乳腺癌組織磁共振T2WI信號(hào)特征與增殖細(xì)胞核抗原（Ki-67）表達(dá)的相關(guān)性

吳健

（海南省三亞市人民醫(yī)院 放射科，海南 三亞 572000）

由于各種因素的影響，乳腺癌已經(jīng)成為女性最常見的惡性腫瘤之一，多發(fā)病于50歲以上女性，近年來有年輕化的趨勢(shì)[1-2]。早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早期治療是改善乳腺癌患者預(yù)后的關(guān)鍵，不過影響乳腺癌的因素比較多，包括淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、浸潤(rùn)侵襲狀態(tài)、腫瘤大小、組織學(xué)分型、臨床分期、雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）表達(dá)等[3-4]。增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）（Ki-67）是一種與增殖細(xì)胞相關(guān)的核抗原，近年有相關(guān)研究認(rèn)為，其能有效評(píng)估腫瘤細(xì)胞增殖活性的重要標(biāo)志物[5]。影像學(xué)檢查是乳腺癌重要的診斷手段，包括X射線、超聲、CT、MRI等，X射線、超聲的優(yōu)勢(shì)在于操作簡(jiǎn)單，價(jià)格便宜，但是組織分辨率低[6]；CT可顯示乳腺各層結(jié)構(gòu)，對(duì)病灶形態(tài)大小、血流也有很好的顯示，但是在臨床容易誤診[7-8]。磁共振成像（magnetic resonance imaging,MRI）具有多體位多參數(shù)掃描、高軟組織分辨率等優(yōu)點(diǎn)，使得病灶能清晰的顯示其侵及范圍、生長(zhǎng)類型、形態(tài)結(jié)構(gòu)等，在乳腺癌診斷發(fā)揮重要作用[9-10]。當(dāng)前MRI多采用T1WI和T2WI進(jìn)行掃查，T1WI主要用于對(duì)乳腺腺體、脂肪組織進(jìn)行檢查；T2WI能夠?qū)Σ≡钸M(jìn)行更好的觀察，乳腺癌病灶在T2WI主要表現(xiàn)為混雜不均信號(hào)或稍高信號(hào)，乳腺腺體組織呈等信號(hào)[11-12]。本文回顧性研究2012年1月-2017年5月在該院行手術(shù)治療，術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)的乳腺癌患者M(jìn)RI影像學(xué)資料，探討MRI診斷乳腺癌T2WI信號(hào)特征與Ki-67表達(dá)的相關(guān)性。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 研究對(duì)象

采用回顧性與隨機(jī)抽樣研究方法，選取2011年9月-2017年4月該院診治的乳腺癌患者122例作為研究對(duì)象。納入標(biāo)準(zhǔn)：研究得到醫(yī)院倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)；單側(cè)乳腺癌；臨床、影像學(xué)與病理資料完整；病理診斷為乳腺癌患者；患者年齡20～90歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：MRI檢查前接受新輔助化療者；妊娠與哺乳期婦女；未經(jīng)手術(shù)或穿刺活檢病理證實(shí)或隨訪失敗患者。

1.2 MRI診斷方法

使用選擇GE Signa 1.5 T MR（通用電氣公司），配套有專用乳腺相控陣線圈。患者取俯臥位，頭足位進(jìn)入磁場(chǎng)，使雙側(cè)乳腺充分暴露，雙臂置于頭端兩側(cè)，自然懸垂于檢查線圈內(nèi)。

掃描序列包括：FSE T1WI軸面：TE 10 ms，TR 480～960 ms；FSE T2WI加脂肪抑制軸面：TE 90～10 ms，TR 2500～3800 ms。矩陣 320×160，層厚4～5 mm，層隔2 mm。對(duì)比劑采用釓噴酸葡胺注射液（Gd-DTPA，先靈公司），劑量0.1 mmol/kg，以2 ml/s的速度注入，注入20 s后連續(xù)掃描5次。以癌旁正常腺體信號(hào)為標(biāo)準(zhǔn)，判斷平掃時(shí)病灶信號(hào)。采用多平面重建，記錄病灶強(qiáng)化方式、病灶與周圍血管的聯(lián)系、形態(tài)特征等。擴(kuò)散加權(quán)成像（diffusion weighted imaging,DWI）應(yīng)用回波序列，擴(kuò)散敏感系數(shù)b值分別為800 s/mm2和b=1 000 s/mm2。矩陣128×128，層厚1.0 mm，層距1.0 mm，TR 3 000ms，TE 84 ms，視野320×320 m。在彌散圖像上選擇病變的感興趣區(qū)（region of interest,ROI），測(cè)定與計(jì)算表觀彌散系數(shù)（apparent diffusion coefficient，ADC）值。

1.3 免疫組織化學(xué)（簡(jiǎn)稱免疫組化）分析Ki-67

取所有患者的癌組織標(biāo)本與癌旁組織標(biāo)本，進(jìn)行石蠟包埋、切片、常規(guī)蘇木素-伊紅（HE）染色與免疫組化染色，Ki-67檢測(cè)采用免疫組化方法，陽性結(jié)果為胞核呈棕黃色或棕褐色顆粒，陽性細(xì)胞數(shù)≥14%為高表達(dá)，陽性細(xì)胞數(shù)＜14%為低表達(dá)。Ki-67表達(dá)判定所需的一抗、二抗均選用Bio-rad基因公司的即用型抗體（抗體工作濃度為1∶100）。

1.4 觀察指標(biāo)

記錄與調(diào)查所有患者的一般資料，包括年齡、家族史、月經(jīng)狀態(tài)、病理特征等。

所有病例均由2位有經(jīng)驗(yàn)的影像科醫(yī)師采用雙盲法進(jìn)行讀片并做出診斷，如意見不同進(jìn)行協(xié)商判定。參照MRI BI-RADS標(biāo)準(zhǔn)，分析患者乳腺癌病灶與正常乳腺癌的MRI形態(tài)學(xué)表現(xiàn)，包括內(nèi)部強(qiáng)化特點(diǎn)（均勻/不均勻/環(huán)形）、邊緣（光滑/不規(guī)則/毛刺）等，重點(diǎn)記錄T2WI信號(hào)（低或等/高/高亮）等。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 19.00統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)數(shù)資料以構(gòu)成比或率（%）表示，比較采用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)分析采用Spearman法，影響因素分析采用多因素Logistic回歸模型，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 一般資料

在122例患者中，年齡最小29歲，最大79歲，平均（50.77±5.29）歲；有20例（16.4%）患者有家族史；絕經(jīng)患者72例（59.0%）；組織學(xué)類型：浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌114例，非浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌8例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移45例（36.9%）；脈管內(nèi)癌栓34例（27.9%），神經(jīng)侵犯6例（4.9%）。

2.2 Ki-67陽性率情況

癌組織的Ki-67陽性率為54.9%（67/122），癌旁組織為23.8%（29/122），癌組織的Ki-67陽性率高于癌旁組織（χ2=7.835，P=0.005）。見表 1。

2.3 MRI信號(hào)特征

在T2WI信號(hào)特征上，癌組織78例（63.9%）主要表現(xiàn)為高信號(hào)與高亮信號(hào)，癌旁組織9例（7.4%）主要表現(xiàn)為低或等信號(hào)；癌組織T1WI多表現(xiàn)為低信號(hào)，癌旁組織表現(xiàn)為高信號(hào)；癌組織邊緣不規(guī)則、邊界模糊，病灶內(nèi)部信號(hào)不均勻，可見異常增多血管影。見表1和附圖。

2.4 ADC值情況

癌組織的ADC值為（0.89±0.12）×10-3/mm2，低于癌旁組織的（1.67±0.24）×10-3/mm2（t=10.382，P=0.000）。

2.5 相關(guān)性分析

在癌組織中，Spearman相關(guān)性系數(shù)分析顯示T2WI高信號(hào)與Ki-67陽性率呈正相關(guān)（rs=0.724，P＜0.05），與ADC值呈負(fù)相關(guān)（rs=-0.452，P＜0.05）。以Ki-67陽性率作為因變量，以MRI指標(biāo)作為自變量，多因素分析T2WI高信號(hào)、ADC值也為影響Ki-67陽性率的危險(xiǎn)因素（=0.185，1.842，P＜0.05）。見表 2。

表1 癌組織與癌旁組織的MRI信號(hào)特征比較 （n =122）

附圖 右側(cè)乳腺癌的MRI特征

表2 影響乳腺癌病灶Ki-67陽性率的危險(xiǎn)因素分析 （n =122）

3 討論

乳腺癌是一種高度異質(zhì)性的惡性腫瘤，目前缺乏有效的靶向治療藥物。因此研究乳腺癌的分子生物學(xué)特征與影像學(xué)特征對(duì)于判斷腫瘤預(yù)后、制定臨床治療方案有重要的意義。目前乳腺癌的研究已進(jìn)入子生物學(xué)的時(shí)代，各種分子標(biāo)記物廣泛應(yīng)用于乳腺癌發(fā)病、診斷、治療及預(yù)后評(píng)估[13-14]。本研究顯示，癌組織的Ki-67陽性率為54.9%，癌旁組織為23.8%，癌組織的Ki-67陽性率高于癌旁組織（P＜0.05）。Ki-67是細(xì)胞增殖相關(guān)蛋白，是在增殖細(xì)胞核中表達(dá)的一種抗原，可用來評(píng)估腫瘤細(xì)胞的增殖活性。Ki-67在細(xì)胞周期的G0期不表達(dá)，在G1、S1、G1和M期均有表達(dá)，與肺癌、胃腸癌的發(fā)生、轉(zhuǎn)移、發(fā)展、浸潤(rùn)等作用過程具有密切的關(guān)系[15]。Ki-67表達(dá)比率越高，腫瘤組織生長(zhǎng)越快，惡性程度也更高，預(yù)后死亡率也比較高[16-17]。

MRI檢查的高敏感性使其成為乳腺癌篩查的重要方法，其能明顯顯示病灶的侵及范圍、生長(zhǎng)類型、形態(tài)結(jié)構(gòu)圍等[18]。乳腺癌的MRI表現(xiàn)可歸納為：病灶形態(tài)不一，不規(guī)則狀、分葉狀等結(jié)構(gòu)；邊緣不規(guī)則，呈毛刺樣改變，表現(xiàn)為蟹足狀；病灶與周圍組織邊界模糊不清；增強(qiáng)后病灶邊緣呈環(huán)形強(qiáng)化；病灶周圍有異常增生血管影等。由于乳腺癌生長(zhǎng)快常伴有液化、纖維化、壞死、囊變，甚至有出血表現(xiàn)，為此在MRI的信號(hào)特征比較復(fù)雜[19]。本研究顯示在T2WI信號(hào)特征上，癌組織主要表現(xiàn)為高信號(hào)與高亮信號(hào)，癌旁組織主要表現(xiàn)為低或等信號(hào)；癌組織T1WI多表現(xiàn)為低信號(hào)，癌旁組織表現(xiàn)為高信號(hào)，表明要T2WI信號(hào)強(qiáng)度以及內(nèi)部結(jié)構(gòu)的不同表現(xiàn)，對(duì)多數(shù)乳腺癌均能作出較準(zhǔn)確的診斷。

隨著MRI技術(shù)不斷完善成熟，DWI可從分子水平鑒別病理乳腺與正常乳腺的區(qū)別，惡性腫瘤細(xì)胞密度增高，水分子活動(dòng)受限，細(xì)胞外容積降低，可使得ADC下降[20]。有研究表明ADC值是MRI信號(hào)衰減的量化值，能反映腫瘤組織中水分子的彌散運(yùn)動(dòng)和組織的微循環(huán)血流灌注情況[21-22]。本研究顯示癌組織的ADC值低于癌旁組織。主要在于腫瘤細(xì)胞密度與ADC值呈負(fù)相關(guān)，細(xì)胞密度越高，ADC值越低。也有研究發(fā)現(xiàn)DWI較常規(guī)T2WI序列多發(fā)現(xiàn)7個(gè)病灶，表明DWI較常規(guī)序列具有更高的敏感性和特異性[23-24]。

MRI T2WI信號(hào)可以同時(shí)觀察病灶的內(nèi)部情況、病灶的邊緣以及周圍的淋巴結(jié)，結(jié)合DWI技術(shù)更加具有高度敏感性與特異性[25]。Ki-67的表達(dá)是判斷乳腺癌病情的重要指標(biāo)，Ki-67表達(dá)也可預(yù)測(cè)乳腺癌的預(yù)后療效[26]。本研究顯示在癌組織中，Spearman相關(guān)性系數(shù)分析顯示T2WI高信號(hào)與Ki-67陽性率呈正相關(guān)，與ADC值呈負(fù)相關(guān)，多因素分析T2WI高信號(hào)、ADC值也為影響Ki-67陽性率的危險(xiǎn)因素。乳腺組織T2WI信號(hào)表現(xiàn)不均勻，可表現(xiàn)為不均勻高信號(hào)，也可表現(xiàn)為等信號(hào)，而乳腺癌病灶多數(shù)表現(xiàn)為均勻高信號(hào)，T2WI高信號(hào)可作為判斷惡性的一個(gè)指標(biāo)。Ki-67高表達(dá)的乳腺癌中腫瘤細(xì)胞增殖明顯，病灶內(nèi)水分子彌散受限，ADC值降低[27-28]。不過Ki-67的表達(dá)與T2WI信號(hào)、ADC值的不確定性關(guān)系可能與多種因素相關(guān)，病例數(shù)較少、病理類型較局限均可影響觀察結(jié)果，將在下一步進(jìn)行深入分析。

總之，乳腺癌病灶MRI T2WI信號(hào)特征多表現(xiàn)為高信號(hào)，Ki-67呈現(xiàn)高陽性率表達(dá)，伴隨有ADC值下降，存在相關(guān)性，T2WI信號(hào)特征對(duì)乳腺癌的篩查及預(yù)后判斷有積極作用。