Sysmex異常嗜酸性粒細(xì)胞散點(diǎn)圖篩檢瘧原蟲(chóng)感染的探討

幸娟霞 張麟燕 劉琪 彭軍容 羅國(guó)霞 施迎春 王村建（通訊作者）

（1重慶市涪陵中心醫(yī)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)科 重慶 408000）

（2重慶市涪陵中心醫(yī)院耳鼻喉科 重慶 408000；3重慶市涪陵區(qū)疾控中心 重慶 408000）

SysmexXE-2100為普遍使用的血細(xì)胞分析儀，具有CBC、CBC+DIFF、RET等通道模式。它與很多血細(xì)胞分析儀同樣雖不能很正確識(shí)別異常細(xì)胞，但能提示較可靠的報(bào)警信息，檢驗(yàn)者可據(jù)信息推片復(fù)檢，核對(duì)其準(zhǔn)確性。我科對(duì)300例儀器提示嗜酸增高樣本中發(fā)現(xiàn)4例報(bào)警信息與鏡檢結(jié)果不一致，最后分析散點(diǎn)圖特征，并結(jié)合儀器原理和鏡下紅細(xì)胞形態(tài)，最終發(fā)現(xiàn)瘧原蟲(chóng)感染。

1.材料和方法

1.1 材料

1.1.1 儀器和試劑

（1）血細(xì)胞分析儀：日本Sysmex XE-2100血細(xì)胞分析儀，采用核酸熒光染色技術(shù)（DIFF通道）和激光流式分析技術(shù)（WBC/BASO通道）雙方法檢測(cè)WBC總數(shù)和分類(lèi)，該儀器用側(cè)向散射光(SSC，細(xì)胞內(nèi)容物復(fù)雜程度)和側(cè)向熒光強(qiáng)度(SFL，細(xì)胞內(nèi)RNA和DNA含量)行WBC分類(lèi)計(jì)數(shù)。同時(shí)在溶血素中加入大分子有機(jī)酸，讓有機(jī)酸特異性結(jié)合到EO顆粒上，以增加EO內(nèi)容物的復(fù)雜性，從而達(dá)到區(qū)分EO的目的[1]。

試劑、校準(zhǔn)品、質(zhì)控品：Sysmex公司原裝配套產(chǎn)品。

（2）顯微鏡Olympus BX41；BASO劉氏染色液。制片按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》第4版執(zhí)行[2]。

1.1.2 病例及樣本 2016年1月—2017年6月，EO異常的門(mén)診和住院患者300例；其中瘧原蟲(chóng)感染者：男4例，45～49歲，平均年齡46.5歲，均為重慶本地人，均有境外工作或居住史，因發(fā)熱、寒戰(zhàn)、畏寒等就診。

1.2 方法

（1）血細(xì)胞分析儀檢測(cè) 用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA—K2)抗凝真空管，采集2mL靜脈血充分混勻，于抽血后1h內(nèi)用XE-2100上機(jī)檢測(cè)。儀器按期校正，每日室內(nèi)質(zhì)控，雙水平；運(yùn)行良好。

（2）鏡檢 儀器示EO增高或異常報(bào)警的樣本，制備合格的血涂片，用劉氏染液染色鏡檢復(fù)核。若出現(xiàn)鏡檢與儀器結(jié)果不一致時(shí)，觀察RBC形態(tài)查找瘧原蟲(chóng)。

2.結(jié)果

2.1 血細(xì)胞分析儀

XE-2100檢測(cè)300例EO增高樣本中，4例鏡檢與儀器不符，占1.3%，查看WBC散點(diǎn)圖，發(fā)現(xiàn)異常，細(xì)看散點(diǎn)圖上EO與中性粒細(xì)胞間距變小，緊密連接，表現(xiàn)為EO假性增高（瘧疾感染者）。

2.2 鏡檢結(jié)果

4例瘧疾感染者鏡檢示EO均正常，同時(shí)RBC內(nèi)見(jiàn)瘧原蟲(chóng)裂殖體、配子體或滋養(yǎng)體。檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表。

表 4例瘧原蟲(chóng)樣本血液學(xué)檢測(cè)結(jié)果

3.討論

Sysmex XE-2100血液分析儀功能齊全，應(yīng)用廣泛，能對(duì)異常信息提示，在總300例EO增高患者中，4例瘧原蟲(chóng)感染樣本的儀器信息提示與鏡檢不一致，其散點(diǎn)圖示EO與中性粒細(xì)胞間緊密連接，而余296例散點(diǎn)圖無(wú)明顯異常。分析原因可能為：該XE-2100 WBC分類(lèi)計(jì)數(shù)原理是利用SSC和SFL，而瘧原蟲(chóng)感染的主要發(fā)病原因在于紅細(xì)胞內(nèi)瘧原蟲(chóng)裂解增值，瘧原蟲(chóng)感染RBC消化Hb后產(chǎn)生瘧色素，為一種雙折光晶體，當(dāng)RBC破裂，瘧色素釋放出來(lái)被WBC所吞噬[3-5]，吞噬了瘧色素的WBC側(cè)射光強(qiáng)度發(fā)生改變，顯示在EO散點(diǎn)圖區(qū)域略左側(cè)，故儀器上此類(lèi)樣本被誤認(rèn)EO增高，造成EO+比值增高假象；而現(xiàn)實(shí)正常EO增高與假性EO增高的散點(diǎn)位置有差異，余296例為真性EO增多，顯示為正常散點(diǎn)圖。

回顧總結(jié)，雖然此類(lèi)瘧原蟲(chóng)標(biāo)本僅占標(biāo)本總量的1.3%，工作中在儀器報(bào)警提示與鏡檢不符時(shí)，不能就輕易認(rèn)可報(bào)警信息而不查找真正原因，應(yīng)嚴(yán)格認(rèn)真執(zhí)行復(fù)檢流程。其次需要對(duì)儀器工作原理掌握，重視各種報(bào)警信息含義，才能明確引起異常報(bào)警的真正原因。所以在工作中使用SysmexXE-2100時(shí)，認(rèn)識(shí)“特征性”的散點(diǎn)圖篩檢瘧原蟲(chóng)有很好的臨床價(jià)值，但僅用于過(guò)篩并不能確認(rèn)瘧原蟲(chóng)類(lèi)別，需進(jìn)一步鏡下確認(rèn)。鑒于病例數(shù)有限，仍待進(jìn)一步累積病例，證實(shí)感染瘧原蟲(chóng)的“特征性”散點(diǎn)圖。