黑刺菝葜提取物對黏蟲的拒食活性

王 熠，張存莉，楊 春，紀(jì) 薇

（1.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院，山西 太谷 030801；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)化學(xué)與藥學(xué)院，陜西 楊凌 712100；3.山西農(nóng)業(yè)大學(xué)園藝學(xué)院，山西 太谷 030801）

植物源農(nóng)藥是一種環(huán)境友好型農(nóng)藥，具有低毒、高選擇性、低殘留性、低抗性、無污染等優(yōu)點，是有害生物綜合治理的重要手段[1-3]。而從植物中發(fā)現(xiàn)拒食活性物質(zhì)一直都是植物源殺蟲劑重要的研究方向和熱點，它是通過拒食方式防止害蟲侵?jǐn)_，以達到保護植物的作用[4]，其作用機理與傳統(tǒng)殺蟲劑不同，是一種理想的植物源農(nóng)藥[5]。

黑刺菝葜 （Smilax scobinicaulis（C.H.）Wright），為百合科菝契屬植物，廣泛分布于我國的山西、陜西、四川等地[6]，在我國作為傳統(tǒng)中草藥用于治療關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)、腰痛等疾病[7]。有文獻報道，該植物具有抗菌[8]和細(xì)胞毒活性[9-10]，但沒有關(guān)于其殺蟲活性的研究。

黏蟲（Mythimna separata（Walker）），是世界性的重要禾谷類害蟲[11]，在我國特別是對山西省農(nóng)作物生產(chǎn)造成過巨大的損失[12-14]。

本試驗以黏蟲作為供試害蟲，采用小葉碟添加法，研究黑刺菝葜對3齡黏蟲幼蟲的拒食作用，旨在初步評價中藥黑刺菝葜在殺蟲方面的應(yīng)用價值，為進一步發(fā)掘和開發(fā)該中藥資源提供理論依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 供試材料

1.1.1 植物樣品 黑刺菝葜全株采自太白山，采集后洗凈，分成根、莖、葉3個部分置于室內(nèi)陰干，粉碎后放入4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.1.2 供試?yán)ハx 供試黏蟲（Mythimna separata）蟲源引種自西北農(nóng)林科技大學(xué)，喂養(yǎng)于山西農(nóng)業(yè)大學(xué)實驗室人工氣候箱內(nèi)，在25℃，60%～80%RH，L∶D＝12 h∶12 h的條件下經(jīng)過室內(nèi)多代飼養(yǎng)。試驗時挑取生長發(fā)育一致、健壯活潑的3齡幼蟲[15-16]。

1.1.3 試劑和主要儀器 化學(xué)試劑為分析純的丙酮和石油醚。主要儀器為MGC-450HP智能型人工氣候箱、YCD-209亞都加濕器和SI-114分析天平。

1.2 方法

1.2.1 植物樣品的制備 取一定量黑刺菝葜根、莖、葉的干粉，在室溫下用70%乙醇提取3次，收集提取液，濃縮得其乙醇浸膏；將其懸浮于水中，加入石油醚萃取3次，合并提取液，濃縮得黑刺菝葜根、莖、葉的石油醚浸膏。將黑刺菝葜各部位石油醚浸膏用丙酮溶解制得所需濃度的供試藥液，放入4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2.2 拒食活性的測定 采用小葉碟添加法[17-19]，每處理重復(fù)3次，每重復(fù)10頭試蟲，以丙酮處理作為對照。取一定數(shù)量的面積為1 cm×1 cm的新鮮玉米葉蝶，在相應(yīng)濃度的供試藥液中浸泡3～5 s后飼喂饑餓3 h的3齡黏蟲幼蟲，定期補喂帶毒葉片，記錄幼蟲取食葉面積，共飼養(yǎng)48 h，按照下列公式計算拒食率，并求拒食中濃度（AFC50）。

2 結(jié)果與分析

2.1 黑刺菝葜不同部位石油醚提取物對黏蟲的拒食作用

從表1可以看出，黑刺菝葜不同部位石油醚提取物對3齡黏蟲具有一定的拒食作用，其中，根的石油醚提取物拒食活性最好，24，48 h的AFC50值分別達到9.41，5.22 mg/mL；葉的石油醚提取物的拒食活性最差，24，48 h的AFC50值分別為10.34，7.86 mg/mL。

表1 黑刺菝葜不同部位石油醚提取物對3齡黏蟲的拒食作用

2.2 在20 mg/mL質(zhì)量濃度下黑刺菝葜不同部位石油醚提取物的拒食作用

表2 在20 mg/mL下黑刺菝葜不同部位石油醚提取物的拒食作用

在20 mg/mL質(zhì)量濃度下，黑刺菝葜不同部位石油醚提取物的拒食作用如表2所示。結(jié)果顯示，在20 mg/mL質(zhì)量濃度下，黑刺菝契的根、莖、葉石油醚提取物在不同處理時間下拒食活性差異顯著，且其拒食率普遍超過50%；隨著處理時間的延長，根石油醚提取物的拒食活性顯著升高，而莖和葉提取物的拒食活性的變化無規(guī)律性。

3 結(jié)論與討論

黑刺菝葜不同部位石油醚提取物對3齡黏蟲具有一定的拒食作用，其AFC50值范圍在5.22～10.34 mg/mL。拒食活性最好的是根的石油醚提取物，其 24，48 h 的 AFC50值分別為 9.41，5.22 mg/mL。莖石油醚提取物的AFC50值與根的比較接近，但在48 h時其AFC50值明顯高于根石油醚提取物。在24，48 h葉石油醚提取物的AFC50值顯著高于根和莖的提取物，特別是48 h時其差異性更大。在24，48 h下，根、莖和葉石油醚提取物AFC50值變化趨勢相同，24 h的AFC50值均明顯高于48 h。

在20 mg/mL和不同處理時間下，根石油醚提取物的拒食活性隨著處理時間的延長而顯著升高，而莖和葉提取物的拒食活性的變化無規(guī)律性，且不同處理時間下拒食活性差異較大。

綜上分析認(rèn)為，我國傳統(tǒng)中藥黑刺菝葜對黏蟲具有一定殺蟲活性，由于只進行了拒食活性這一個方面的研究，限制了對黑刺菝葜殺蟲活性的潛在價值的挖掘。為了更全面評估和更好地挖掘黑刺菝葜殺蟲活性的潛在價值，今后還應(yīng)進行黑刺菝葜對黏蟲的其他作用方式、作用機制以及有效殺蟲成分的研究。