胡云峰,杜威,魏增宇
(天津科技大學(xué)食品營(yíng)養(yǎng)與安全省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津 300457)
蒜薹(Garlic),又名蒜苗或蒜毫,是抽薹大蒜品種生長(zhǎng)過程中抽出的花莖,花莖長(zhǎng)60~70 cm?;ㄇo頂部有上尖下粗的總苞,總苞內(nèi)有花序,總苞和花序部分總稱為薹苞,花梗部分稱為薹梗。蒜薹鮮脆細(xì)嫩,味道鮮美,是一種優(yōu)質(zhì)高檔蔬菜,其所含營(yíng)養(yǎng)成分較蒜頭更高[1~3]。
果實(shí)采后需要經(jīng)過運(yùn)輸,機(jī)械損傷主要發(fā)生在從果園到市場(chǎng)的運(yùn)輸過程中,運(yùn)輸過程中的振動(dòng)是造成 果蔬機(jī)械損傷的主要原因[4~6]。運(yùn)輸過程中的振動(dòng)脅迫產(chǎn)生的逆境會(huì)導(dǎo)致貨物產(chǎn)生損傷,甚至腐爛,促使其貨架期縮短,帶來嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。目前,國(guó)內(nèi)外學(xué)者[7]對(duì)于水果振動(dòng)損傷的研究多以利用振動(dòng)模型裝置的手段為主,即將果蔬樣品置于振動(dòng)試驗(yàn)臺(tái)上,通過對(duì)相關(guān)振動(dòng)參數(shù)(例如,振動(dòng)加速度、振動(dòng)頻率和振幅等)的設(shè)置來進(jìn)行研究。
目前,對(duì)于振動(dòng)造成果蔬品質(zhì)下降的研究已有很多??稻S民等[8]研究了振動(dòng)加速度和振動(dòng)頻率對(duì)梨的影響,發(fā)現(xiàn)振動(dòng)加速度越大而振動(dòng)頻率越小對(duì)梨的損傷越大;李正國(guó)等[9]研究發(fā)現(xiàn),隨著振動(dòng)強(qiáng)度增加,獼猴桃常溫貯藏條件下果實(shí)軟化速度加快,細(xì)胞膜完整性和細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞程度增加,導(dǎo)致其衰老進(jìn)程加速;曾媛媛等[10]研究了不同等級(jí)道路運(yùn)輸?shù)恼駝?dòng)對(duì)哈密瓜品質(zhì)的影響機(jī)理,發(fā)現(xiàn)三級(jí)公路及二級(jí)公路較高速公路和一級(jí)公路的模擬運(yùn)輸振動(dòng)對(duì)哈密瓜品質(zhì)的影響更為顯著,振動(dòng)加劇了其活性氧代謝進(jìn)程,加速了膜質(zhì)氧化進(jìn)程。但是,振動(dòng)頻率對(duì)蒜薹在貯藏期間的品質(zhì)變化影響的研究未見報(bào)道,因此本文以蒜薹為材料,通過設(shè)計(jì)不同的振動(dòng)處理方式,研究振動(dòng)對(duì)蒜薹在貯藏期間的品質(zhì)變化影響,以期尋找降低蒜薹因運(yùn)輸振動(dòng)造成經(jīng)濟(jì)損失的方法提供一定的理論基礎(chǔ)。
1.1 材料與試劑
新鮮蒜薹采購(gòu)自河南中牟,當(dāng)天運(yùn)輸至天津,入冷庫(kù)備用。選擇成熟度適宜、薹條均勻、無(wú)機(jī)械損傷和無(wú)老化的蒜薹進(jìn)行試驗(yàn)。
PVC保鮮袋,由國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心提供,大小 26.5 cm×23.5 cm,厚度 25 μm。
磷酸氫二鉀(分析純),天津市北辰區(qū)榮宏化工廠;磷酸二氫鉀(分析純),天津市北辰區(qū)榮宏化工廠;硫代巴比妥酸(分析純),天津市河?xùn)|區(qū)紅巖試劑廠;愈創(chuàng)木酚(分析純),天津市海信化工有限公司;過氧化氫(30%)(分析純),天津政成化學(xué)制品有限公司;石英砂(化學(xué)純),天津市瑞金特化學(xué)品有限公司;三氯乙酸(分析純),天津市富宇精細(xì)化工有限公司;氮藍(lán)四唑(生物試劑),Ruibio;核黃素(生物試劑),Ruibio。
1.2 儀器與設(shè)備
ZD-500CB-X-Z型電磁振動(dòng)試驗(yàn)機(jī);PA S/L型氣體檢測(cè)儀,德國(guó)WITT GASETECHNIK公司;FHR-5型果實(shí)硬度計(jì),日本竹村電機(jī)制作所;MP522型精密PH/電導(dǎo)率測(cè)量?jī)x,上海三信儀表廠;TU-1810型紫外分光光度計(jì),北京普析通用儀器有限責(zé)任公司;TGL-16M臺(tái)式高速冷凍離心機(jī),長(zhǎng)沙湘儀離心機(jī)儀器有限公司;MHP-250型智能霉菌培養(yǎng)箱,上海鴻都電子科技有限公司。
1.3 試驗(yàn)方法
1.3.1 試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)
按每組500 g對(duì)蒜薹進(jìn)行分組,并按表1所示方法將蒜薹進(jìn)行各種不同的振動(dòng)處理,所有振動(dòng)處理上下方向加速度為 4.9 m/s2,左右方向 1.96 m/s2,前后方向 1.96 m/s2,振幅為 2.8 cm。
表1 試驗(yàn)方案設(shè)計(jì)Table 1 Design of test scheme
處理結(jié)束后,將蒜薹放置于 20 ℃恒溫設(shè)備中貯藏,每4 d測(cè)定一次指標(biāo),測(cè)定蒜薹在貯藏期間的品質(zhì)變化。
1.3.2 指標(biāo)檢測(cè)
呼吸速率測(cè)定:參考周然等[11]的方法,取適量蒜薹置于密閉玻璃罐,并存放于室溫(20 ℃)下4 h,再用氣體分析測(cè)定儀測(cè)定罐內(nèi)CO2含量變化。
可溶性固形物含量測(cè)定:采用數(shù)顯式糖度儀測(cè)定。
細(xì)胞膜通透性測(cè)定:參考 Zhou等[12]的方法,采用電導(dǎo)率法進(jìn)行測(cè)定。
過氧化物酶(POD)活性測(cè)定:采用愈創(chuàng)木酚法[13]進(jìn)行測(cè)定。
過氧化氫酶(CAT)活性測(cè)定:采用分光光度法[14]進(jìn)行測(cè)定。
超氧化物歧化酶(SOD)活性測(cè)定:采用氮藍(lán)四唑[14]法進(jìn)行測(cè)定。
丙二醛:參考Wang等[15]的方法,采用硫代巴比妥酸法測(cè)定。
1.3.3 數(shù)據(jù)處理方法
采用SPSS 17.0軟件的one-way ANOVA對(duì)重復(fù)性試驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
2.1 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹呼吸速率的影響
呼吸強(qiáng)度是用來衡量呼吸作用強(qiáng)弱的一個(gè)指標(biāo),是評(píng)價(jià)新鮮果蔬貯藏壽命的一個(gè)重要標(biāo)志,是果蔬最主要的生理特性。呼吸強(qiáng)度越大,生命周期越短;呼吸強(qiáng)度越小,生命周期越長(zhǎng),呼吸速率上升是果實(shí)對(duì)脅迫的應(yīng)激反應(yīng),增強(qiáng)自身呼吸速率以抵抗外界逆境條件[16]。如圖1所示,貯藏前期蒜薹呼吸速率逐漸上升,第8 d達(dá)到呼吸峰值,而經(jīng)振動(dòng)處理的蒜薹呼吸速率遠(yuǎn)高于對(duì)照組,這與其他學(xué)者用桃子[17]、楊梅[18]和獼猴桃[19]等的試驗(yàn)結(jié)果一致。其中,與對(duì)照組和處理組1相比,處理組2和處理組3呼吸速率明顯上升,第8 d時(shí),處理組2和處理組3呼吸速率分別為對(duì)照組的1.80倍和2.03倍。之后呼吸速率回落,其中振動(dòng)處理組呼吸速率始終高于對(duì)照組。呼吸速率過高會(huì)促進(jìn)活性氧自由基生成,從而促進(jìn)細(xì)胞膜氧化,破壞細(xì)胞完整性,加速果實(shí)衰老[20]。而其中振動(dòng)處理組之間差異的原因在于其振動(dòng)強(qiáng)度不同,而振動(dòng)強(qiáng)度越大則對(duì)果實(shí)的損傷越大,振動(dòng)強(qiáng)度越大對(duì)果實(shí)的損傷越大[18],使得蒜薹呼吸速率上升。
圖1 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹呼吸速率的影響Fig.1 The vibration treatment on respiration rate effects of garlic shoot
2.2 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹可溶性固形物含量的影響
圖2 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹可溶性固形物含量的影響Fig.2 Effects of vibration on garlic shoot soluble solids content
可溶性固形物含量能直接反應(yīng)果蔬的成熟程度和品質(zhì)狀況。果蔬采后由于自身消耗和淀粉酶活性等原因,可溶性固形物含量呈現(xiàn)上升或下降等不同趨勢(shì)。一般來說,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),機(jī)體逐漸衰老,可溶性固形物含量都會(huì)降低[21]。如圖2所示,蒜薹貯藏期間可溶性固形物含量呈先上升后下降趨勢(shì);與對(duì)照組相比,振動(dòng)處理組可溶性固形物含量低,且隨著振動(dòng)強(qiáng)度增加,可溶性固形物含量明顯降低。在貯藏至第16 d時(shí),處理組1,處理組2和處理組3可溶性固形物含量分別為對(duì)照組的97.7%,95.4%和89.6%,說明振動(dòng)會(huì)加速蒜薹可溶性固形物含量的減少。
2.3 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹過氧化物酶(POD)活性的影響
圖3 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹過氧化物酶活性的影響Fig.3 Effect of vibration treatment on the peroxidase activity of garlic shoot
過氧化物酶(POD)是活性較高的適應(yīng)性酶,能夠反映植物生長(zhǎng)發(fā)育的特性、體內(nèi)代謝狀況以及對(duì)外界環(huán)境的適應(yīng)性。逆境脅迫能誘導(dǎo)植物組織中過氧化物酶活性升高,這是植物對(duì)所有逆境脅迫的共同響應(yīng)[22]。如圖3所示,在貯藏過程中,蒜薹過氧化物酶活性先上升后下降,與對(duì)照組相比,經(jīng)振動(dòng)處理的蒜薹過氧化物酶活性上升速度加快,在第8 d達(dá)到峰值,處理組1,處理組2和處理組3過氧化物酶活性分別為對(duì)照組的1.12倍,1.46倍和1.88倍,其中處理組2和處理組3顯著高于對(duì)照組,且差異顯著(p<0.05),這是由于振動(dòng)處理促使蒜薹為抵御逆境而導(dǎo)致過氧化物酶活性升高,8 d后其活性降低,表現(xiàn)出對(duì)環(huán)境的適應(yīng),這與應(yīng)鐵進(jìn)等[17]研究結(jié)果一致,其中振動(dòng)處理組過氧化物酶活性始終高于對(duì)照組,說明振動(dòng)處理促進(jìn)蒜薹過氧化物酶活性的升高,加快蒜薹品質(zhì)的劣變。
2.4 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹超氧化物歧化酶(SOD)活性的影響
圖4 振動(dòng)處理對(duì)對(duì)蒜薹超氧化物歧化酶活性的影響Fig.4 Effect of vibration treatment on superoxide dismutase activity of garlic shoot
超氧化物歧化酶(SOD)在植物衰老過程中清除組織中的活性氧,維持活性氧的平衡,保護(hù)膜結(jié)構(gòu),因而能延緩衰老;果實(shí)衰老時(shí) SOD活性下降,意味著體內(nèi)清除活性氧能力的下降[23]。由圖4所示,隨著貯藏時(shí)間的逐漸增加,超氧化物歧化酶也呈現(xiàn)出先逐漸上升然后緩慢下降的趨勢(shì),其活性在第4 d達(dá)到峰值,處理組1,處理組2和處理組3過氧化物酶活性分別為對(duì)照組的1.02倍,1.04倍和1.07倍,其中各個(gè)試驗(yàn)組的 SOD活性顯著高于對(duì)照組,且差異顯著(p<0.05),這說明振動(dòng)脅迫使得果蔬組織產(chǎn)生了一系列抵御外界逆境的應(yīng)激反應(yīng),但是在貯藏后期,由于振動(dòng)損傷的進(jìn)一步加劇,果蔬細(xì)胞逐漸衰老,使得SOD的活性逐漸下降。在整個(gè)貯存的過程中,對(duì)照組的 SOD活性顯著低于各個(gè)振動(dòng)處理組,表明振動(dòng)脅迫使得 SOD的活性不斷上升,使得蒜薹的品質(zhì)在貯藏期間不斷惡化。
2.5 振動(dòng)處理對(duì)過氧化氫酶(CAT)活性的影響
過氧化氫酶(Catalase,CAT)廣泛存在于植物細(xì)胞,其功能是催化活性氧過氧化氫(H2O2)分解為 H2O和O2,防止或減輕 H2O2的直接或間接損害[23]。由圖 5可以看出,隨著貯藏時(shí)間的逐漸增加,過氧化氫酶呈現(xiàn)出先逐漸上升然后緩慢下降的趨勢(shì),其活性在第4 d達(dá)到峰值,處理組1,處理組2和處理組3過氧化物酶活性分別為對(duì)照組的1.12倍,1.23倍和1.34倍,其中各個(gè)試驗(yàn)組的CAT活性顯著高于對(duì)照組,且差異顯著(p<0.05),這說明振動(dòng)脅迫使得果蔬組織產(chǎn)生了一系列抵御外界逆境的應(yīng)激反應(yīng),但是在貯藏后期,由于振動(dòng)損傷的進(jìn)一步加劇,蒜薹的細(xì)胞組織產(chǎn)生了大量的H2O2,對(duì)蒜薹的細(xì)胞組織造成了大量的破壞,使得CAT的活性逐漸下降。在整個(gè)貯存的過程中,對(duì)照組的CAT活性顯著低于各個(gè)振動(dòng)處理組,表明振動(dòng)脅迫使得CAT的活性不斷上升,并使得蒜薹的品質(zhì)在貯藏期間不斷衰老死亡。
2.6 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹丙二醛(MDA)含量的影響
丙二醛(Malondialdehyde,MDA)是植物衰老過程中由超氧自由基作用于植物體后引起膜系統(tǒng)脂質(zhì)過氧化的產(chǎn)物,會(huì)造成植物體生物膜和大分子的損傷,常被用來評(píng)價(jià)脂質(zhì)過氧化程度和細(xì)胞膜系統(tǒng)受傷害的程度[16]。如圖6所示,在貯藏過程中,蒜薹的丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量逐漸增加。和對(duì)照組相比,經(jīng)振動(dòng)處理的蒜薹丙二醛含量上升速度加快,貯藏4 d以后,經(jīng)振動(dòng)處理的蒜薹丙二醛含量高于對(duì)照組。16 d時(shí),處理組1,處理組2和處理組3丙二醛含量分別為對(duì)照組的1.02倍,1.04倍和1.07倍。上述結(jié)果表明經(jīng)振動(dòng)處理的蒜薹在貯藏過程中會(huì)產(chǎn)生了較多的丙二醛,說明振動(dòng)會(huì)加速蒜薹細(xì)胞膜系統(tǒng)損傷,導(dǎo)致蒜薹細(xì)胞膜發(fā)生了破裂。
2.7 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹相對(duì)電導(dǎo)率的影響
圖7 振動(dòng)處理對(duì)蒜薹相對(duì)電導(dǎo)率的影響Fig.7 The vibration effects on the relative conductivity of garlic
在貯藏過程中,受到傷害的首先是細(xì)胞膜系統(tǒng)。膜系統(tǒng)受到氧自由基攻擊后透性增加,造成離子外滲,因此常將相對(duì)電導(dǎo)率作為評(píng)價(jià)細(xì)胞膜完整性的指標(biāo)[23]。當(dāng)細(xì)胞膜完整性遭到破壞,會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞破裂,破壞細(xì)胞的功能,致使水果衰老速度加快[20,26,27]。蒜薹相對(duì)電導(dǎo)率的上升說明貯藏期間蒜薹細(xì)胞膜完整性逐漸遭到破壞。如圖7所示,隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),蒜薹的相對(duì)電導(dǎo)率逐漸增大,這是由于細(xì)胞膜自由基鏈?zhǔn)椒磻?yīng)加快,從而導(dǎo)致相對(duì)電導(dǎo)率上升速度加快[27]。貯藏至16 d時(shí),處理組1,處理組2和處理組3相對(duì)電導(dǎo)率分別為對(duì)照組的1.03倍,1.05倍和1.11倍,說明振動(dòng)處理對(duì)蒜薹細(xì)胞膜損傷嚴(yán)重,在貯藏后期,處理組3對(duì)蒜薹細(xì)胞膜損傷更嚴(yán)重(p>0.05)。
3.1 研究結(jié)果表明振動(dòng)處理使得蒜薹在貯藏期間的品質(zhì)不斷下降。其中,振動(dòng)最劇烈的處理組3在貯藏到第16 d時(shí),相較于未經(jīng)振動(dòng)處理的蒜薹,呼吸速率上升了 2.03倍,可溶性固形物含量為對(duì)照組的89.66%,過氧化物酶含量上升了1.88倍,超氧化物歧化酶酶含量上升了 1.33倍,過氧化氫酶活性上升了1.88倍,丙二醛含量上升了1.07倍,電導(dǎo)率提高了1.09倍。研究還表明蒜薹對(duì)振動(dòng)處理影響的忍耐程度各不相同,其品質(zhì)下降的速度為:處理組 3>處理組 2>處理組1>未處理組。其中,振動(dòng)幅度最大的處理組3使得蒜薹的品質(zhì)嚴(yán)重下降(p<0.05)。
3.2 振動(dòng)處理使得蒜薹的貯藏品質(zhì)急劇下降。在貯藏期間,蒜薹的可溶性固形物呈現(xiàn)出下降的趨勢(shì);蒜薹的呼吸速率、過氧化物酶、超氧化物歧化酶和過氧化氫酶的活性均呈現(xiàn)出先上升后下降的趨勢(shì);細(xì)胞膜的通透性和MDA含量均呈現(xiàn)出上升趨勢(shì)。大量的研究表明[16~20],振動(dòng)脅迫會(huì)使得果蔬的呼吸速率大幅度增加。
3.3 進(jìn)而導(dǎo)致自身體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被大量消耗用來抵御振動(dòng)脅迫對(duì)果蔬造成的損傷。振動(dòng)脅迫還會(huì)使得果蔬產(chǎn)生大量的有害物質(zhì),從而引起果蔬體內(nèi)的防御機(jī)制做出一系列應(yīng)答,使得果蔬的過氧化物酶、超氧化物歧化酶、過氧化氫酶的活性發(fā)生一系列的變化,進(jìn)而加劇了細(xì)胞膜的過氧化程度,導(dǎo)致其細(xì)胞膜完整性不斷遭到破壞,使得蒜薹相對(duì)電導(dǎo)率不斷升高,細(xì)胞加速衰老死亡。因此在安排運(yùn)輸路線時(shí)應(yīng)盡量減少在二級(jí)公路和三級(jí)公路上的運(yùn)輸時(shí)長(zhǎng),以減少由于振動(dòng)造成的蒜薹品質(zhì)下降。