垂體特異性轉(zhuǎn)錄因子與家畜經(jīng)濟(jì)性狀關(guān)系的研究進(jìn)展

李佳蓉，賈 超，姜懷志

(吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)，吉林 長春 130118)

POU結(jié)構(gòu)域因子家族是一類轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，其家族特點(diǎn)是DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(即POU結(jié)構(gòu)域)具有高度保守性。而“POU”即來源于垂體特異性轉(zhuǎn)錄因子Pit-1[1]、八聚體結(jié)合蛋白Oct-1和Oct-2及caenorhabeditⅠ線蟲神經(jīng)Unc-86[2]這4種轉(zhuǎn)錄因子英文名字的首字母。垂體特異性轉(zhuǎn)錄因子(pituitary specifific transcription factorl，POU1F1；也稱為PIT-1或GHF-1)，是POU同源異型域轉(zhuǎn)錄因子家族的成員之一。POU1F1最初被認(rèn)為是一種生長激素因子，后經(jīng)研究表明， 它是一種組織特異性轉(zhuǎn)錄因子。Ohta等在1992年首先將人類的POU1F1基因定位在第3號染色體的3p11區(qū)域[3]。該基因全長約14 kb,其mRNA全長1 262 bp,編碼291個(gè)氨基酸[4]。Woollard等[5]于2000年利用原位雜交技術(shù)，將牛、綿羊和山羊的POU1F1基因定位于1q21-22染色體上，主要功能是調(diào)節(jié)細(xì)胞的增殖與分化、調(diào)控動物生長發(fā)育。

1 POU1F1的結(jié)構(gòu)與生物學(xué)特性

垂體特異性轉(zhuǎn)錄因子POU1F1是一種在腦垂體中對多個(gè)基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控中具有關(guān)鍵作用的轉(zhuǎn)錄因子，是在下丘腦核群中產(chǎn)生的蛋白因子。作為POU結(jié)構(gòu)域家族基因的成員，POU1F1(也稱為PIT-1或GHF-1)主要表達(dá)于動物的腦垂體前葉細(xì)胞和增殖、生長的三種腺瘤細(xì)胞類型[6]，并影響其表達(dá)的正常分化。它的主要功能一是調(diào)節(jié)細(xì)胞分化、調(diào)控動物生長發(fā)育，能夠識別特異的基因順序并與之結(jié)合，從而引起細(xì)胞內(nèi)基因的轉(zhuǎn)錄；二是調(diào)節(jié)三種垂體前葉細(xì)胞(甲狀腺細(xì)胞，生長激素和催乳素細(xì)胞)以及生長激素(GH)、催乳素(PRL)、促甲狀腺激素(TSH)基因和POU1F1基因的正常分化、增殖和生長[7]，并促使以上基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，從而影響動物的生長、發(fā)育和繁殖[7-9]。

國內(nèi)外大量研究結(jié)果表明，小鼠POU1F1的突變與Snell矮小(dw)和Jackson矮小(dw-J)相關(guān)聯(lián)，人的POU1F1突變也被發(fā)現(xiàn)為與之相關(guān)[6，10-11]。牛、綿羊和山羊的POU1F1基因已定位于lq21～22區(qū)[5]。研究表明，在此區(qū)域內(nèi)，豬、牛POU1F1基因的突變與生產(chǎn)性狀的顯著關(guān)系和QTL定位都揭示了POU1F1基因能影響動物的生產(chǎn)性能[12-14]。

2 POU1F1在綿、山羊上的相關(guān)研究

Bastos等[15]首先揭示羊POU1F1基因的多態(tài)性，初步闡述山羊POU1F1基因突變及其與生產(chǎn)性狀的關(guān)系。Lana等[9]首次報(bào)道了山羊POU1F1基因座中一個(gè)沉默等位基因的鑒定，并對801個(gè)樣品中的AluI PCR-RFLP進(jìn)行了檢測，初步闡述山羊POU1F1基因突變及其與生產(chǎn)性狀的關(guān)系。此外，還對山羊POU1F1突變與生產(chǎn)性狀之間的關(guān)系進(jìn)行了評估。不同類型與乳產(chǎn)量(P<0.05)和出生體重(P<0.05)的顯著關(guān)聯(lián)意味著POU1F1基因?qū)Ξa(chǎn)奶性能和早期體重有積極的影響。山羊POU1F1基因?qū)γl(fā)性狀沒有顯著影響。因此，Bastos等首次提出基因型TC和TT分別被認(rèn)為是優(yōu)質(zhì)奶產(chǎn)量和出生體重的分子標(biāo)記。

Ozmen等[16]檢測了三種土耳其綿羊品種(Sakiz，卡拉曼白羊，Awassi綿羊)的POU1F1基因外顯子6和3'UTR區(qū)域內(nèi)的AluⅠ和DdeⅠ多態(tài)性及其與羊奶生產(chǎn)性狀的關(guān)系。經(jīng)研究后發(fā)現(xiàn)限制性內(nèi)切核酸酶AluI具有雙重多態(tài)性：TT(296 bp和173 bp)和CC(235 bp，173 bp和61 bp)，而沒有檢測到DdeI切割位點(diǎn)的多態(tài)性。在TT和CC基因型個(gè)體中，乳產(chǎn)量(P<0.001)、脂肪(P<0.001)和乳糖(P<0.05)含量差異顯著，蛋白質(zhì)含量(P>0.05)差異不顯著。在Sakiz綿羊品種中基因型TT個(gè)體具有優(yōu)異的產(chǎn)奶性能。測序結(jié)果表明，POU1F1基因外顯子6(g.185T>C)和3'UTR(g.220G>A，g.229C>T，g.248C>T，g.250A>T，g.255T>C, g.258C>T)共存在七個(gè)變異點(diǎn)。

羊POU1F1基因位于染色體1上，含有5個(gè)內(nèi)含子和6個(gè)外顯子。在不同品種的哺乳動物中不同外顯子的突變與不同的生產(chǎn)性狀有關(guān)。Mura等[17]研究檢測POU1F1基因核苷酸序列多態(tài)性及其與Sarda羊奶生產(chǎn)性狀的關(guān)系。運(yùn)用PCR-SSCP方法對6個(gè)外顯子進(jìn)行了測序，分析了可能的SNP。分析變體與產(chǎn)奶量的關(guān)系和其組成后發(fā)現(xiàn)了兩種新型SNP：在第四個(gè)內(nèi)含子片段中的5'UTR有121 C>T和在第六外顯子片段中的3'UTR有249 G>A。統(tǒng)計(jì)分析發(fā)現(xiàn)結(jié)果未顯示羊奶生產(chǎn)性狀之間的關(guān)聯(lián)和多態(tài)性。綿羊的POU1F1基因具有高水平的保守性，其與牛、人和鼠的同源性分別為98.2%，91.2%和86.2%。Bastos等[15]對葡萄牙本地羊品種"Churra da Terra Quente"的POU1F1進(jìn)行測序，發(fā)現(xiàn)測序的5 787 bp包括六個(gè)外顯子和兩個(gè)完整的內(nèi)含子，并分析檢測這六個(gè)外顯子多態(tài)性。在外顯子2的58位密碼子中發(fā)現(xiàn)一個(gè)多態(tài)性，一個(gè)等位基因變化導(dǎo)致了半胱氨酸變?yōu)槔野彼?2%等位基因頻率)。在外顯子3中，檢測到兩個(gè)多態(tài)性：在89密碼子處的G→A轉(zhuǎn)變?yōu)楦拾彼帷於０?0.5%等位基因頻率)，在105密碼子處的G→A轉(zhuǎn)變?yōu)楸彼帷K氨酸(1.5%等位基因頻率)。這些多態(tài)性可能會改變POU1F1蛋白的結(jié)構(gòu)并修飾基因的表達(dá)。在內(nèi)含子4區(qū)域檢測到了一個(gè)A→G轉(zhuǎn)變(3%等位基因頻率)。而外顯子1,4和6此次沒有檢測出多態(tài)性。

王璽年等[18]采用PCR-SSCP和DNA測序技術(shù)，對河西絨山羊、隴東絨山羊、遼寧絨山羊和內(nèi)蒙古絨山羊4個(gè)群體共509個(gè)個(gè)體的POU1F1基因第3外顯子和第6外顯子進(jìn)行SNP檢測和遺傳多樣性、生產(chǎn)性狀遺傳效應(yīng)分析，以期探尋山羊分子育種的有效遺傳標(biāo)記。結(jié)果顯示:(1)在POU1F1基因第3外顯子中檢測到1個(gè)SNP位點(diǎn) (c.313A>G)并形成AA和AB 2種基因型，第6外顯子中檢測到2個(gè)SNPs位點(diǎn)( c.682G>T、c.837C>T)并形成AA, BB, AB, AC和BC 5種基因型。(2)遺傳多態(tài)性分析表明，4個(gè)山羊群體在第3外顯子區(qū)域處于低度多態(tài)(PIC<0.25)，在第6外顯子區(qū)域處于中度多態(tài)(0.250.05)，但AB基因型個(gè)體的表型值低于AA基因型。第6外顯子AB基因型個(gè)體的體重、胸圍顯著高于BC基因型(P<0.05)，不同基因型在體高和體長指標(biāo)上差異不顯著(P>0.05)。因此，POU1F1基因?qū)ι窖虍a(chǎn)絨量和體重存在一定影響，可以作為山羊生產(chǎn)性狀的候選基因座之一。

羅衛(wèi)星等[19]研究采用PCR測序技術(shù)對黔東南小香羊和貴州黑山羊的POU1F1基因外顯子6進(jìn)行SNP篩查，并分析其與屠宰性狀的關(guān)聯(lián)性。結(jié)果表明：在2個(gè)山羊群體POU1F1基因外顯子6均檢測到2個(gè)SNPs(T58G和T172C)；在黔東南小香羊群體中，POU1F1基因外顯子6的 T58G位點(diǎn)AA和aa型個(gè)體的屠宰率顯著高于Aa型(P<0.05)，T172C位點(diǎn)Bb型個(gè)體的屠宰率顯著高于BB和bb型(P<0.05)；貴州黑山羊群體中，T58G位點(diǎn)Aa型個(gè)體的胴體重、屠宰率、眼肌面積厚和腰部肌肉厚顯著低于AA和aa型(P<0.05)，瘦肉率顯著低于AA型(P<0.05)，T172C位點(diǎn)BB型個(gè)體的胴體重、屠宰率、眼肌面積、腰部肌肉厚、凈肉重、瘦肉率和骨重顯著低于Bb和bb型(P<0.05)；其他各性狀在各位點(diǎn)各基因型之間差異未達(dá)到顯著性差異(P>0.05)，由此推測POU1F1基因外顯子6的多態(tài)可能對山羊的屠宰性狀有顯著的遺傳效應(yīng)。

Li等[20]研究描述了15種中國山羊POU1F1-DdeI基因座的多態(tài)性并分析了其中等位基因的分布情況。 PCR-RFLP分析顯示D1D1和D1等位基因的優(yōu)勢基因型，平均頻率為0.550和0.790，不分山羊的效用類型。D1D2基因型最頻繁，平均頻率為0.371?；诳ǚ綑z驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，該基因座位和基因型等位基因頻率分布差異顯著(P<0.001)，表明品種因子顯著影響POU1F1基因的分子遺傳特征。遺傳多樣性分析顯示，中國土著種群在山羊POU1F1-DdeI基因座上具有廣泛的遺傳多樣性。然而，ANOVA分析顯示，肉類、乳制品和羊絨類產(chǎn)物類型中基因純合性、基因雜合度、有效等位基因數(shù)量和多態(tài)性信息含量無顯著性差異(P>0.05)。這表明山羊效用類型對遺傳多樣性沒有顯著影響。

在此研究中，Jalilsarghale等[21]研究了POU1F1基因第三外顯子的單核苷酸多態(tài)性(SNPs)及其與兩種伊朗羊品種Zel和Lori-Bakhtiari的生長特征和血液代謝物的關(guān)系。收集90只Lori-Bakhtiari和90只Zel羊的血液樣本，提取DNA，擴(kuò)增POU1F1基因的295 bp片段，采用限制性片段長度多態(tài)性(RFLP)技術(shù)進(jìn)行基因分型。在Lori-Bakhtiari和Zel綿羊品種中鑒定出SNP，其代表在內(nèi)切核酸酶AciI的限制性位點(diǎn)處的非同義單堿基突變。結(jié)果顯示兩個(gè)研究品種之間等位基因的差異頻率，其中A等位基因在Lori-Bakhtiari品種中更為頻繁，而G等位基因在Zel品種中更為頻繁。當(dāng)檢測到POU1F1基因型時(shí)，AA基因型的動物具有比GG基因型的動物更高的斷奶重量(P<0.05)，然而基因型與出生體重之間，生物特征(體長，體高，心臟周長，大腿圍和腹圍)和血液代謝物(甘油三酯和膽固醇)之間(P>0.05)沒有顯著的關(guān)聯(lián)。這些發(fā)現(xiàn)意味著POU1F1多態(tài)性可能影響斷奶重量，因此可用作該生產(chǎn)性狀的分子標(biāo)記。

趙憲林等[22]為探討POU1F1基因的多態(tài)性與藏羊生長性狀之間的關(guān)聯(lián)性，尋找與藏羊生長性狀相關(guān)的分子標(biāo)記。利用DNA測序方法檢測藏羊POU1F1基因的多態(tài)位點(diǎn)并對其進(jìn)行基因分型，分析單一多態(tài)位點(diǎn)不同基因型及雙倍型與藏羊生長性狀的關(guān)聯(lián)性。結(jié)果顯示在POU1F1基因第4內(nèi)含子上檢測出1個(gè)多態(tài)位點(diǎn)g.14205G>A，在第5內(nèi)含子上檢測出2個(gè)多態(tài)位點(diǎn)g.15223G>A和g.15286A>G。關(guān)聯(lián)性分析表明，g.14205G>A位點(diǎn)上AA基因型的體質(zhì)量和體長分別極顯著(P<0.01)和顯著(P<0.05)高于GG和AG基因型；g.15223G>A位點(diǎn)上GG基因型的體質(zhì)量顯著高于GA基因型(P<0.05)，極顯著高于AA基因型(P<0.01)；g.15286A>G位點(diǎn)AA基因型體質(zhì)量極顯著高于GG基因型(P<0.01)，體高顯著高于GG基因型(P<0.05)。單倍型Hap7(-GGA-)的發(fā)生頻率最高，達(dá)到42.40%，其次為單倍型Hap5(-GAA-)和單倍型Hap3(-AGA-)，發(fā)生頻率分別為21.50%和14.70%。此外，POU1F1的r2值均小于0.33，說明這3個(gè)多態(tài)位點(diǎn)之間不存在強(qiáng)的連鎖性。通過合并基因型發(fā)現(xiàn)，雙倍型H7H7(GGA-GGA)的各個(gè)生長性狀表現(xiàn)最優(yōu)，其個(gè)體的體質(zhì)量、體長和體高大于其他雙倍型。說明POU1F1基因的3個(gè)SNP位點(diǎn)均能夠顯著影響其生長發(fā)育，優(yōu)勢基因型分別為AA、GG和AA，可用于藏羊生長性狀的選育。

表1 羊POU1F1基因的突變Table 1 Mutations of POU1F1 gene in sheep

3 POU1F1在牛上的相關(guān)研究

在牛中，位于POU1F1基因第6外顯子的Hinf1的多態(tài)性對奶量有顯著影響。結(jié)果顯示A等位基因與較高的產(chǎn)奶量相關(guān)，并且可能是改善牛奶量的遺傳標(biāo)記。為了更好地了解這種多態(tài)性對牛的乳腺發(fā)育和功能的影響，Carsai等[23]研究了羅馬尼亞黑牛、羅馬尼亞白牛品種的多態(tài)性，前一種是與羅馬尼亞灰色草原品種相比具有高產(chǎn)奶性能的牛品種，后一種是產(chǎn)奶量非常低的原始品種。在兩個(gè)品種中，B的等位基因頻率比A的等位基因頻率高。

Xue等[24]應(yīng)用PCR-RFLP分析POU1F1基因遺傳變異對100只南陽牛生長性狀的影響。結(jié)果表明，用HinfⅠ消化的451 bp PCR產(chǎn)物在牛群中表現(xiàn)出多態(tài)性，處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。南陽牛群的A/B等位基因頻率分別為0.465/0.535。分析POU1F1基因變異與群體生長性狀的關(guān)系后發(fā)現(xiàn)，具有基因型BB的個(gè)體內(nèi)以下參數(shù)比具有基因型AB的個(gè)體更優(yōu)秀：出生體重、斷奶前平均增重量、12月齡時(shí)體高、體重、體長和6月齡和12月齡的胸圍(P<0.05)。BB個(gè)體12月齡體重高于AA組(P<0.05)。其他年齡組的體重和體型也呈現(xiàn)等位基因B>等位基因A的趨勢。因此，基因型BB可能是顯性基因型，等位基因B可能是顯性等位基因。這些結(jié)果意味著POU1F1基因的等位基因B可能對生長特性具有積極的影響。

Myogenic因子5(Myf5)和POU1F1基因在哺乳動物的生長和發(fā)育中起重要作用。利用牛Myf5和POU1F1的特性來檢測遺傳變異位點(diǎn)，并將它們與367頭牛(Hanwoo(325)和Angus(37))的經(jīng)濟(jì)性狀進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析。Seong等[25]通過基因組DNA的序列分析，鑒定出Myf5的內(nèi)含子2(A1948G SNP)和POU1F1的外顯子6(A15635G SNP)中的兩個(gè)單核苷酸多態(tài)性(SNP)。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示，Myf5多態(tài)性與6個(gè)月齡的背脂厚度和活體重顯著相關(guān)，POU1F1多態(tài)性顯著影響24個(gè)月齡胴體重和體重、背脂肪厚度。Myf5和POU1F1之間的相互作用在胴體重、背最長肌面積、背脂肪厚度和大理石花紋分?jǐn)?shù)方面均顯著。表明Myf5和POU1F1作為生長和胴體性狀的候選基因，它們之間的相互作用顯著影響牛的生長和胴體性狀。

陳然等[26]運(yùn)用PCR-RFLP技術(shù)研究了新疆褐牛266頭個(gè)體POU1F1基因的多態(tài)性，在新疆褐牛群體中發(fā)現(xiàn)A、B兩種等位基因，并發(fā)現(xiàn)了AA、AB、BB 3種基因型。相應(yīng)得到等位基因A/B頻率、基因型的頻率、純合度(H0)、雜合度(He)、有效等位基因數(shù)(Ne)、多態(tài)信息含量(PIC)的統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。結(jié)果表明：新疆褐牛POU1F1基因座的451bpPCR產(chǎn)物經(jīng)限制性酶HinfI消化后表現(xiàn)多態(tài)，其等位基因A/B頻率為0.3083/0.6917；AA、AB和BB3種基因型的頻率分別為：0.0677/0.4812/0.4511，在該基因座處于Hardy-Weinberg平衡(P>0.05)；它們在該基因座的純合度/雜合度/有效等位基因數(shù)/多態(tài)信息含量分別為：0.5735/0.4265/1.74/0.3356。這表明了新疆褐牛在人工選育、遷徙和遺傳漂變等因素作用下POU1F1基因座處于動態(tài)平衡狀態(tài)；并得出A等位基因在群體中不具有優(yōu)勢，A等位基因的劣勢效應(yīng)可以作為標(biāo)記輔助選擇(MAS)的參考，同時(shí)也給育種工作者建議應(yīng)加大改良力度，對早期選種有一定指導(dǎo)意義。

西藏牦牛POU1F1基因存在一定的遺傳多態(tài)性，宋娜娜等[27]利用DNA池和測序技術(shù)，結(jié)合PCR-RFLP方法，篩查了POU1F1基因第2外顯子和第5內(nèi)含子的SNP位點(diǎn)，分析了西藏申扎(SZ)、類烏奇(LWQ )、斯布(SB)和帕里(PL)4個(gè)牦牛類群(品種)共182個(gè)個(gè)體的POU1F1基因的多態(tài)性及其與體重、體高、體長等生長性狀指標(biāo)之間的相關(guān)性。結(jié)果表明：(1)POU1F1基因第2外顯子高度保守，未發(fā)現(xiàn)任何突變，第5內(nèi)含子中發(fā)現(xiàn)2個(gè)突變位點(diǎn)，分別為T727C (BgllⅠ酶切)位點(diǎn)和T284C(StuⅠ酶切)位點(diǎn)。(2)申扎、類烏奇、斯布和帕里4個(gè)群體中StuⅠ位點(diǎn)為中度多態(tài)性，其基因T/C頻率分別為：0.61/0.39、0.54/0.46、0.54/0.46和0.62/0.38，BgllⅠ位點(diǎn)為低度多態(tài)性；Hardy-Weinberg檢驗(yàn)表明StuⅠ位點(diǎn)和BgllⅠ位點(diǎn)均處于平衡狀態(tài)(P>0.05)。(3)StuⅠ位點(diǎn)在4個(gè)群體中表現(xiàn)CC、CT和TT 3種基因型，Ⅱ位點(diǎn)在4個(gè)群體中只表現(xiàn)CT和TT2種基因型。(4)帕里牦牛StuⅠ位點(diǎn)CC和CT基因型在生長性狀上存在顯著差異(P<0.05)，其中CC基因型的體高和體長均高于CT基因型，而其他幾個(gè)牦牛類群末發(fā)現(xiàn)類似現(xiàn)象。BgllⅠ位點(diǎn)基因型與生長指標(biāo)的相關(guān)性不顯著。西藏牦牛POU1F1基因內(nèi)含子5內(nèi)T284C基因座表現(xiàn)的多態(tài)性對帕里牦牛的體高和體長有較為顯著的影響，可以作為改良其生長性狀的一個(gè)遺傳標(biāo)記。

4 POU1F1在豬上的相關(guān)研究

人們分離了豬POU1F1部分cDNA和其整個(gè)3'UTR的基因組克隆，發(fā)現(xiàn)POU1F1的多態(tài)性與豬的幾種性狀特征相關(guān)。為了了解豬POU1F1基因的生物學(xué)功能及其在豬遺傳學(xué)中的應(yīng)用，Yu等[28]使用逆轉(zhuǎn)錄酶-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)進(jìn)行豬POU1F1全長cDNA的克隆。豬POU1F1基因的cDNA及其推導(dǎo)的蛋白質(zhì)序列分別與其他哺乳動物(人，牛，綿羊和嚙齒動物)的POU1F1cDNA和蛋白質(zhì)具有約90%～95%的同源性。但是與其它豬的POU1F1序列相比較只顯示出約93%的同一性。Yu等[12]對POU1F1基因進(jìn)行了測序并在外顯子4中鑒定了一個(gè)新的多態(tài)性。幾種哺乳動物POU1F1序列的進(jìn)化分析表明，測序誤差可能解釋了其他豬的序列報(bào)告中觀察到的差異。還通過RT-PCR鑒定了幾種POU1F1選擇性剪接形式。它們是△3POU1F1(缺少整個(gè)外顯子3)，△4POU1F1(缺少整個(gè)外顯子4)和POU1F1β(插入外顯子2前面的26個(gè)氨基酸)轉(zhuǎn)錄物。在嚙齒動物中發(fā)現(xiàn)了△4POU1F1和POU1F1β轉(zhuǎn)錄物編碼功能上的差異蛋白質(zhì)?！?POU1F1轉(zhuǎn)錄本是POU1F1的新亞型。通過細(xì)菌中這些蛋白質(zhì)的表達(dá)來分析豬△3POU1F1和POU1F1之間潛在的不同功能。在DNA遷移率變動測定中大腸桿菌表達(dá)的POU1F1和△3POU1F1蛋白與大鼠生長激素(rGH)和大鼠催乳素(rPRL)啟動子DNA共同作用。結(jié)果表明，豬POU1F1可以特異性結(jié)合rGH和rPRL啟動子區(qū)域，但即使是在非常高的蛋白質(zhì)濃度下豬△3POU1F1也不能與之結(jié)合。在凝膠移位測定前通過混合蛋白質(zhì)提取物測試△3POU1F1和POU1F1之間的蛋白質(zhì)的相互作用，結(jié)果表明△3POU1F1蛋白不影響POU1F1與靶DNA的結(jié)合。這些數(shù)據(jù)證明了此研究中克隆的POU1F1cDNA的功能，并鑒定了一種新型△3POU1F1轉(zhuǎn)錄物，其不能編碼結(jié)合rGH/rPRL靶序列的蛋白質(zhì)。

中國梅山豬在初生后100 d內(nèi)的發(fā)育期發(fā)育迅速，與英國/歐洲的品種相比胎盤尺寸較小，產(chǎn)仔數(shù)較大。Sun等[14]為了研究POU1F1在豬生長和繁殖性狀中的作用，對出生后第0,15和30天的9窩仔豬采集垂體(n=60)和/或血液樣品(n=80)，并將所有動物進(jìn)行基因分型(CC，CD，DD)用于分析研究MspⅠPOU1F1的多態(tài)性。研究結(jié)果表明出生時(shí)POU1F1基因型對GH和PRL的循環(huán)水平有顯著影響。DD基因型的仔豬GH水平較低，但PRL水平高于其他基因型。POU1F1-α的mRNA從0天到第30天下降(P<0.05)，與同期相比GH的mRNA以及PRL和GH血漿水平平行減少(P<0.05)。POU1F1-βmRNA水平在這一時(shí)期并沒有顯著變化。POU1F1-αmRNA與GH mRNA和GH在血漿濃度水平之間以及兩種POU1F1 mRNA同種型之間的相關(guān)性是顯著的。

張陳華等[29]采用PCR-RFLP (RsaⅠ限制性內(nèi)切酶)分子標(biāo)記技術(shù)，利用現(xiàn)代分子標(biāo)記技術(shù)尋找影響豬生長性狀的標(biāo)記基因座，分析了杜洛克、長白、大白及長大二元雜交4個(gè)品種共381頭豬POU1F1基因外顯子 5至內(nèi)含子5內(nèi)多態(tài)性，并采用最小二乘法分析了POU1F1基因多態(tài)性對生長性狀影響的遺傳效應(yīng)。經(jīng)檢測，4個(gè)品種POU1F1基因RsaⅠ位點(diǎn)均存在多態(tài)性。等位基因A的基因頻率分別為0.8317、0.8302、0.6767、0.7523，A為優(yōu)勢基因。被測豬群POU1F1基因的基因頻率在被測豬群中均處于 Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)(P>0.05)。最小二乘分析表明：POU1F1基因3種基因型的豬在出生重、斷奶重及70日齡重性狀上均呈現(xiàn)BB>AB>AA趨勢(其中,長白豬只存在AB和AA 2種基因型)，B為優(yōu)勢基因。POU1F1基因外顯子 5至內(nèi)含子5 RsaⅠ位點(diǎn)多態(tài)性對測試豬群生長性狀有一定影響，但是否是影響生長性狀的一個(gè)候選基因之一或是與影響豬生長性狀的QTL連鎖的基因，還需進(jìn)一步研究。

許金根等[30]為尋找改良豬生長性能的分子標(biāo)記，研究豬POU1F1基因多態(tài)性及其對生長性狀的相關(guān)性。采用PCR-RFLP方法檢測豬POU1F1基因的單核苷酸多態(tài)性(SNP)，并分析基因多態(tài)性與生長性狀的關(guān)聯(lián)性。結(jié)果顯示豬POU1F1基因的RsaI酶切位點(diǎn)存在多態(tài)性。其中，杜洛克豬未檢測到AA型，BB基因型頻率高于AB型，等位基因B頻率高于等位基因A，SNP處于低度多態(tài)(PIC<0.25)；淮豬新品系未檢測到BB型，AA基因型頻率高于AB型，等位基因A頻率高于等位基因B，SNP處于低度多態(tài)(PIC<0.25)；杜洛克豬×淮豬新品系未檢測到BB型，AB基因型頻率高于AA型，等位基因A頻率高于等位基因B，SNP處于中度多態(tài)(0.250.05)。由此可見杜洛克豬、淮豬新品系、杜洛克豬×淮豬新品系POU1F1基因RsaI酶位點(diǎn)都存在多態(tài)性，但POU1F1基因?qū)ωi生長性狀沒有顯著影響。

而YU等[31]研究發(fā)現(xiàn)，POU1F1基因的RsaI酶切位點(diǎn)在楓涇豬、梅山豬和民豬僅檢測到AA型，切斯特白豬、杜洛克豬和漢普夏豬檢測到三種基因型，長白豬和大白豬只檢測到AA和AB型 。另外，龐瑾等[32]研究檢測POU1F1基因的RsaI酶切位點(diǎn)在大白豬、長白豬和杜洛克豬結(jié)果顯示，三個(gè)豬種均存在處于中度多態(tài)的AA、AB和BB基因型，且都以基因型AA頻率最高和等位基因A頻率較高。BRUNSCH等[33]研究發(fā)現(xiàn)POU1F1基因RsaI酶切位點(diǎn)多態(tài)性與歐洲野豬×皮特蘭豬的F2代14個(gè)生長和胴體組成性狀顯著相關(guān)，但與梅山豬×皮特蘭豬的F2代所測性狀無顯著相關(guān)，這說明不同豬群POU1F1基因RsaI酶切位點(diǎn)對生長性狀的遺傳效應(yīng)可能不一樣。因此，這些試驗(yàn)結(jié)果不一致，除了還需擴(kuò)大樣本進(jìn)行研究，可能與豬的遺傳背景差異有關(guān)。

5 小結(jié)與展望

POU1F1作為在下丘腦核群中產(chǎn)生的一類轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，它的突變可能導(dǎo)致GH，PRL，TSH和POU1F1基因本身不同的表達(dá)從而影響這些基因的分化、增殖和生長，進(jìn)而影響動物的生長、發(fā)育和繁殖。目前的研究發(fā)現(xiàn)POU1F1對哺乳動物的產(chǎn)奶性狀、早期體重、生產(chǎn)性狀、屠宰性狀和胴體性狀具有重要作用。Lana等[9]發(fā)現(xiàn)在山羊中POU1F1對毛發(fā)性狀沒有顯著影響，但王璽年等[18]發(fā)現(xiàn)其對山羊產(chǎn)絨量存在一定影響，并認(rèn)為其可作為山羊生產(chǎn)性狀的候選基因座之一。另外，品種因子顯著的影響POU1F1基因的分子遺傳特征。綜上所述，可看出POU1F1對機(jī)體生長發(fā)育具有重要意義，這可以有效的幫助我們在遺傳育種、遺傳變異的研究中提供研究思路和工作幫助。