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    兩種試劑盒分別檢測豬口蹄疫O型、A型疫苗抗體的對比試驗

    2018-08-15 00:45:12楊虹吳聰
    獸醫(yī)導刊 2018年15期
    關鍵詞:O型口蹄疫A型

    楊虹 吳聰

    1.南昌市動物疫病預防控制中心 2.江西農(nóng)業(yè)大學動物科技學院

    口蹄疫是由口蹄疫病毒引起偶蹄動物的一種急性、高度接觸性傳染病,被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)和聯(lián)合國糧農(nóng)組織(FAO)列為A類烈性傳染病,我國將其列為一類動物傳染病??谔阋咴谑澜缟显S多國家地區(qū)都有發(fā)生和流行,對各國養(yǎng)殖業(yè)造成巨大經(jīng)濟損失。目前,發(fā)達國家控制口蹄疫主要采取撲殺、無害化處理等措施。我國采取以疫苗強制免疫為主的綜合措施來防控口蹄疫,主要是通過疫苗免疫使動物產(chǎn)生抵抗該病的有效抗體,以達到預防的目的。疫苗免疫后抗體水平檢測是評價疫苗免疫效果最簡單最直接的方法。

    2018年以前,我國對豬一直進行O型口蹄疫的強制免疫,但根據(jù)農(nóng)醫(yī)發(fā)[2018]1號文件“農(nóng)業(yè)部關于印發(fā)《2018年國家動物疫病強制免疫計劃》的通知”各省自行確定對豬進行A型口蹄疫的強制免疫。因此,本檢測室使用VP1-ELISA和SPC-ELISA兩種檢測試劑盒分別對豬口蹄疫O型、A型二價疫苗免疫抗體進行了免疫效果的對比試驗。

    一、材料與方法

    1.疫苗種類。豬口蹄疫O型、A型二價疫苗,國內(nèi)某生物制品公司生產(chǎn)。

    2.血清樣品背景。血清來自本市一個接種豬口蹄疫O型、A型二價疫苗的規(guī)?;i場,隨機從一次免疫后28天的豬群中采集30份血樣。

    3.檢測試劑盒。(1)豬口蹄疫O型病毒VP1結構蛋白抗體ELISA診斷試劑盒(VP1-ELISA):批號20180302,購自鄭州中道生物技術有限公司;豬口蹄疫A型病毒VP1結構蛋白抗體ELISA診斷試劑盒(VP1-ELISA):批號20171001,購自鄭州中道生物技術有限公司;(2)口蹄疫病毒O型特異性抗體固相競爭ELISA(SPCE)檢測試劑盒(SPC-ELISA):批號PIO 20/2017,購自IZSLER(意大利進口);口蹄疫病毒A型特異性抗體固相競爭ELISA(SPCE)檢測試劑盒(SPC-ELISA):批號PIA 4/2017,購自IZSLER(意大利進口)。

    4.檢測方法。采集的30份豬血液樣品經(jīng)4℃,3 000 r/min離心3 min后取上清液,按試劑盒使用說明書進行檢測。

    5.結果判定。VP1-ELISA診斷試劑盒O型被檢樣品OD450值≥Cut Off值0.2842則判為陽性,<Cut Off值0.2842則判為陰性;A型被檢樣品S/P值≥0.3判為陽性,被檢樣品S/P值<0.3判為陰性。SPCELISA檢測試劑盒O型阻斷率≥50%判為陽性,<50%判為陰性。SPC-ELISA檢測試劑盒A型阻斷率≥50%判為陽性,<50%判為陰性。

    二、結果

    1.抗體檢測合格率。使用VP1-ELISA診斷試劑盒檢測O型、A型口蹄疫抗體合格率分別為86.67%、80.00%,使用SPC-ELISA檢測試劑盒檢測O型、A型口蹄疫抗體合格率分別為90.00%、83.33%(表1)。

    表1 兩種試劑盒檢測抗體合格率

    2.抗體檢測離散度。使用VP1-ELISA診斷試劑盒檢測O型、A型抗體水平離散度分別為51.57%、62.85%;SPC-ELISA檢測試劑盒檢測O型、A型抗體水平離散度分別為41.10%、43.59%(表2)。

    表2 兩種試劑盒檢測抗體離散度

    3.兩種試劑盒符合率。使用SPC-ELISA檢測試劑盒檢測O型、A型的合格樣品中各有1份樣品為VP1-ELISA診斷試劑盒檢測的不合格樣品,二者檢測結果相差不大,符合率達96.67%(表3)。

    表3 兩種試劑盒檢測結果符合率

    三、結果分析

    1.此次使用兩種口蹄疫檢測試劑盒分別檢測O型、A型抗體合格率均在90%以下,影響疫苗免疫抗體合格率高低的因素較多,部分豬抗體不合格可能與豬只健康狀況、母源抗體干擾、免疫程序不合理、疫苗保存使用不當、接種操作不規(guī)范等因素有關。建議首次免疫后28 d加強免疫一次,使抗體不合格的或低抗體水平的豬只抗體水平達到較高的抗體水平,進而達到更好的免疫效果。

    2.抗體水平離散度越小,說明抗體整齊度越高,VP1-EISA診斷試劑盒和進口SPC-ELISA檢測試劑盒檢測口蹄疫O型抗體水平離散度小于A型抗體水平離散度,表明O型抗體水平整齊度較A型抗體水平整齊。主要原因有三個,一是疫苗中O型、A型抗原的含量有差異,O型的抗原含量比A型高;二是如果O型和A型的抗原含量一致,那么就說明O型抗原的免疫原性比A型強;三是母源抗體的干擾,仔豬免疫前如果母源抗體水平高,對首次免疫的疫苗有一定的拮抗作用。

    3.試劑盒檢測結果的準確性和試劑盒的敏感性有直接的關系,從兩種試劑盒的符合率可以看出,國產(chǎn)VP1-ELISA診斷試劑盒和進口SPC-ELISA檢測試劑盒都可以用來評價豬口蹄疫O型、A型二價疫苗免疫后抗體水平,兩種試劑盒的敏感性差異不大。但從檢測效率考慮,建議使用VP1-ELISA診斷試劑盒進行檢測,此種試劑盒操作起來方便,省時省力。

    4.根據(jù)農(nóng)醫(yī)發(fā)[2018]1號文件“農(nóng)業(yè)部關于印發(fā)《2018年國家動物疫病強制免疫計劃》的通知”各省自行確定對豬進行A型口蹄疫的強制免疫,因此從國家政策方面考慮,豬場不但要重視O型口蹄疫的免疫,還要重視A型口蹄疫的免疫,同時免疫后要加強O型、A型抗體的檢測,從檢測數(shù)據(jù)評價免疫密度和抗體水平,正確評估豬群抵抗口蹄疫病毒的能力。

    參考文獻(略)

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