關于微柱凝膠法和聚凝胺法用于交叉配血中的臨床分析

張明勛

（山東省菏澤市立醫(yī)院輸血科，山東 菏澤 274000）

通常情況下，臨床輸血之前均要開展交叉配血試驗，以此來了解患者血液和所輸入的血液是否相合[1]。進行輸血操作之前，必須確保能夠將IgM（完全抗體）和IgG（不完全抗體）同時檢測出來，以此來避免溶血性輸血反應出現(xiàn)。我國存在有多種多樣的配血方法，包括抗人球蛋白法、聚凝胺法、微柱凝膠法等，雖然抗人球蛋白法具有較高的可靠性與準確性，但是操作需要耗費較長時間，較為繁瑣，雖然臨床上將其作為金標準，但是卻難以將其在臨床上進行常規(guī)應用[2-4]。近年來，隨著醫(yī)學技術水平的不斷提高，微柱凝膠法已經被廣泛應用于臨床輸血中，微柱凝膠法和聚凝胺法均存在有各自的優(yōu)點與缺點[5-6]。在臨床輸血中靈活性的聯(lián)合應用這兩種檢測方式，能夠有效避免交叉配血過程中出現(xiàn)假陽性與假陰性結果[7]。本研究特地選取我院2013年1月至2017年8月進行交叉配血的200例患者為研究對象，交叉配血過程中分別應用微柱凝膠法和聚凝胺法，并對其臨床應用效果進行了對比探究，總結如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料：200例存在系統(tǒng)性紅斑狼瘡、系統(tǒng)性血管炎、自身免疫性溶血性貧血等自身免疫性疾病或者需要進行反復、大量輸血的患者于2013年1月至2017年8月在我院交叉輸血，患者平均年齡（22.58±5.12）歲，男性150例，女性50例，其中一共有20例不合格輸血標本。

1.2 試劑與儀器：孵育器（瑞士達亞美公司提供）、專用離心機（瑞士達亞美公司提供）、低離子溶液（瑞士達亞美公司提供）、聚凝胺試劑（珠海貝索生物技術有限公司提供）、離心機（臺灣貝索公司提供）、Liss/Coombs（微柱凝膠交叉配血卡，瑞士達亞美公司提供）、篩查紅細胞由（上海血液生物醫(yī)藥有限責任公司提供）。

1.3 方法：所有檢測系統(tǒng)均進行室內質控監(jiān)測，確定其在控之后，將實際說明書的操作規(guī)程作為依據，然后再嚴格開展相關操作，分別采用微柱凝膠法和聚凝胺法對每例臨床配血標本進行交叉配血實驗，除此之外，還要對每例標本做抗體篩查實驗。

微柱凝膠法：依次標號微柱凝膠試劑卡的6個凝膠微管，然后再1～4號管中分別加入患者0.5%的紅細胞懸液，將供血者的血清分別加入5、6號凝膠微管中，采用離心機對其進行5 min離心處理，對結果進性觀察，凝膠以上為陽性，沉積在底部誒陰性。

聚凝胺法：取患者0.5 mL血清，將1滴供血者3%紅細胞懸液加入，在室溫狀態(tài)下進行1 min靜置之后，將聚凝胺試劑2滴滴入，均勻混合之后保持15 s靜置，進行10 s離心處理，將上清液去除，對標本出現(xiàn)的紅細胞聚合反應進行仔細觀察，了解其是否有聚集現(xiàn)象出現(xiàn)，如有出現(xiàn)，則要繼續(xù)做1次，將懸浮液加入，均勻混合之后，如果由聚凝胺引發(fā)非免疫性聚集反應，那么便會在1 min之內散開，在顯微鏡下觀察凝集反應。

1.4 統(tǒng)計學分析：數(shù)據納入SPSS20.0統(tǒng)計學軟件，（%）示計數(shù)資料，行卡方檢驗，以P＜0.05表示差異明顯。

2 結 果

2.1 兩種方式測定結果對比：我院收集的200例血液標本中，一共有20例不合格標本，采用微柱凝膠法對其進行檢測后，檢測出陽性標本12例，陽性率為75%，采用聚凝胺法一共檢測出10例假陽性標本，假陽性率為62.50%，通過對比分析可知，微柱凝膠假陽性率為75.00%，相較于聚凝胺法的62.5%略微高，但差異不存在統(tǒng)計學意義，P＞0.05，見表1。

表1 兩種方式測定結果對比

2.2 不合格交叉配血標本假陽性結果分析：微柱凝膠法與聚凝胺法假陽性結果出現(xiàn)的主要影響因素包括纖維蛋白、血液病、腫瘤、冷凝集素、自身免疫病、球蛋白異常等，其中自身免疫病的構成比最高，見表2。

表2 不合格交叉配血標本假陽性結果分析[n（%）]

3 討 論

聚凝胺溶解之后能夠產生眾多正電荷，屬于高價陽離子季胺鹽多聚物的一種，能夠促使紅細胞表面負電荷得到有效中和，減少紅細胞之間存在的間距，促使正常紅細胞出現(xiàn)非特異性凝聚現(xiàn)象，并且該現(xiàn)象存在有一定的可逆性，在出現(xiàn)抗體致敏紅細胞的情況下，則會被聚凝胺所凝集[9-10]。一般而言，如果單從外表上對凝集和凝聚進行區(qū)分，則存在有較大難度，但是如果將假凝集清除液（含枸椽酸鈉）加入，那么聚凝胺上的正電荷和椽枸酸根的負電荷能夠進行有效中和，重懸之后，這種凝聚現(xiàn)象便會完全消失，但是特異性抗體和抗原結合產生的凝集則不會消失[11-13]。我國在交叉配血中通常會采用聚凝胺法，究其原因，這主要是因為雖然聚凝胺對Kell系統(tǒng)不具備高度敏感性，但是對Rh系統(tǒng)具有較高敏感性，我國最常見的溶血性輸血反應為Rh系統(tǒng)所引發(fā)的遲發(fā)性溶血性輸血反應。我國人們基本上屬于K抗原陰性，所以在免疫之后不會有抗K產生[14-17]。

微柱凝膠法則是一種以免疫化學抗原抗體特異反應、離心技術、生物化學凝膠過濾技術為基礎的監(jiān)測方式，紅細胞在血型抗原抗體進行特異性結合之后，便會有凝集現(xiàn)象出現(xiàn)，對其進行離心處理時，凝集塊便難以從凝膠間隙通過，在凝膠上層殘留，沒有結合的紅細胞則能夠從凝膠間隙通過，在管尖底部沉積，主要表現(xiàn)為陰性反應[18-20]。

研究顯示，相較于聚凝胺法，微柱凝膠法的靈敏度更高，本研究通過分析得知，微柱凝膠假陽性率為75.00%，相較于聚凝胺法的62.5%略微高，但差異不存在統(tǒng)計學意義，P＞0.05，本研究結果和以上研究結果具有高度相似性。一般情況下，交叉配血試驗有著較高的靈敏度要求，微柱凝膠法屬于最好的檢測方式，醫(yī)院在有條件的情況下，可以在交叉配血中應用該檢測方式，但是該檢測方式還不能將聚凝胺法完全取代。本研究通過分析得知，兩種檢測方式的陽性率對比，差異不存在統(tǒng)計學意義，P＞0.05，單獨討論檢驗技術而言，相較于微柱凝膠法，聚凝胺法能夠更加快捷的將假凝集排除，如果沒有將纖維蛋白原的血清標本完全除去，在凝膠中便會有纖維蛋白形成，對紅細胞沉降進行阻礙，進而促使其在表面或者膠中漂浮，采用微柱凝膠法只能將凝集現(xiàn)象觀察到，需要對血標本進行重新離心處理之后進行反復性實驗。而聚凝胺法則能夠在玻片上放置試管中反應物，在鏡下對其進行檢查，將形態(tài)學作為依據，對假凝集現(xiàn)象進行鑒別。在血漿蛋白出現(xiàn)異常的情況俠，采用兩種檢測方式進行檢測時，均會有主側凝集現(xiàn)象出現(xiàn)。采用微柱凝膠法，并且將自身作為對照之后，只能懷疑有蛋白異常現(xiàn)象出現(xiàn)，而采用聚凝胺法之后，可以直接和顯微鏡進行聯(lián)合，以此來對緡錢狀凝集進行觀察。受到冷凝集素干擾的情況下，采用聚凝胺法能夠在水浴箱內進行操作，將干擾排除，而采用微柱凝膠法時，則需要先對RBC進行洗滌，然后才能重新對其進行交叉配血處理。采用聚凝胺法時，在10 min之內便能夠完成整個交叉配血過程，而采用微柱凝膠法進行交叉配血操作時，則需要花費30 min，所以醫(yī)院在進行急診配血操作時，通常會選擇采用聚凝胺法，但是這種檢測方式對操作人員的技術水平具有較高要求。微柱凝膠法則不需要進行洗滌，操作十分簡單，不需要確證試驗陰性結果，在批量檢測中可以對其進行廣泛應用，并且能夠獲得清晰的檢測結果，具有較強的可重復性，標本用量較少，能在較長一段時間內進行保存，具有信息化、標準化、規(guī)范化等諸多優(yōu)點。

綜上所述，為了將交叉配血效率與準確度提高，可以聯(lián)合應用微柱凝膠法與聚凝胺法，以此來為臨床快速提供安全血液。