高良姜正丁醇萃取部位化學(xué)成分研究△

魏娜，王勇，魏晴，張旭光，張俊清，黃艷

(1.海南醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，海南 海口 571199；2.海南省藥用植物研究與開發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，海南 海口 571199)

高良姜為姜科山姜屬多年生草本植物高良姜AlpiniaofficinarumHance的干燥根莖，別名高涼姜、良姜、小良姜、佛手根等，始載于《名醫(yī)別錄》，歷版《中華人民共和國藥典》均有收載。主產(chǎn)于廣東、廣西、海南等省區(qū)，是“十大廣藥”之一，也是海南省重要的南藥品種之一。高良姜味辛，性熱，歸脾、胃經(jīng)，具有溫胃止嘔、散寒止痛的功能，用于脘腹冷痛、胃寒嘔吐、噯氣吞酸[1]。由于高良姜為脾胃疾病的常用藥之一，對(duì)其化學(xué)成分研究較多，但多集中在其黃酮、二芳基庚烷及揮發(fā)油等小極性成分的研究上[2]，往往忽略了其中極性較大部位的化學(xué)成分分離。高良姜中極性較大的成分類型主要有糖苷類和苯丙素類化合物[2-3]。本研究對(duì)高良姜正丁醇萃取部位進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分分離，從中分離得到8個(gè)化合物，其中2個(gè)化合物為首次從山姜屬植物中分離得到，3個(gè)化合物為首次從該植物中分離得到，本研究為該資源的進(jìn)一步研究與開發(fā)提供了重要的物質(zhì)基礎(chǔ)。

1 儀器和材料

AV-400型核磁共振儀(瑞士Bruker公司)；島津(LC-8A制備液相系統(tǒng))；ODS(40-75 μm，日本富士公司)；Sephadex LH-20(瑞典GE公司)；氘代試劑(美國CIL公司)；柱色譜硅膠(青島海洋化工廠，200～300，300～400目)；薄層色譜硅膠板(青島海洋化工廠)；乙腈、甲醇(色譜純，Honeywell公司)；其余試劑均為分析純(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)。

高良姜于2014年12月采于海南省臨高縣，經(jīng)海南醫(yī)學(xué)院生藥教研室曾念開教授鑒定為姜科(Zingiberacea)山姜屬(Alpinia)植物高良姜AlpiniaofficiniarumHance的干燥根莖。原植物標(biāo)本(HY2015012237)保存于海南醫(yī)學(xué)院藥物化學(xué)教研室。

2 提取和分離

將高良姜干燥根莖的粗粉8.0 kg用70%乙醇水回流提取3次，每次3 h，濾過，合并乙醇液，減壓回收，醇提物加水混懸后依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇反復(fù)萃取，得正丁醇萃取物79.65 g。將正丁醇萃取物經(jīng)常壓硅膠柱色譜，以三氯甲烷-甲醇溶劑系統(tǒng)梯度洗脫，TLC檢測(cè)，合并相同組分，再反復(fù)經(jīng)硅膠柱色譜及凝膠柱色譜得到化合物1-8。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：無色結(jié)晶(CHCl3-CH3OH)，mp 150～151 ℃，Molish反應(yīng)陽性，ESI-MSm/z235[M-H]-1。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：4.23(1H，d，J=6.4 Hz，H-3)，3.73(1H，dd，J=3.5，9.8 Hz，H-6a)，3.66(1H，m，H-5)，3.60(1H，dd，J=3.4，9.6 Hz，H-4)，3.56(1H，d，J=11.2 Hz，H-1a)，3.52(1H，d，J=11.5 Hz，H-1b)，3.47(1H，dd，J=1.2，11.3 Hz，H-6b)，3.39(2H，m，CH2-7)，1.45(2H，m，CH2-8)，1.33(2H，m，CH2-8)，0.88(3H，t，J=7.3 Hz)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：100.3(C-2)，69.5(C-5)，69.3(C-3)，68.9(C-4)，63.6(C-6)，62.2(C-1)，31.9(C-8)，19.0(C-9)，13.8(C-10)。將化合物1的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)比對(duì)，最終鑒定其為正丁基-β-D-吡喃果糖苷[4]。

化合物2：白色粉末(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ：2.10(1H，m，H-2)，1.47(1H，m，H-2)，4.35(1H，d，J=13.0 Hz，H-3)，2.38(1H，m，H-4)，1.46(1H，m，H-4)，5.83(1H，s，H-8)，2.19(3H，s，H-10)，1.38(3H，s，H-11)，1.16(3H，s，H-12)，1.39(3H，s，H-13)，4.45(1H，d，J=7.8 Hz，H-1′)，3.16(1H，m，H-2′)，3.88(1H，dd，J=3.2，12.0 Hz，H-6′)，3.67(1H，dd，J=4.8，12.0 Hz，H-6′)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：37.2(C-1)，46.8(C-2)，72.7(C-3)，48.2(C-4)，72.5(C-5)，120.2(C-6)，201.0(C-7)，101.3(C-8)，211.6(C-9)，26.7(C-10)，29.6(C-11)，32.4(C-12)，31.0(C-13)，102.9(C-1′)，75.3(C-2′)，78.3(C-3′)，71.8(C-4′)，78.1(C-5′)，62.9(C-6′)。將化合物2的NMR譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)比對(duì)，最終鑒定其為省沽油紫羅苷D[5]，為從高良姜中首次分離得到。

化合物3：淡黃色粉末(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ：7.59(1H，d，J=2.0 Hz，H-2′)，7.58(1H，dd，J=2.0，9.2 Hz，H-6′)，6.84(1H，d，J=9.2 Hz，H-5′)，6.40(1H，d，J=2.0 Hz，H-8)，6.20(1H，d，J=2.0 Hz，H-6)，5.46(1H，d，J=7.2 Hz，H-1″)，3.23～3.76(6H，m，H-2″～6″)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：156.2(C-2)，133.2(C-3)，177.3(C-4)，161.1(C-5)，98.5(C-6)，164.0(C-7)，93.4(C-8)，156.0(C-9)，103.8(C-10)，121.5(C-1′)，115.1(C-2′)，144.7(C-3′)，148.3(C-4′)，116.1(C-5′)，121.0(C-6′)，100.7(C-1″)，74.0(C-2″)，76.4(C-3″)，69.8(C-4″)，77.4(C-5″)，60.8(C-6″)。將化合物3的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)比對(duì)，最終鑒定其為異槲皮苷(isoquercitrin)[6]，為從高良姜中首次分離得到。

化合物4：白色粉末(CH3OH)，ESI-MSm/z301[M+Na]+。1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：7.72(2H，m，H-3，H-6)，7.67(2H，m，H-4，H-5)，4.28(4H，m，H-1′，H-1″)，1.72(4H，m，H-2′，H-2″)，1.47(4H，m，H-3′，H-3″)，0.98(6H，m，H-4′，H-4″)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：131.7(C-1，C-2)，128.6(C-3，C-6)，131.5(C-4，C-5)，166.9(C-7，C-7′)，66.6(C-1′，C-1″)，31.7(C-2′，C-2″)，19.8(C-3′，C-3″)，14.1(C-4′，C-4″)。將化合物4的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)比對(duì)，最終鑒定其為鄰苯二甲酸二丁酯[7]，為從高良姜中首次分離得到。

化合物5：無色油狀物(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，CD3OD)δ：7.97(2H，d，J=8.8 Hz，H-2，H-6)，6.96(2H，d，J=8.8 Hz，H-3，H-5)，3.84(3H，s，H-7)；13C-NMR(100 MHz，CD3OD)δ：129.2(C-1)，132.8(C-2，C-6)，114.5(C-3，C-5)，164.7(C-4)，55.9(C-7)。將化合物5的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)比對(duì)，最終鑒定其為對(duì)甲氧基苯酚[8]。

化合物6：淺黃色油狀物(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：9.56(1H，s，H-1)，7.49(1H，d，J=3.5 Hz，H-3)，6.60(1H，d，J=3.5 Hz，H-4)，4.51(2H，s，H-6)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：177.5(C-1)，151.3(C-2)，123.9(C-3)，109.2(C-4)，161.8(C-5)，55.5(C-6)。將化合物6的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)比對(duì)，最終鑒定其為5-羥甲基糠醛[9]，為從山姜屬中首次分離得到。

化合物7：無色針狀結(jié)晶(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：7.76(2H，d，J=8.4 Hz，H-2，H-6)，6.93(2H，d，J=8.4 Hz，H-3，H-5)，9.79(1H，s，-CHO)，10.16(1H，s，-OH)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：128.0(C-1)，132.0(C-2)，115.9(C-3)，163.9(C-4)，115.9(C-5)，132.0(C-6)，190.7(-CHO)。將化合物7的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)比對(duì)，最終鑒定其為對(duì)羥基苯甲醛[10]。

化合物8：白色粉末(CH3OH)，1H-NMR(400 MHz，DMSO-d6)δ：7.35(1H，d，J=1.6 Hz，H-2)，6.92(1H，d，J=8.0 Hz，H-5)，7.39(1H，dd，J=8.0，1.6 Hz，H-6)；13C-NMR(100 MHz，DMSO-d6)δ：128.6(C-1)，110.8(C-2)，148.2(C-3)，153.2(C-4)，115.4(C-5)，126.0(C-6)，190.8(-CHO)，55.6(-OCH3)。將化合物8的NMR數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)比對(duì)，最終鑒定其為香草醛[11]，為從山姜屬中首次分離得到。

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