離子色譜法測(cè)定郁李仁藥材中的二氧化硫殘留量

王佳慧 夏洋

郁李仁（semen pruni）味辛甘苦、性平，具有潤(rùn)腸通便、利水消腫之功，臨床治療便秘、水腫和小便不利等癥，療效良好[1]。中藥常熏硫來(lái)防霉防蛀，熏硫可能改變藥的材性狀和成分[2-3]，二氧化硫殘留還可能危害人體健康[4-5]。我國(guó)藥典中規(guī)定天麻等十種中藥材的二氧化硫殘留應(yīng)低于400 mg/kg，其他中藥材應(yīng)低于150 mg/kg[6-7]。目前還沒(méi)有用離子色譜法測(cè)定郁李仁中二氧化硫殘留量的文獻(xiàn)報(bào)道。本文用此法測(cè)定郁李仁中二氧化硫殘留量，可避免酸堿滴定法測(cè)定帶來(lái)的誤差。本法測(cè)定結(jié)果可靠，測(cè)試時(shí)間短，檢出限低，是測(cè)定郁李仁中二氧化硫殘留量的有效方法。

1 儀器與方法

1.1 儀器

Milli-Q超純水機(jī)（Integral 15型，美國(guó)millipore公司）；電子分析天平（瑞士 METTLER-TOLEDO公司）；ICS-90 離子色譜儀（美國(guó)戴安公司）。

1.2 試劑

硫酸根離子標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 mg/ml，中國(guó)計(jì)量科學(xué)研究院，批號(hào)：GBW（E）080266）；超純水（電阻率18.2 MΩ/cm）；其他使用的試劑均為分析純。郁李仁（購(gòu)自沈陽(yáng)市的中藥藥房），取已知未熏硫的郁李仁自制熏硫樣品。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 色譜條件 色譜柱：Dionex Ionpac離子色譜柱（AS11A型）；流速1.0 ml/min；柱溫30 ℃；流動(dòng)相：12 mmol/L KOH溶液；進(jìn)樣量 20 μl。

1.3.2 熏硫樣品的制備 把郁李仁均勻放在通風(fēng)櫥內(nèi)的架子上，將硫磺點(diǎn)燃放入通風(fēng)櫥密閉24小時(shí)，制備熏硫郁李仁。

1.3.3 供試液的制備 將郁李仁粉碎，過(guò)二號(hào)篩，精密稱取10 g裝入水蒸汽蒸餾裝置，加入50 ml水和5 ml鹽酸，密封容器，開(kāi)始蒸餾。配制3% H2O2作為接收液，接收至接近100 ml停止蒸餾，用超純水定容，以0.45 μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液作為供試品溶液，用離子色譜測(cè)定其中的硫酸根，再換算出二氧化硫含量。熏硫郁李仁同法處理制備供試液。

2 結(jié)果

2.1 專屬性

將樣品供試液依據(jù)色譜條件分析，供試液的其他成分不干擾硫酸根的測(cè)定，硫酸根離子的保留時(shí)間約7.52 min，理論塔板數(shù)大于2 000，郁李仁樣品供試液的離子色譜圖，見(jiàn)圖1，二氧化硫殘留以硫酸根離子的形式定量，硫酸根色譜峰與相鄰峰的分離度大于1.5。

2.2 線性范圍

采用外標(biāo)法定量，將硫酸根標(biāo)準(zhǔn)品溶液稀釋成濃度為0.5 mg/L、1.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L、25.0 mg/L和50.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)品溶液，經(jīng)離子色譜儀分析，測(cè)定硫酸根離子色譜峰面積，以硫酸根離子的質(zhì)量濃度C（mg/L）為橫坐標(biāo)，硫酸根離子的色譜峰面積A為縱坐標(biāo)，進(jìn)行線性回歸。標(biāo)準(zhǔn)曲線方程為A=0.112 6C-0.031 5（r=0.999 8），硫酸根離子的線性范圍在0.5～50.0 mg/L內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

圖1 硫酸根離子標(biāo)準(zhǔn)品溶液（A）和熏硫郁李仁（B）離子色譜圖

2.3 定量限和檢測(cè)限的測(cè)定

將硫酸根標(biāo)準(zhǔn)品溶液逐級(jí)稀釋，測(cè)量出3倍基線噪音信號(hào)時(shí)的硫酸根離子濃度，作為方法的檢測(cè)限，測(cè)量出10倍噪音信號(hào)時(shí)的硫酸根離子濃度，作為方法的定量限。結(jié)果表明，二氧化硫的檢測(cè)限和定量限分別為0.08 mg/L和0.27 mg/L。

2.4 精密度和重復(fù)性試驗(yàn)

以5.0 mg/L的硫酸根標(biāo)準(zhǔn)溶液計(jì)算精密度，依法分析測(cè)定6次，計(jì)算精密度，取自制熏硫郁李仁樣品，各制備6份供試品溶液，測(cè)定計(jì)算重復(fù)性。結(jié)果硫酸根離子峰面積的RSD%為1.21%，熏硫郁李仁樣品的RSD為4.16%，表明方法的精密度和重復(fù)性良好。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

將制備好的熏硫郁李仁樣品供試液，分別在0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h和24 h進(jìn)樣，記錄峰面積。結(jié)果峰面積RSD為4.68%，表明供試液在24 h內(nèi)具有良好的穩(wěn)定性。

2.6 回收率試驗(yàn)

以1號(hào)郁李仁樣品進(jìn)行回收率試驗(yàn)，精密稱取10 g樣品，分別加入2.0 ml、4.0 ml和8.0 ml的無(wú)水亞硫酸鈉溶液，無(wú)水亞硫酸鈉溶液中相當(dāng)于含有116 mg/L的二氧化硫，制成含高中低3個(gè)濃度的樣品，每個(gè)濃度制備3份樣品，按照2.3項(xiàng)下制備供試液，離子色譜分析，計(jì)算回收率。結(jié)果郁李仁樣品在0.23 mg、0.46 mg和0.93 mg三個(gè)水平的平均回收率在98.4%～101.6%之間，RSD小于5%。

2.7 樣品含量測(cè)定

采用本方法對(duì)采集的6份樣品、2份自制熏硫郁李仁樣品進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果6份采集樣品均未檢出二氧化硫，而自制熏硫郁李仁樣品中二氧化硫殘留量為45.308 mg/kg和42.662 mg/kg。

3 討論

3.1 中藥材熏硫?qū)λ幮缘挠绊?/h3>

中藥材常熏硫來(lái)防腐防蟲(chóng)蛀，在硫磺熏蒸時(shí)會(huì)有一定數(shù)量的硫附著在藥材表面，可能會(huì)影響中藥材本身的藥性[2]。硫磺性溫味酸，有小毒，有益火助陽(yáng)之功，熏硫后的中藥材如用于益火壯陽(yáng)的方劑可起到協(xié)同的功效，反之則會(huì)降低治療效果甚至起反作用[3-5]。因此，需要嚴(yán)格控制中藥材中的二氧化硫殘留量。

3.2 二氧化硫殘留量測(cè)試方法選擇

我國(guó)2015年版藥典中規(guī)定了三種測(cè)定二氧化硫殘留量的方法，即酸堿滴定法（第一法）、氣相色譜法（第二法）和離子色譜法（第三法）[7]。目前，第一法為常用方法，但對(duì)郁李仁等含有苦杏仁苷化合物的中藥材容易誤判，這是由于苦杏仁苷在酸性環(huán)境中會(huì)水解產(chǎn)生氰化氫，也會(huì)消耗堿液[8]。本文采用離子色譜法測(cè)定郁李仁的二氧化硫殘留量，可避免苦杏仁苷帶來(lái)的假陽(yáng)性干擾。

3.3 離子色譜分析條件的優(yōu)化

參考文獻(xiàn)方法對(duì)分析條件進(jìn)行優(yōu)化[8-15]，考察了10 mmol/L、12 mmol/L和15 mmol/L的KOH 溶液為流動(dòng)相時(shí)硫酸根離子分離情況，濃度為12 mmol/L時(shí)硫酸根離子與相鄰色譜峰可完全分離。考察了柱溫變化對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響，柱溫升高會(huì)使得硫酸根離子色譜峰保留時(shí)間提前，幅度不大，為了兼顧方法的實(shí)用性，本法最終選擇30 ℃作為試驗(yàn)用柱溫條件?？疾炝?.8 ml/min、1.0 ml/min和1.2 ml/min三個(gè)流速對(duì)測(cè)量結(jié)果的影響，結(jié)果流速1.0 ml/min時(shí)色譜峰峰形較好。以優(yōu)化后的色譜條件分析，供試液的其他成分不干擾硫酸根離子測(cè)定，與相鄰峰間分離度大于1.5，可用于郁李仁藥材的二氧化硫殘留量測(cè)定。

3.4 建立的郁李仁藥材二氧化硫殘留量測(cè)定方法評(píng)價(jià)

建立的離子色譜法分析郁李仁藥材中的二氧化硫殘留量，方法穩(wěn)定可靠、重現(xiàn)型好，適用于郁李仁藥材的二氧化硫殘留量控制。通過(guò)分析多批郁李仁樣品和熏硫后的郁李仁樣品，表明本法分析郁李仁藥材中的二氧化硫殘留，測(cè)定結(jié)果不受藥材中其他物質(zhì)的干擾，方法簡(jiǎn)便快速，可用于控制郁李仁藥材的質(zhì)量。