維生素K1與白族老年白內(nèi)障手術(shù)率的相關(guān)性分析

劉黎敏 劉龍飛

老年性白內(nèi)障是眼晶狀體出現(xiàn)進(jìn)行性氧化、斷裂、交聯(lián)，不溶性蛋白質(zhì)增加、黃色素沉著的結(jié)果，是導(dǎo)致失明的主要原因之一[1]。多項(xiàng)研究指出[2-4]，正常情況下晶狀體內(nèi)存在抗氧化系統(tǒng)，如超氧化物歧化酶、過(guò)氧化氫酶、還原型谷胱甘肽及抗氧化微量元素，但隨著機(jī)體衰老，進(jìn)行性氧化使晶狀體及房水中的自由基增多，打破了自由基-抗氧化動(dòng)態(tài)平衡。日常飲食顯著影響機(jī)體自由基清除能力。維生素C、維生素E、鋅、硒等元素能夠減緩白內(nèi)障病癥[5]。然而，維生素K1在白內(nèi)障防治方面的研究鮮有報(bào)道。維生素K1具有抗炎和抗氧化的特性，且可提高胰島素敏感性，減少糖尿病眼部并發(fā)癥。因此，本文前瞻性研究維生素K1與白內(nèi)障手術(shù)率之間的關(guān)系，為進(jìn)一步研究白內(nèi)障防治提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料前瞻性選取2014年2月至2015年12月大理市第二人民醫(yī)院視光學(xué)門診確診的大理白族老年性白內(nèi)障初期患者 391例作為研究對(duì)象，其中男126例（32.25%），女265例（67.75%），年齡60～70歲，平均（66±3）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①矯正視力0.5～0.7；②晶狀體輕度不均勻渾濁。排除標(biāo)準(zhǔn)：①外傷性白內(nèi)障；②眼內(nèi)手術(shù)后出現(xiàn)的白內(nèi)障；③合并角膜疾病、葡萄膜炎、眼外傷、眼底病。所有患者均簽署了知情同意書。

1.2 分組及飲食干預(yù)391例患者納入研究前1周，采用高效液相色譜法（HPLC）檢測(cè)日均維生素 K1血漿水平，兩組無(wú)顯著差異。隨機(jī)分為對(duì)照組患者195例和研究組患者196例。推薦兩組患者日常多食用菜花、甘藍(lán)、萵苣、菠菜、蕪菁葉、紫花苜蓿、豌豆、香菜、家畜肝臟、蛋黃、羊奶、乳酪（乳扇）等食物。對(duì)照組患者給予日常飲食，研究組在日常飲食的基礎(chǔ)上加服維生素K1片（成都倍特藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，批準(zhǔn)文號(hào)：國(guó)藥準(zhǔn)字H10920012，批號(hào)：20150607，規(guī)格：10 mg×20片/盒），口服10 mg，每日1次。隨訪時(shí)間為24個(gè)月，在此期間患者失訪或死亡，即可終止該患者隨訪。

1.3 臨床檢測(cè)指標(biāo)

1.3.1 采血每月采集外周靜脈血 3 ml，置于不含抗凝劑離心管中，以2000 r/min離心5 min（離心半徑為4 cm），取血清置于EP管中，冷藏待檢。

1.3.2 血漿樣品處理人血漿樣品40 μl，加入維生素K1對(duì)照品溶液40 μl（CAS：84-80-0），以2000 r/min離心2 min（離心半徑4 cm），加入500 μl乙腈沉淀蛋白，2000 r/min離心2 min（離心半徑4 cm），取上清液 20 μl。

1.3.3 HPLC檢測(cè)條件C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：無(wú)水乙醇∶石油醚=95:5；檢測(cè)波長(zhǎng)254 nm；流速 1.5 ml/min；柱溫30℃；進(jìn)樣量20 μl。

1.4 觀察指標(biāo)兩組患者自2016年1月至2017年12月定期采血檢驗(yàn)，每月采用HPLC檢測(cè)維生素K1血漿水平，并統(tǒng)計(jì)每月各組白內(nèi)障手術(shù)。多變量Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型分析維生素K1水平與白內(nèi)障手術(shù)率相關(guān)性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用SPSS 19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型計(jì)算組間HR值。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者基線資料比較兩組患者一般特征比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組基線維生素K1水平及其他特征見(jiàn)表1。

表1 兩組患者基線維生素K1攝入量及其他特征比較

2.2 隨訪結(jié)果隨訪24個(gè)月，失訪194例，有效數(shù)據(jù)197例。對(duì)照組95例，研究組102例。其中，男性87例（44.16%），女性110例（55.84%），白內(nèi)障手術(shù)77例（36.09%）。

HPLC檢測(cè)血漿維生素K1水平，取均值作為最終血漿水平。研究組患者血漿維生素K1水平高于對(duì)照組，白內(nèi)障手術(shù)率顯著低于對(duì)照組（HR：0.71；95%CI：0.58～0.88；P=0.002），多變量 Cox模型分析結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 多變量Cox模型評(píng)估維生素K1與白內(nèi)障手術(shù)率的相關(guān)性

3 討論

白內(nèi)障是一種晶狀體渾濁所致老年眼科疾病。正常狀態(tài)下，晶狀體含有較高水平的可溶性蛋白和強(qiáng)大的抗氧化系統(tǒng)[6]。然而，在人體衰老過(guò)程中，糖尿病和眼部炎癥等多種疾病均可破壞晶狀體抗氧化系統(tǒng)，晶狀體蛋白受到轉(zhuǎn)錄后修飾的影響，抗氧化系統(tǒng)受到損傷[7]。自由基增多，并與晶狀體細(xì)胞接觸，發(fā)生過(guò)氧化反應(yīng)，破壞細(xì)胞膜脂質(zhì)雙層結(jié)構(gòu)。膜的通透性和完整性被改變，晶狀體內(nèi)不可溶性蛋白增多；此外，晶狀體細(xì)胞膜氧化受損后，導(dǎo)致細(xì)胞膜鈣離子通道活性改變，鈣離子大量?jī)?nèi)流，晶狀體變?yōu)榛鞚?，?dǎo)致白內(nèi)障的發(fā)生[8]。

多項(xiàng)流行病學(xué)研究表明，營(yíng)養(yǎng)性抗氧化劑能夠控制老年性白內(nèi)障的發(fā)展。熊正英[9]研究發(fā)現(xiàn)，人體內(nèi)過(guò)氧化狀態(tài)與白內(nèi)障發(fā)生有關(guān)，氧自由基損傷是老年性白內(nèi)障的首要危險(xiǎn)因素。Sasikala等[10]研究發(fā)現(xiàn)，蘆丁可通過(guò)增強(qiáng) α-晶狀體蛋白，改善自由基介導(dǎo)的白內(nèi)障。Ibarrola-Jurado等[11]經(jīng)過(guò)5年的隨訪研究，發(fā)現(xiàn)飲食維生素K1的攝入量與2型糖尿病有關(guān)。隨訪期間，增加維生素K1攝入量，糖尿病患病率降低51%。Manna等[12]研究發(fā)現(xiàn)，維生素K1攝入量與胰島素敏感性有關(guān)。Sai Varsha等[13]對(duì)糖尿病大鼠研究發(fā)現(xiàn)，維生素 K1可以降低血液和晶狀體葡萄糖濃度，晶狀體山梨醇水平隨之降低，有助于預(yù)防白內(nèi)障。

本研究初步分析了白族老年患者血漿維生素 K1水平與白內(nèi)障手術(shù)率之間的關(guān)系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，攝入更多的維生素K1可以降低白內(nèi)障手術(shù)率。兩組患者基線維生素K1無(wú)差異，且糖尿病患者數(shù)量近似，然而研究組患者攝入較多維生素K1后，血漿維生素K1水平存在組間差異，且白內(nèi)障手術(shù)率低于對(duì)照組，推測(cè)一方面維生素K1降低晶狀體葡萄糖水平，晶狀體山梨醇水平降低；另一方面，晶狀體鈣穩(wěn)態(tài)對(duì)于維持晶狀體的透明度和澄明度至關(guān)重要。晶狀體鈣穩(wěn)態(tài)受到Ca2+-ATP酶調(diào)節(jié)。白內(nèi)障患者晶狀體氧化，使得Ca2+-ATP酶中-SH被氧化，抑制Ca2+-ATP酶的活性，無(wú)法泵出晶狀體內(nèi)的高濃度Ca2+。H2O2也會(huì)加劇氧化失活狀態(tài)。維生素K1能夠挽救晶狀體鈣蛋白酶的活性，抑制O2-和OH-自由基的生成，并提高眼睛晶狀體內(nèi)還原性谷胱甘肽水平，使晶體內(nèi)滲透壓降低，內(nèi)外滲透壓平衡，減少晶體纖維的水化、腫脹和水泡，從而減輕晶狀體渾濁[11]，最終減緩了老年性白內(nèi)障的發(fā)展。

本研究隨訪時(shí)間較短，樣本數(shù)量有限，建議后續(xù)進(jìn)行采用多中心、長(zhǎng)期隨訪研究。此外，雖然校正了 Cox模型，但無(wú)法完全避免混雜因素的影響，如社會(huì)經(jīng)濟(jì)地位。最后，性別是否影響白內(nèi)障手術(shù)率，也將是今后研究的方向之一。

綜上所述，增加維生素K1攝入量可以降低白族老年性白內(nèi)障患者的手術(shù)率。