HPLC法測定飲料中6種鄰苯二甲酸酯類塑化劑

□ 李 雪 懷化市食品藥品檢驗所

近年來食品安全已經(jīng)成為了我國居民高度關(guān)注的問題，但是受到制作工藝的限制，以及不法分子在利欲熏心的欲望促使下，在飲料的生產(chǎn)、包裝、存貯過程中造成鄰苯二甲酸酯類塑化劑的污染[1]。鄰苯二甲酸酯類也被稱為鈦酸酯，工業(yè)上主要利用其來提高塑料制品的韌性和可塑性，從而軟化產(chǎn)品；目前多應(yīng)用于清潔劑、食品包裝材料、個人護(hù)理材料以及玩具等。目前大部分的飲料都使用塑料瓶進(jìn)行存儲，因此在裝瓶、存貯過程中難免會造成鄰苯二甲酸酯類的污染[2]。鄰苯二甲酸酯類具有類似雌激素作用，不僅會造成機(jī)體內(nèi)環(huán)境的紊亂，還會導(dǎo)致機(jī)體出現(xiàn)較為嚴(yán)重的致癌、致畸以及致突變[3]。本研究利用高效液相色譜法（HPLC）飲料中的鄰苯二甲酸酯類進(jìn)行檢測，現(xiàn)將結(jié)果和分析報告如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

日本島津LC-20AT液相色譜儀，及其配套的脫氣機(jī)、四元泵、DAD檢測器和柱溫箱、自動進(jìn)樣器以及Milli-Q型純水機(jī)；采用天津科貝爾Model9960B超聲波清洗器；日本島津ux2200HW/OAC型分析天平；Abel固相萃取裝置以及固相萃取柱（HLB/ODS/Bond Elut，200 mg，3 mL）。

試劑以及標(biāo)準(zhǔn)品：美國Accu Standard公司生產(chǎn)的鄰苯二甲酸二（2-乙基）己酯（DEHP）、鄰苯二甲酸二甲酯（DMP）、鄰苯二甲酸二己酯（DHXP）、鄰苯二甲酸二（2-甲氧基）乙酯（DMEP）、鄰苯二甲酸二（4-甲基-2-戊基）酯（BMPP）、鄰苯二甲酸二丙酯（DPRP）各100 mg。色譜純的甲醇、乙腈溶液，以及電阻值為18.2 MΩ·cm的超純水。

1.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液

精確稱取100 mg鄰苯二甲酸酯溶于甲醇并定容至50 mL，濃度為2.0 mg/mL。再分別吸取上述6種標(biāo)準(zhǔn)鄰苯二甲酸酯類標(biāo)準(zhǔn)液，并相應(yīng)地配制成 0、10、20、40、80、100 mg/L標(biāo)準(zhǔn)使用液，同樣用甲醇定容。

1.3 樣品處理

視飲料樣品類型而定，如含有果肉、纖維或較大顆粒的果汁類飲料則使用雙層濾紙進(jìn)行過濾，并取濾液進(jìn)行浸提實驗；如為蛋白質(zhì)飲料則吸取10 mL并用10%乙酸鋅進(jìn)行蛋白沉淀后再過濾。

1.4 色譜條件

色 譜 柱：Phenomenex C18柱，5 μm，250 mm×4.60 mm。選擇乙腈-水作為流動相并進(jìn)行梯度洗脫，程序如下：0～3 min乙腈-水（V/V，25∶75），3～4 min將乙腈由30%升至35%，4～7 min升至40%，7～15 min升至70%并維持8 min，23～30 min再升至90%并維持10 min，40～50 min升 至100%，50～60 min乙腈濃度則由100%降至25%。檢測器：二極管陣列檢測器，波長230 nm，柱溫40 ℃，流速為1.0 mL/min，進(jìn)樣量 10 μL。

2 結(jié)果

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線、檢出限及圖譜

將標(biāo)準(zhǔn)溶液按照本研究的1.4條件進(jìn)行測定，并以此獲得標(biāo)準(zhǔn)曲線和相關(guān)系數(shù)，結(jié)果顯示相關(guān)系數(shù)均＞0.990，檢出限為0.094～0.241 μg/mL。見表1。飲料中6種鄰苯二甲酸酯類塑化劑的檢測圖譜如圖1所示。

2.2 樣品檢測結(jié)果

按照本研究方法，對市面隨機(jī)抽樣送檢的6類不同類型的飲料制品，共挑選10個批次進(jìn)行測定。結(jié)果顯示僅奶制品飲料和果汁飲料中出現(xiàn)DEHP，其他鄰苯二甲酸酯類物質(zhì)均未被檢出。具體見表2。

表1 飲料中6種鄰苯二甲酸酯類塑化劑的標(biāo)準(zhǔn)曲線以及檢出限

圖1 飲料中6種鄰苯二甲酸酯類塑化劑的檢測圖譜

表2 樣品飲料中6種鄰苯二甲酸酯類塑化劑檢測結(jié)果（g/kg）

表3 HPLC法的回收率和精確度

2.3 加樣回收率和精確度

精確稱取不含有被檢測的6種鄰苯二甲酸酯類塑化劑樣品各0.1 g，分布加入到高、中、低三種不同濃度標(biāo)準(zhǔn)混合溶液中，按照本研究所采用的方法進(jìn)行測定，結(jié)果顯示本研究的平均回收率為93.65%～104.89%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.85%～5.22%。具體見表3。

3 討論

本研究中對鄰苯二甲酸酯類在190～400 nm進(jìn)行掃描，結(jié)果顯示230 nm處最為顯著[4]；而在流動相的選擇上無論是純甲醇、純水或純乙腈等皆不能將鄰苯二甲酸酯類進(jìn)行有效分離，故本研究選擇乙腈和水進(jìn)行梯度洗脫，并且在洗脫過程水分逐漸減少因此有利于鄰苯二甲酸酯類的分離。

綜上所述，在檢測飲料類物品中鄰苯二甲酸酯類塑化劑時，高效液相色譜法具有高靈敏度和準(zhǔn)確性，而且操作便捷且耗時短，因此值得廣泛應(yīng)用。