)模暴發(fā) ISKNV病，但是也出現(xiàn)了個(gè)別養(yǎng)殖場(chǎng)全軍覆沒(méi)的情況。2016-2017年，東莞市某養(yǎng)殖場(chǎng)因?yàn)橥段沽烁腥?ISKNV的鯪魚(yú)，導(dǎo)致整個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的筍殼魚(yú)陸續(xù)死亡。在東莞的周邊地區(qū)，如珠海、佛山等地，每年都有因?yàn)楸┌l(fā)ISKNV病而死亡慘重的案例。

1.4 檢測(cè)

ISKNV病原檢測(cè)是診斷該病害的重要手段，早期的病毒檢測(cè)主要通過(guò)組織學(xué)、細(xì)胞分離病原、電鏡觀察等。隨著人們對(duì)傳染性脾腎壞死病毒病的重視和分子生物技術(shù)的發(fā)展，近年來(lái)建立了多種 ISKNV的檢測(cè)方法。如 PCR檢測(cè)方法、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA標(biāo)記檢測(cè)法、巢式PCR檢測(cè)法、熒光定量PCR快速檢測(cè)方法、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)檢測(cè)方法、ELISA檢測(cè)方法等。

表1 不同風(fēng)險(xiǎn)因子的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果

1.5 防治

目前該病沒(méi)有可行的治療方法。國(guó)內(nèi)大學(xué)和研究機(jī)構(gòu)正在研究鱖魚(yú) ISKNV的疫苗，目前處于中試階段。但是還未見(jiàn)有關(guān)筍殼魚(yú)ISKNV疫苗的相關(guān)研究報(bào)道。

2.暴露評(píng)估

2.1 風(fēng)險(xiǎn)識(shí)別

本項(xiàng)目評(píng)估的是筍殼魚(yú)中 ISKNV的暴發(fā)風(fēng)險(xiǎn)，因此需要確定可能引入、留存與傳播 ISKNV的各種風(fēng)險(xiǎn)因素，并逐一評(píng)估這些因素的風(fēng)險(xiǎn)大小。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道和實(shí)地調(diào)查，推測(cè)可能導(dǎo)致引入、留存與傳播 ISKNV的風(fēng)險(xiǎn)因素包括：苗種、敏感動(dòng)物、餌料、污染的水、包裝物、運(yùn)載工具、操作工具和接觸的人員等。

2.2 引入風(fēng)險(xiǎn)

本項(xiàng)目從筍殼魚(yú)苗種場(chǎng)的成魚(yú)和苗種上都檢測(cè)到了ISKNV，說(shuō)明苗種可以攜帶ISKNV。因此，苗種引入病原的風(fēng)險(xiǎn)非常高。

草魚(yú)可以攜帶 ISKNV，但是不發(fā)病，鱖魚(yú)食用這些感染的草魚(yú)后發(fā)病死亡。到目前為止，筍殼魚(yú)的餌料主要以活餌料或者冰鮮為主，養(yǎng)殖戶(hù)使用的冰鮮或活餌料來(lái)源不明也沒(méi)有經(jīng)過(guò)病原檢測(cè)，引入ISKNV的風(fēng)險(xiǎn)很大。

水源也是一個(gè)引入 ISKNV的重要風(fēng)險(xiǎn)，通過(guò)實(shí)地調(diào)查，東莞市的筍殼魚(yú)養(yǎng)殖場(chǎng)除了洪梅地區(qū)比較集中，其他都比較分散。養(yǎng)殖戶(hù)在水源的引入方面的意識(shí)還比較高，雖然沒(méi)有進(jìn)行檢測(cè)，但是不會(huì)在其他魚(yú)塘發(fā)病的時(shí)候抽水到自己的養(yǎng)殖場(chǎng)?？傮w來(lái)說(shuō)東莞市從水源引入ISKNV的風(fēng)險(xiǎn)一般。

在包裝物、運(yùn)載工具、操作工具和人員傳播途徑上，基本不會(huì)在不同養(yǎng)殖場(chǎng)間交叉使用工具，也不會(huì)在患病養(yǎng)殖場(chǎng)直接進(jìn)行人員的交叉作業(yè)。但是在同一個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)的不同魚(yú)塘之間，這種交叉感染的風(fēng)險(xiǎn)還是比較大。

2.3 留存風(fēng)險(xiǎn)

檢測(cè)結(jié)果表明，ISKNV的攜帶率非常高，但是發(fā)病并不是非常嚴(yán)重。ISKNV引入筍殼魚(yú)養(yǎng)殖場(chǎng)后，長(zhǎng)期處于潛伏感染的狀態(tài)，這會(huì)使養(yǎng)殖戶(hù)麻痹大意，疏于防范。如果某個(gè)養(yǎng)殖場(chǎng)因?yàn)楦腥綢SKNV導(dǎo)致大規(guī)模死亡，那么他在進(jìn)行下一次養(yǎng)殖時(shí)就會(huì)進(jìn)行徹底的清塘消毒，以殺滅病原。但是只是攜帶 ISKNV的養(yǎng)殖場(chǎng)，在一個(gè)養(yǎng)殖周期結(jié)束后，很多沒(méi)有進(jìn)行徹底的消毒，導(dǎo)致病原長(zhǎng)期存留在養(yǎng)殖魚(yú)塘中的風(fēng)險(xiǎn)增加。

2.4 傳播風(fēng)險(xiǎn)

流行病學(xué)調(diào)查結(jié)果顯示，筍殼魚(yú)苗種標(biāo)粗后，主要銷(xiāo)往其他地區(qū)進(jìn)行成魚(yú)養(yǎng)殖，但是這些賣(mài)出的魚(yú)苗并沒(méi)有經(jīng)過(guò)檢測(cè)，可能導(dǎo)致病原傳播。發(fā)病魚(yú)塘的污水通常都沒(méi)有經(jīng)過(guò)處理就直接排放到河溝，極易將病原傳給其他養(yǎng)殖場(chǎng)。

3.風(fēng)險(xiǎn)描述

通過(guò)對(duì)上述幾種不同情況分別進(jìn)行風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估后發(fā)現(xiàn)，苗種、冰凍的易感魚(yú)類(lèi)和用做鮮活餌料的易感魚(yú)類(lèi)具有較高的傳入和發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)（表1）。

4.風(fēng)險(xiǎn)管理

4.1 筍殼魚(yú)

堅(jiān)決不從疫區(qū)引進(jìn)親本、魚(yú)苗、魚(yú)種和魚(yú)卵。對(duì)引入的筍殼魚(yú)進(jìn)行ISKNV病原檢測(cè)。收集死亡的筍殼魚(yú)進(jìn)行病原檢測(cè)，確診發(fā)病原因，防止疫情擴(kuò)散。研發(fā)筍殼魚(yú)IKSNV疫苗，進(jìn)行免疫預(yù)防。

4.2 餌料

餌料包括冰鮮和鮮活的易感動(dòng)物，對(duì)投入的餌料要進(jìn)行 ISKNV病原檢測(cè)，杜絕從疫區(qū)購(gòu)買(mǎi)這些易感動(dòng)物。

4.3 水源、工具和藥物等

水源、工具和藥物等本身攜帶的病原數(shù)量很少，具有不確定性，因此更多的是要從管理上進(jìn)行控制。不從疫區(qū)或者發(fā)病魚(yú)塘引入水源，對(duì)運(yùn)輸用水、工具和包裝等采用常規(guī)消毒的強(qiáng)制措施，這樣就可將輸入 ISKNV的可能性降低到可以接受的水平。

5.結(jié)論

風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估結(jié)果表明，ISKNV感染是一種對(duì)我國(guó)筍殼魚(yú)有嚴(yán)重危害的一種病毒病。綜合風(fēng)險(xiǎn)分析認(rèn)為，傳入 ISKNV的主要威脅是來(lái)自疫區(qū)的活的筍殼魚(yú)，其次是鮮活易感動(dòng)物和冰鮮易感動(dòng)物。因此，首先要杜絕從疫區(qū)引入筍殼魚(yú)和易感動(dòng)物，其次對(duì)于引進(jìn)和購(gòu)買(mǎi)的筍殼魚(yú)和餌料要進(jìn)行檢疫。若發(fā)生 ISKNV病毒病要及時(shí)進(jìn)行隔離處理，防止疫情擴(kuò)散。對(duì)水源、工具等需要進(jìn)行強(qiáng)制常規(guī)消毒。加強(qiáng)培訓(xùn)，提高養(yǎng)殖戶(hù)的風(fēng)險(xiǎn)防控意識(shí)。