增殖性抗原Ki—67在評(píng)價(jià)子宮頸浸潤(rùn)性與非浸潤(rùn)性病變中的臨床意義

王乃峰

【摘要】 目的 探討增殖性抗原Ki-67在評(píng)價(jià)子宮頸浸潤(rùn)性與非浸潤(rùn)性病變中的臨床意義。

方法 經(jīng)手術(shù)切除或組織活檢經(jīng)病理檢查確診的宮頸上皮內(nèi)瘤變標(biāo)本42例、浸潤(rùn)癌標(biāo)本36例及正常宮頸正常黏膜上皮組織標(biāo)本20例作為研究對(duì)象， 檢測(cè)上述標(biāo)本的Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)情況。結(jié)果 Ki-67在

宮頸正常黏膜上皮組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)）及浸潤(rùn)癌標(biāo)本中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為10.0%、 30.0%、43.8%、81.3%、100.0%；宮頸上皮內(nèi)瘤變（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)）的Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于正常黏膜上皮組織， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）， 浸潤(rùn)癌標(biāo)本中的Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于宮頸上皮內(nèi)瘤變（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)）， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；在臨床分期中， Ki-67在Ⅰa～Ⅰb及Ⅱa～Ⅱb中>++的陽(yáng)性表達(dá)率分別為70.6%、94.7%；Ki-67在Ⅱa～Ⅱb中的>++陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于Ⅰa～Ⅰb， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在病理分級(jí)中， Ki-67在G1、G2、G3中>++的陽(yáng)性表達(dá)率分別為60.0%、90.0%、100.0%；Ki-67在G2、G3中的>++陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于G1， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；G2、G3中Ki-67 >++的陽(yáng)性表達(dá)率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論 Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)情況在評(píng)價(jià)子宮頸上皮增生程度及浸潤(rùn)性病變發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有著重要的臨床意義。

【關(guān)鍵詞】 宮頸上皮增生；浸潤(rùn)性病變；非浸潤(rùn)性病變；Ki-67

DOI：10.14163/j.cnki.11-5547/r.2018.15.037

宮頸癌在女性惡性腫瘤中發(fā)生率較高， 而宮頸上皮內(nèi)瘤變與宮頸癌的發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切[1]。同時(shí)， 還有文獻(xiàn)報(bào)道稱， 宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變的發(fā)生發(fā)展與多種基因的異常存在某些聯(lián)系[2]。有研究表明增殖性抗原Ki-67能夠反映細(xì)胞增殖活性程度， 從而在對(duì)某些腫瘤的良惡性判斷中具有一定的價(jià)值[3]。為進(jìn)一步評(píng)價(jià)增殖性抗原Ki-67在評(píng)價(jià)宮頸浸潤(rùn)性與非浸潤(rùn)性病變中的臨床意義， 本文研究中對(duì)本院收集的宮頸正常黏膜上皮、宮頸上皮內(nèi)瘤變及浸潤(rùn)癌標(biāo)本檢測(cè)Ki-67， 并對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析， 現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1. 1 材料 收集本院病理科2012年10月～2016年8月經(jīng)手術(shù)切除或組織活檢經(jīng)病理檢查確診的宮頸上皮內(nèi)瘤變標(biāo)本42例， 其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)分別為10、16、16例；浸潤(rùn)癌標(biāo)本36例， 臨床分期：Ⅰa 5例， Ⅰb12例， Ⅱa 11例， Ⅱb 8例；病理分級(jí)：G1級(jí)10例， G2級(jí)20例， G3級(jí)6例。另外選擇正常宮頸正常黏膜上皮組織標(biāo)本20例一并納入研究。

1. 2 方法 標(biāo)本取材后部分置入液氮中快速冰凍， 并保存至-80℃冰箱中， 余標(biāo)本予以10%甲醛固定后進(jìn)行石蠟包埋， 并進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。采用免疫組化（SP法）將組織蠟塊切片， 并置入80℃烤箱中進(jìn)行0.5 h烤片， 在脫水及水化后， 采用微波抗原修復(fù)， 過(guò)氧化酶阻斷劑滅火內(nèi)源性過(guò)氧化物酶活性， 并采用羊血清工作液封閉處理， 并加入兔抗人Id-1多克隆抗體（稀釋比例為1∶50）置入4℃冰箱過(guò)夜， 之后加入生物素標(biāo)記的二抗， 再以磷酸鹽緩沖液進(jìn)行3次沖洗， 采用二氨基聯(lián)苯胺進(jìn)行顯色處理， 并采用蘇木素進(jìn)行復(fù)染， 采用已知的陽(yáng)性組織切片作為陽(yáng)性對(duì)照， 置入顯微鏡下進(jìn)行觀察。其中鼠抗人單克隆Ki-67由北京中杉金橋生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司提供， 氨基聯(lián)苯胺顯色試劑盒由北京索萊寶科技有限公司

提供。

1. 3 診斷標(biāo)準(zhǔn)[4] 顯微鏡下細(xì)胞質(zhì)或細(xì)胞膜中可見(jiàn)黃色顆粒沉著可判斷為細(xì)胞Ki-67陽(yáng)性表達(dá)， 每張切片均選取5個(gè)高倍視野， 對(duì)每個(gè)視野下細(xì)胞Ki-67陽(yáng)性的百分率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)并計(jì)算平均數(shù)， 其中無(wú)染色細(xì)胞或染色細(xì)胞數(shù)<10%為陰性（-）， 染色細(xì)胞數(shù)10%～25%為弱陽(yáng)性（+）， 染色細(xì)胞數(shù)25%～50%為中陽(yáng)性（++）， 染色細(xì)胞數(shù)>50%為強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。

1. 4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P<0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2. 1 Ki-67在宮頸正常黏膜上皮組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變及浸潤(rùn)癌標(biāo)本中的陽(yáng)性表達(dá)情況 Ki-67在宮頸正常黏膜上皮組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)）及浸潤(rùn)癌標(biāo)本中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為10.0%、 30.0%、43.8%、81.3%、100.0%；宮頸上皮內(nèi)瘤變（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)）的Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于正常黏膜上皮組織， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；浸潤(rùn)癌標(biāo)本中的Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于宮頸上皮內(nèi)瘤變（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)）， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。見(jiàn)表1。

2. 2 Ki-67表達(dá)在不同宮癌臨床分期級(jí)病理分級(jí)的陽(yáng)性表達(dá)情況 在臨床分期中， Ki-67在Ⅰa～Ⅰb及Ⅱa～Ⅱb中>++的陽(yáng)性表達(dá)率分別為70.6%、94.7%；Ki-67在Ⅱa～Ⅱb中的>++陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于Ⅰa～Ⅰb， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在病理分級(jí)中， Ki-67在G1、G2、G3中>++的陽(yáng)性表達(dá)率分別為60.0%、90.0%、100.0%；Ki-67在G2、G3中的>++陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于G1， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；G2、G3中Ki-67 >++的陽(yáng)性表達(dá)率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。見(jiàn)表2。

3 討論

子宮頸癌的發(fā)病機(jī)制較為復(fù)雜， 屬于一個(gè)多步驟、多因素、多階段及多種癌基因和抑癌基因共同參與的病理過(guò)程[5]。其在組織學(xué)最常見(jiàn)的類型為鱗狀細(xì)胞癌， 其發(fā)病從宮頸上皮內(nèi)瘤變發(fā)展為浸潤(rùn)性癌屬于一個(gè)連續(xù)發(fā)展的過(guò)程[6]， 但子宮頸癌發(fā)病較為隱匿且發(fā)展較慢， 在患病早期， 患者無(wú)明顯臨床表現(xiàn)， 所以尋找宮頸癌前病變的標(biāo)記物對(duì)宮勁癌的預(yù)防有著重要的意義， 對(duì)該病進(jìn)行盡早的篩查及診斷， 從而能盡早的該病進(jìn)行治療， 從而改善患者預(yù)后情況。

Ki-67在上個(gè)世紀(jì)80年代被發(fā)現(xiàn)于增殖細(xì)胞中的一種核抗原， 與細(xì)胞增殖存在密切的關(guān)聯(lián)， 能夠?qū)δ[瘤細(xì)胞的增殖活性進(jìn)行反應(yīng)[7]。有文獻(xiàn)表明， Ki-67的表達(dá)和多種腫瘤細(xì)胞的發(fā)生發(fā)展、浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移存在一定的關(guān)系[8， 9]。還有研究顯示， 多種腫瘤及癌前病變中均存在Ki-67過(guò)度陽(yáng)性表達(dá)情況[10]。本文研究結(jié)果顯示， Ki-67在宮頸正常黏膜上皮組織、宮頸上皮內(nèi)瘤變（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)）及浸潤(rùn)癌標(biāo)本中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為10.0%、 30.0%、43.8%、81.3%、100.0%；宮頸上皮內(nèi)瘤變（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)）的Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率均顯著高于正常黏膜上皮組織， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；浸潤(rùn)癌標(biāo)本中的Ki-67陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于宮頸上皮內(nèi)瘤變（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ級(jí)）， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。 在臨床分期中， Ki-67在Ⅰa～Ⅰb及Ⅱa～Ⅱb中>++的陽(yáng)性表達(dá)率分別為70.6%、94.7%；Ki-67在Ⅱa～Ⅱb中的>++陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于Ⅰa～Ⅰb， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。在病理分級(jí)中， Ki-67在G1、G2、G3中>++的陽(yáng)性表達(dá)率分別為60.0%、90.0%、100.0%；Ki-67在G2、G3中的>++陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于G1， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；G2、G3中Ki-67 >++的陽(yáng)性表達(dá)率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。說(shuō)明隨著宮頸病變的發(fā)展， 其Ki-67水平逐漸上升， 從而表明其細(xì)胞增殖活性逐漸增強(qiáng)。

綜上所述， Ki-67的陽(yáng)性表達(dá)情況在評(píng)價(jià)子宮頸上皮增生程度及浸潤(rùn)性病變發(fā)生發(fā)展過(guò)程中有著重要的臨床意義。

參考文獻(xiàn)

[1] 葉玲. 中晚期宮頸癌調(diào)強(qiáng)放療聯(lián)合同步化療與常規(guī)放療聯(lián)合同步化療臨床療效及不良反應(yīng)對(duì)比觀察. 臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2016， 15（1）：51-54.

[2] 張濤， 毛世華， 唐良萏， 等. 宮頸上皮內(nèi)瘤變及早期宮頸癌組織中P16、HPVL-1殼蛋白的表達(dá)及與HR-HPV載量相關(guān)性研究. 實(shí)用婦產(chǎn)科雜志， 2016， 32（7）：536-539.

[3] 李雯， 馮彥林. SUVmax、Ki-67、p53、EGFR對(duì)三陰性乳腺癌新輔助化療療效的預(yù)測(cè)價(jià)值. 腫瘤防治研究， 2016， 43（1）：45-47.

[4] 赫芳芳， 高英， 魏力， 等. p16、Ki-67在宮頸鱗狀上皮病變分級(jí)診斷中的意義. 現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué)， 2016， 24（8）：1271-1274.

[5] 錢(qián)飚， 魯宏峰， 孫龍， 等. Ki-67的改變與Ⅱ-Ⅲ期浸潤(rùn)性乳腺癌患者化療療效之間的關(guān)系. 中國(guó)生化藥物雜志， 2016（7）：

183-186.

[6] 代艷芬， 滿霞霞， 李佳佳， 等. ER、PR、P53、Ki-67在子宮內(nèi)膜癌組織中的表達(dá)及其臨床意義. 中國(guó)婦幼保健， 2016， 31（8）：

1606-1608.

[7] 魏聰， 劉遠(yuǎn)程， 王友強(qiáng)， 等. 宮頸病變中PCNA、Ki-67的表達(dá)及其與HPV感染的相關(guān)性分析. 中國(guó)婦幼保健， 2015， 30（22）：

3873-3876.

[8] 楊曉琴. 宮頸病變中增殖細(xì)胞核抗原、Ki-67抗原表達(dá)與HPV感染的相關(guān)性. 實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志， 2015， 19（17）：57-60.

[9] 公維國(guó)， 徐金麗. 宮頸病變組織中Ki-67、NF-κB的表達(dá)與HPV感染的相關(guān)性研究. 國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志， 2017， 38（18）：

2576-2578.

[10] 趙建芳， 石芳. 宮頸癌組織PCNA、Ki-67的表達(dá)及其與HPV感染的相關(guān)性研究. 實(shí)用癌癥雜志， 2017（11）：1774-1776.

[收稿日期：2018-01-08]