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    妊娠期糖尿病孕婦血漿晚期氧化蛋白產(chǎn)物的變化及意義

    2018-09-04 12:46:08陳彩香李凡海莎
    關(guān)鍵詞:氯胺蛋白激酶活性氧

    陳彩香 李凡 海莎

    AOPP是一種新型的蛋白氧化應(yīng)激標(biāo)志物, 近期有不少研究都發(fā)現(xiàn)AOPP在慢性腎病、糖尿病、慢性動(dòng)脈粥樣硬化、妊娠期糖尿病等疾病患者血漿中的表達(dá)都明顯升高,提示AOPP可能與血管內(nèi)皮功能紊亂、氧化應(yīng)激有一定關(guān)聯(lián)[1,2]。本研究旨在明確AOPP表達(dá)與GDM的關(guān)系, 現(xiàn)報(bào)告如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 選取2015年6月~2017年6月在本院產(chǎn)科進(jìn)行產(chǎn)前檢查的42例GDM孕婦作為研究組, 另選取40例正常孕婦作為對(duì)照組。研究組平均年齡(28.20±3.40)歲,孕前平均體質(zhì)量指數(shù)(BMI)為(21.65±3.05)kg/m2, 平均孕次(1.93±1.12)次, 平均產(chǎn)次(0.33±0.41)次。對(duì)照組平均年齡(27.87±4.05)歲, 孕前平均BMI(22.01±2.91)kg/m2, 平均孕次(2.03±1.36)次, 平均產(chǎn)次(0.26±0.39)次。兩組孕婦一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05), 具有可比性。

    1.2 方法 采集兩組孕婦空腹靜脈血液3 ml, 抗凝離心處理, 分離血清, 保留血漿, 保存在80℃冰箱中, 將14.085 mg氯胺-T與50 ml蒸餾水混合, 配置成氯胺-T標(biāo)準(zhǔn)品。在6只試管中分別加入不同濃度的氯胺-T標(biāo)準(zhǔn)溶液(0、10、20、30、40、50 μmol/L)。取 500 μl血漿樣本 , 加入 5 倍的磷酸緩沖鹽溶液(PBS)將樣本稀釋為2500 μl, 混合均勻。取200 ml稀釋樣本加入樣品測(cè)試孔。在氯胺-T標(biāo)準(zhǔn)溶液孔中加入200 μl不同濃度的氯胺-T溶液。將200 μl的PBS加入空白調(diào)零孔中。每孔分別加入碘化鉀溶液(1.16 μmol/L)10 μl, 混合均勻。每孔加入20 μl的冰醋酸溶液, 混合均勻。使用恒溫水浴箱(37℃)孵育5 min, 測(cè)定OD值(波長(zhǎng)340 nm)。計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔的平均OD值, 根據(jù)線性回歸方程計(jì)算血漿AOPP濃度。

    1.3 觀察指標(biāo) 對(duì)兩組孕婦妊娠早期(16~20孕周)、中期(24~28孕周)、晚期(32~36孕周)血漿AOPP水平進(jìn)行檢測(cè)并比較, 分析AOPP表達(dá)與血糖相關(guān)指標(biāo)的關(guān)系。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示, 采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料以率(%)表示, 采用χ2檢驗(yàn);GDM與血漿AOPP的相關(guān)性采用Logistic回歸分析。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

    2 結(jié)果

    2.1 血漿AOPP水平 研究組孕婦妊娠早期、中期、晚期的血漿AOPP水平分別為(68.102±6.618)、(75.076±7.651)、(81.527±6.646)μmol/L, 均顯著高于對(duì)照組的 (55.485±7.336)、(64.138±7.543)、(71.647±7.578)μmol/L, 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。見(jiàn)表 1。

    2.2 GDM與血漿AOPP的相關(guān)性 AOPP水平與GDM的發(fā)生呈正相關(guān), 其為GDM的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。見(jiàn)表2。

    表1 兩組孕婦妊娠早、中、晚期的血漿AOPP水平變化比較( ±s, μmol/L)

    表1 兩組孕婦妊娠早、中、晚期的血漿AOPP水平變化比較( ±s, μmol/L)

    注:與對(duì)照組比較, aP<0.05

    研究組 42 68.102±6.618a 75.076±7.651a 81.527±6.646a對(duì)照組 40 55.485±7.336 64.138±7.543 71.647±7.578 t 8.185 6.516 6.285 P<0.05 <0.05 <0.05

    表2 GDM與血漿AOPP的相關(guān)性分析

    3 討論

    AOPP是一種較為精確、敏感的氧化應(yīng)激標(biāo)志物, 其能較為準(zhǔn)確地反映氧化劑介導(dǎo)的蛋白損傷[3]。有文獻(xiàn)報(bào)道,AOPP表達(dá)升高反映了氧化應(yīng)激反應(yīng)的增強(qiáng), 其會(huì)造成血管內(nèi)皮損傷, 所以其也可能是造成動(dòng)脈粥樣硬化的原因之一[4,5]。有多篇文獻(xiàn)報(bào)道, 子癇前期患者胎盤(pán)組織、臍帶血及血漿中的AOPP水平均存在異常升高[6]。從既往的文獻(xiàn)報(bào)道來(lái)看, AOPP可能是通過(guò)通過(guò)加重或誘導(dǎo)氧化應(yīng)激反應(yīng)、促進(jìn)炎癥反應(yīng)來(lái)參與各類疾病的發(fā)生與發(fā)展的[7]。AOPP的過(guò)度表達(dá)會(huì)刺激臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞釋放大量的活性氧, 同時(shí)促使血管細(xì)胞粘附分子-1、細(xì)胞間粘附分子-1過(guò)表達(dá), 從而加重胎盤(pán)組織缺氧、缺血, 而胎盤(pán)缺氧、缺血又會(huì)進(jìn)一步加重氧化應(yīng)激反應(yīng)[8]。本次研究結(jié)果顯示, 研究組孕婦妊娠早期、中期、晚期的血漿AOPP水平分別為(68.102±6.618)、(75.076±7.651)、(81.527±6.646)μmol/L, 均顯著高于對(duì)照組的(55.485±7.336)、(64.138±7.543)、(71.647±7.578)μmol/L,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這一結(jié)果與國(guó)內(nèi)相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道[9]結(jié)果相符, 說(shuō)明GDM患者存在著明顯的氧化應(yīng)激失衡, AOPP水平的異常升高可能與GDM的發(fā)生、發(fā)展有著密切聯(lián)系。本文相關(guān)性分析結(jié)果也顯示, AOPP水平與GDM的發(fā)生呈正相關(guān), 其為GDM的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。這可能是因?yàn)檠趸瘧?yīng)激的增強(qiáng)會(huì)使體內(nèi)產(chǎn)生大量的活性氧, 而活性氧是功能性信號(hào)分子, 其會(huì)激活細(xì)胞內(nèi)應(yīng)激敏感性信號(hào)通路(c-Jun氨基末端激酶/應(yīng)激活化蛋白激酶、氨基己糖、核因子-κB、蛋白激酶C、p38絲裂原活化蛋白激酶等), 從而對(duì)胰島素信號(hào)傳導(dǎo)產(chǎn)生干擾, 引起胰島素抵抗, 進(jìn)而引發(fā)GDM[10]。

    綜上所述, GDM孕婦的血漿AOPP表達(dá)明顯升高, 且AOPP的表達(dá)水平與GDM發(fā)病率存在著正相關(guān)關(guān)系, 早期進(jìn)行血漿AOPP檢測(cè)可為預(yù)測(cè)GDP的發(fā)生提供一定的參考依據(jù)。

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