HPLC法測定養(yǎng)陰鎮(zhèn)靜丸中五味子醇甲的含量

薛雅光，薛雅峰，閆小鈞，郝羚竹，趙琳琳，郭美玲

（1.吉林省藥品檢驗所，吉林 長春 130033；2.吉林省醫(yī)療器械檢驗所，吉林 長春 130062）

0 引言

本文構(gòu)建HPLC法以評測在養(yǎng)陰鎮(zhèn)靜丸之中五味子醇甲的總量，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

（1）試藥：五味子醇甲有關(guān)的對照物（批號即：110857-200608），生產(chǎn)廠商即：中國藥品生物制品檢驗所，予以總量評測；樣本生產(chǎn)廠商即：長春人民制藥有限公司[1-3]。

（2）主要儀器：Agilent 1200高效液相色譜儀。

1.2 試驗方法

（1）色譜條件。色譜柱如：Agilent HC C18（規(guī)格如：250×4.6 mm，5 μm）；甲醇－水（比重如：58∶42）即流動相；監(jiān)測波長即：250 nm；進(jìn)樣量10μl[4]。

（2）對照物相應(yīng)的溶液。選出五味子醇甲相應(yīng)的對照物適宜，精準(zhǔn)輔以稱量，加進(jìn)70%的甲醇作成在1 mL之中囊括了10 μg的溶液，而得[5]。

（3）供試品溶液。取重量差異項下大蜜丸，剪碎，或是選出裝量差別項之中的水丸，磨細(xì)，選出1 g，精準(zhǔn)輔以稱量，放進(jìn)錐形瓶之中，精準(zhǔn)加進(jìn)25 mL且70%的甲醇，緊密，稱量重量，等全方位得以溶散后，超聲施行30 min的操作（功率即：250 W，頻次即：50 kHz），等冷，稱量重量，借助70%的甲醇補上缺失的重量，晃勻，濾析，選出續(xù)濾液，而得[6-9]。

（4）陰性樣本的溶液。選出缺失五味子的養(yǎng)陰鎮(zhèn)靜丸樣本，依據(jù)予以試品溶液的配備方式配備陰性樣本溶液[8]。

（5）干擾型實驗。依據(jù)如上色譜情況予以評測，色譜圖詳情如圖1-4。結(jié)果表明其它成分測定無干擾。

（6）標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制。精準(zhǔn)吸走五味子醇甲相應(yīng)對照物的溶液（濃度即：10.43 μg/mL）即：1、5、10、15、20 μl注進(jìn)液相色譜儀之中，依據(jù)設(shè)定的色譜情況輔以評測，將對照物的進(jìn)樣總量（μg）當(dāng)作橫坐標(biāo)，色譜峰范疇當(dāng)作縱坐標(biāo)，匯編規(guī)范曲線。測算回歸方程即：Y即—0.485+81991.39X，R2=0.9999，結(jié)果表明，五味子醇甲在0.010-0.209μg線性關(guān)系良好[10]。

（7）穩(wěn)定性試驗。精密吸取同一供試品溶液10μl，依法分別于0，4，8，20，24 h各測試1次。五味子醇甲平均峰面積的RSD=1.2%（n=5）。

（8）精密度試驗。精密吸取同一份供試品溶液，按照本文制定的色譜條件，連續(xù)檢測六次，測定五味子醇甲峰面積[8]，六次測定結(jié)果的平均峰面積的RSD為0.9%（n=6）。

（9）重現(xiàn)性試驗。對于同一份樣品，按照本文制定的方法平行檢測六份，測定含量。結(jié)果五味子醇甲含量的RSD=1.0%（n=6）[11-12]。

圖1 溶劑HPLC色譜圖

圖2 陰性HPLC色譜圖

圖3 對照物HPLC型色譜圖

圖4 供試物HPLC型色譜圖

（10）回收率試驗。精準(zhǔn)稱量同法評測設(shè)定總量的供試物總共6份，單份即：0.5 g，精準(zhǔn)加進(jìn)五味子醇甲相應(yīng)的對照物25 mL的溶液之中（濃度即：0.004173 mg/mL），依據(jù)設(shè)定規(guī)范的方式予以選出、評測，測算收回率，平均收回率即：99.7%，RSD即：0.9%。成果指出了這一方式的收回率較優(yōu)、精準(zhǔn)程度較大。

2 樣品測定結(jié)果

選出對照物的溶液與供試物的溶液適宜，依據(jù)如上色譜分析情況施行評測，憑借外標(biāo)法評測總共17批樣本之中五味子醇甲的總量，

3 討論

色譜柱的選擇，在本次試驗研究之下，對比了Diamonsil C18型色譜柱（規(guī)格如：250×4.6 mm，5μm）、Agilent HC C18型色譜柱（規(guī)格如：4.6×250 mm，5 μm）、Alltima C18型色譜柱（規(guī)格如：250×4.6 mm，5 μm），三類色譜柱都達(dá)成了方式體系之中實用性的規(guī)定。表明本實驗?zāi)陀眯院谩?/p>