胎膜早破孕婦血清炎性細胞因子和氧化應(yīng)激因子的表達特點分析

張婷婷

(廣州中醫(yī)藥大學(xué)祈福醫(yī)院婦產(chǎn)科,廣州 511495)

胎膜早破(PROM)是指在臨生產(chǎn)之前發(fā)生胎膜破裂，其中根據(jù)胎膜破裂時孕周，可分為足月PROM(孕37周后)和未足月PROM(孕37周前)。PROM作為圍產(chǎn)期常見疾病之一，在發(fā)生PROM后，由于胎膜破裂導(dǎo)致羊膜腔開放，失去密閉性而與外界相聯(lián)通，這不僅為羊水外流提供了通道，從而導(dǎo)致羊膜腔中羊水不斷減少，而且為陰道細菌逆行感染提供了開放性通道，增加了宮腔感染風(fēng)險，因此，PROM對孕婦、胎兒安全均有嚴(yán)重危害。目前PROM已經(jīng)成為新生兒死亡、新生兒感染等不良妊娠結(jié)局的主要病因，盡早準(zhǔn)確診斷PROM也成為婦產(chǎn)科學(xué)研究重點[1-3]。由于目前尚無法解釋PROM的病因和病理、生理機制，因此，早期確診PROM仍有一定困難，豐富PROM早期診斷指標(biāo)具有重要的臨床價值。本研究通過分析PROM患者血清炎性細胞因子和氧化應(yīng)激因子的表達特點，旨在初步確定血清炎性細胞因子和氧化應(yīng)激因子檢測在PROM診斷中的價值，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 將2014年11月至2016年12月在本院完成分娩的95例PROM患者納入PROM組，患者年齡21～37歲，平均(27.91±3.52)歲，孕次0～3次，平均(1.75±0.59)次，產(chǎn)次0～2次，平均(1.26±0.54)次，孕周33～36周，平均(35.21±1.24)周，納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)根據(jù)《婦產(chǎn)科學(xué)(第7版)》[4]中PROM標(biāo)準(zhǔn)確診PROM，包括陰道持續(xù)性流出液體，肛門指診上推胎先露部時，液體流出量增加；陰道流液留取標(biāo)本行酸堿度測定，pH值≥6.5；陰道流液干燥標(biāo)本鏡下可見羊齒狀、植物葉狀結(jié)晶改變；羊膜鏡下未見前羊膜囊。(2)單胎妊娠。(3)孕周未滿37周。(4)資料完整，成功分娩。(5)知情同意，自愿參加。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并糖尿病、高血壓等其他妊娠合并癥者。(2)合并腫瘤等其他疾病者。選取同期在本院足月分娩的90例健康孕婦納入對照組，年齡22～38歲，平均年齡(28.15±3.68)歲，孕次0～3次，平均(1.81±0.65)次，產(chǎn)次0～2次，平均(1.32±0.57)次，孕周38～40周，平均(39.24±1.01)周。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往身體健康，心、腎、肝等重要器官無任何疾病。(2)單胎妊娠。(3)成功分娩健康新生兒。(4)妊娠期間無任何并發(fā)癥。2組研究對象在孕次、產(chǎn)次、年齡上比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1資料收集 收集所有研究對象年齡、孕次、產(chǎn)次等各項資料，并予以準(zhǔn)確記錄。

1.2.2血液標(biāo)本采集 孕婦入院分娩前，抽取外周靜脈血5 mL于干燥無抗凝劑的試管中，3 000 r/min離心5 min，分離出血清后，以EP管收集血清，將待測血清放于-70 ℃冰箱內(nèi)保存，并在血清標(biāo)本收集完成后2 h內(nèi)進行檢測。

1.2.3血清炎性因子檢測 血清炎性因子檢測指標(biāo)包括降鈣素原(PCT)、人可溶性白細胞分化抗原14(SCD14)、C反應(yīng)蛋白(CRP)、白細胞介素(IL)-6和IL-8。SCD14、IL-6、IL-8檢測方法均為雙抗體免疫夾心法，測定結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)試劑說明書。血清PCT檢測采用免疫色譜法，定量分析所用儀器為HR201免疫分析儀，試劑生產(chǎn)商為美國Thermo Scientific公司，結(jié)果判讀標(biāo)準(zhǔn)依據(jù)說明書。CRP檢測采用散射比濁法，倍比稀釋溶液使用去離子水高值校準(zhǔn)液，水為零點繪制校準(zhǔn)液的吸光度-濃度曲線，根據(jù)吸光度差值完成CRP定量分析。

1.2.4血清氧化應(yīng)激因子測定 檢測指標(biāo)包括血清丙二醛(MDA，硫代巴比妥酸法)和血清超氧化歧化酶(SOD，黃嘌呤氧化酶法)，為了有效避免人為因素影響檢測結(jié)果準(zhǔn)確性，所有檢測均由副高及以上職稱檢驗醫(yī)師獨立完成。

2 結(jié) 果

2.12組研究對象血清炎性細胞因子比較 PROM組SCD14、PCT、CRP、IL-6、IL-8水平明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表1。

表1 2組研究對象血清炎性細胞因子比較

表2 2組研究對象氧化應(yīng)激因子水平比較

2.22組研究對象氧化應(yīng)激因子表達水平 PROM組血清MDA表達水平明顯高于對照組，血清SOD表達水平明顯低于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表2。

3 討 論

PROM是早產(chǎn)最常見的原因之一，其不僅損害胎兒健康，而且嚴(yán)重影響孕婦身心健康。正常情況下，胎膜作為一個天然密閉性屏障，能夠?qū)⑻汉屯饨绛h(huán)境隔離開，避免病原微生物侵襲胎兒。一旦發(fā)生PROM，胎兒失去天然屏障保護，不僅會被病原菌侵害，而且會導(dǎo)致胎兒提早入盆發(fā)生早產(chǎn)，目前，PROM的危害已經(jīng)被臨床公認(rèn)，早期診治PROM也成為婦產(chǎn)科學(xué)亟待解決的難題之一。

血清炎性細胞因子檢測是目前輔助診斷PROM的重要參考指標(biāo)之一，炎性細胞對絨毛膜-蛻膜的破壞作用也已經(jīng)得到了證實，目前血清炎性細胞因子檢測在PROM中的診斷價值也受到了臨床廣泛關(guān)注[5-7]。但是目前關(guān)于具體檢測指標(biāo)的選擇卻存在較大分歧，尚無統(tǒng)一的檢測指標(biāo)選擇標(biāo)準(zhǔn)。SCD14是一種糖蛋白受體，主要由單核細胞和巨噬細胞產(chǎn)生，其表達水平與體內(nèi)炎癥瀑布反應(yīng)被激活有關(guān)，因此，SCD14被認(rèn)為是炎性反應(yīng)的重要評價指標(biāo)，目前已經(jīng)證實血清游離SCD14能破壞絨毛膜-蛻膜，并且能夠在一定程度上反映宮內(nèi)感染程度，但目前關(guān)于PROM患者血清SCD14表達特點的研究卻極少。PCT、CRP作為臨床極為常用的炎性標(biāo)志性檢測指標(biāo)，在感染性疾病早期即可快速升高，是細菌感染公認(rèn)的血清學(xué)指標(biāo)之一。IL-6作為促炎性因子，不僅能夠反映炎性反應(yīng)程度，而且參與免疫調(diào)節(jié)和造血調(diào)節(jié)過程，此外，IL-6能夠通過促進前列腺素生成而提高趨化因子作用，從而增強子宮收縮力度，加速PROM發(fā)生和惡化，由此可見測定IL-6在一定程度上可說明PROM發(fā)生的危險性。IL-8與IL-6同屬于白細胞介素家族，是重要的促炎性細胞因子，能夠增強淋巴細胞對胎膜組織的侵襲作用，并通過促進內(nèi)皮細胞黏附加速炎癥發(fā)生，提高PROM發(fā)生的風(fēng)險[8]。鑒于以上原因，本研究選擇聯(lián)合檢測上述指標(biāo)，以客觀、全面評價PROM患者血清炎性細胞因子的表達特點，研究結(jié)果顯示PROM組孕婦血清PCT、SCD14、CRP、IL-6、IL-8明顯高于對照組，證實了PROM發(fā)生與炎性反應(yīng)密切相關(guān)，PROM孕婦血清中炎性細胞因子表達異常升高，多種炎性細胞因子聯(lián)合檢測有利于PROM早期準(zhǔn)確診斷。

活性氧具有極為活潑的化學(xué)性質(zhì)，具有高度氧化還原能力，活性氧過多能夠通過促進磷脂不飽和脂肪酸轉(zhuǎn)化成過氧化脂質(zhì)而損傷生物膜和蛋白質(zhì)功能結(jié)構(gòu)，從而對組織、細胞等產(chǎn)生侵害。MDA和SOD是目前評價氧化應(yīng)激水平的主要因子，其中MDA作為脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物,能間接反映體內(nèi)活性氧水平,MDA升高往往預(yù)示活性氧增多，組織可能發(fā)生氧損傷，SOD能夠清除有害物質(zhì)，SOD活性降低，往往提示有害物質(zhì)清除能力下降，體內(nèi)有害物質(zhì)增多[9-10]。本研究結(jié)果顯示PROM組孕婦MDA明顯高于健康孕婦，而SOD明顯低于健康孕婦，說明發(fā)生PROM時，孕婦體內(nèi)會發(fā)生強烈的氧化應(yīng)激反應(yīng)，活性氧等有害物質(zhì)明顯增加，氧化應(yīng)激反應(yīng)可能參與了PROM發(fā)生過程，這可能與活性氧異常增多能夠促使胎膜不飽和脂肪酸出現(xiàn)過氧化反應(yīng)有關(guān)。由于本研究未對聯(lián)合檢測的靈敏度、特異度進行分析，尚無法說明炎性細胞因子、氧化應(yīng)激因子聯(lián)合檢測的診斷價值，且研究樣本較小，仍需進行深入研究進一步說明炎性因子、氧化應(yīng)激因子聯(lián)合檢測確診PROM的可行性。

綜上所述，PROM孕婦血清炎性細胞因子和氧化應(yīng)激因子異常升高，血清炎性因子與氧化應(yīng)激因子聯(lián)合檢測可能有利于PROM的早期確診，建議臨床進一步深入研究。