櫻桃李休眠芽提早萌發(fā)及莖段滅菌培養(yǎng)研究

侍藝，柴慈江，馮濤，黃蕾

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櫻桃李休眠芽提早萌發(fā)及莖段滅菌培養(yǎng)研究

侍藝，柴慈江通信作者，馮濤，黃蕾

（天津農(nóng)學(xué)院 園藝園林學(xué)院，天津 300384）

為探討赤霉素對(duì)櫻桃李休眠芽萌發(fā)的促進(jìn)效果及櫻桃李莖段滅菌培養(yǎng)技術(shù)。將12月上旬和1月中旬采集的櫻桃李一年生休眠枝用赤霉素藥液浸泡后進(jìn)行水培萌芽試驗(yàn)；用次氯酸鈉和酒精對(duì)櫻桃李莖段外植體滅菌后接種于不同培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)。結(jié)果表明，與清水浸泡相比，赤霉素（100 mg/L或200 mg/L）浸泡1或2 h，可明顯促進(jìn)櫻桃李休眠芽提早萌發(fā)，并增加嫩梢長(zhǎng)度，赤霉素（100 mg/L或200 mg/L）浸泡2 h可明顯提高12月上旬采集的櫻桃李休眠枝的萌芽率。結(jié)合酒精浸蘸，用次氯酸鈉（2%）對(duì)櫻桃李休眠枝水培萌生的嫩梢莖段浸泡6～9 min、對(duì)春季采集的櫻桃李田間當(dāng)年生新梢莖段浸泡10～25 min，污染率接近于0，存活率為100%。在附加6-BA 0.5 mg/L的MS培養(yǎng)基中，櫻桃李休眠枝水培萌生莖段的萌芽率達(dá)到71.4%、春季田間新梢莖段的萌芽率達(dá)到80.0%～95.5%。本研究可以為延長(zhǎng)櫻桃李外植體取材時(shí)間和完善其外植體滅菌培養(yǎng)技術(shù)提供參考。

櫻桃李；休眠芽；赤霉素；莖段；滅菌；培養(yǎng)

櫻桃李（Ehrh.）為薔薇科李亞科李屬植物，是一種重要的野生果樹資源，在我國(guó)僅分布于新疆，在新疆霍城縣大西溝較開闊的河流岸邊有小面積的純林。新疆野生櫻桃李在《中國(guó)珍稀瀕危保護(hù)植物名錄》中，被列為國(guó)家Ⅱ級(jí)重點(diǎn)保護(hù)物種和自治區(qū)Ⅱ級(jí)重點(diǎn)保護(hù)物種，在生物多樣性中是具有國(guó)際意義的優(yōu)先保護(hù)物種[1]。

櫻桃李營(yíng)養(yǎng)全面且價(jià)值較高，其果實(shí)的K含量很高，氨基酸豐富，可滴定酸和可溶性固形物水平較高，富含維生素以及胡蘿卜素[2]。張士康等將櫻桃李與藍(lán)莓進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分的對(duì)比，發(fā)現(xiàn)櫻桃李某些營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)高于藍(lán)莓，認(rèn)為其開發(fā)利用的前景較好[3]。劉偉等研究表明，櫻桃李葉提取物有不同程度的抗氧化活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性，具有開發(fā)治療糖尿病降血糖藥物的價(jià)值[4]。張靜茹等發(fā)現(xiàn)，櫻桃李果實(shí)在多酚組成和含量上存在豐富的多樣性，酚類物質(zhì)以原花青素B1、兒茶素、綠原酸、原花青素B2、表兒茶素和原花青素C為主，并且篩選出具有較高多酚含量的株系[5]。

大量培育櫻桃李優(yōu)質(zhì)苗木對(duì)于櫻桃李資源保護(hù)及其優(yōu)良單株的引種推廣具有重要意義。植物組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)具有繁殖速度快、有利于無病毒苗木培育及工廠化規(guī)?；绲戎T多優(yōu)點(diǎn)[6]。采用植物組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)是快速獲得櫻桃李大量?jī)?yōu)質(zhì)苗木的有效途徑。但是，目前關(guān)于櫻桃李組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)的研究?jī)H見少數(shù)報(bào)道[7-9]，該項(xiàng)技術(shù)尚不成熟。本項(xiàng)研究旨在探討赤霉素促進(jìn)櫻桃李休眠芽萌發(fā)及櫻桃李莖段的滅菌培養(yǎng)技術(shù)，為完善櫻桃李外植體滅菌技術(shù)環(huán)節(jié)提供參考，同時(shí)獲得櫻桃李無菌試管苗材料，為進(jìn)一步研究其試管苗的增殖、生根及移栽技術(shù)奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料

試驗(yàn)所用材料取自引自新疆并種植于天津農(nóng)學(xué)院實(shí)驗(yàn)園內(nèi)的櫻桃李（Ehrh.）5年生植株。

1.2 方法

1.2.1 赤霉素促進(jìn)櫻桃李休眠芽提早萌發(fā)試驗(yàn)

2016年12月8日，取櫻桃李1年生休眠枝，用赤霉素（GA3）溶液進(jìn)行浸泡處理，以探討赤霉素對(duì)休眠芽萌發(fā)的影響。試驗(yàn)共設(shè)以下4個(gè)處理：GA3（100 mg/L）浸泡1 h，GA3（100 mg/L）浸泡2 h，GA3（200 mg/L）浸泡1 h，GA3（200 mg/L）浸泡2 h，清水浸泡1 h。浸泡時(shí)將整個(gè)枝條完全浸入赤霉素溶液（或清水）中，浸泡后將枝條基部浸入水中約5 cm進(jìn)行水培，每隔3～4 d換一次水，換水時(shí)將枝條基部在水中剪去約1 cm，然后將枝條浸泡部位的表面用酒精（70%）擦拭后繼續(xù)水培。水培過程中每5 d調(diào)查一次萌芽率，每處理所有枝條上浸水部位以上的芽數(shù)之和為調(diào)查的總芽數(shù)，萌芽率等于每次調(diào)查的萌芽數(shù)占總芽數(shù)的百分?jǐn)?shù)，每處理調(diào)查的總芽數(shù)均大于120個(gè)芽。水培2周后，每處理選取10個(gè)較長(zhǎng)的嫩梢調(diào)查萌發(fā)嫩梢的長(zhǎng)度，并調(diào)查可用嫩梢率，可用嫩梢率是指莖長(zhǎng)≥2 mm的嫩梢占萌芽總數(shù)的百分?jǐn)?shù)，因?yàn)榍o長(zhǎng)≥2 mm的嫩梢比較方便用于滅菌接種。水培場(chǎng)所位于向陽(yáng)室內(nèi)窗前的暖器旁，溫度為20～27 ℃。

2018年1月18日再取櫻桃李1年生休眠枝，設(shè)GA3（200 mg/L）浸泡2 h和清水浸泡2 h兩個(gè)處理，重復(fù)上述試驗(yàn)過程，按同樣方法調(diào)查萌芽率、嫩梢長(zhǎng)度和可用嫩梢率。

1.2.2 櫻桃李水培枝萌發(fā)莖段滅菌接種培養(yǎng)試驗(yàn)

將試驗(yàn)1.2.1中櫻桃李休眠枝萌芽形成的嫩梢剪下進(jìn)行滅菌接種培養(yǎng)試驗(yàn)。滅菌方法設(shè)3個(gè)處理：次氯酸鈉（2%）浸泡6 min，酒精（70%）蘸2～3 s＋次氯酸鈉（2%）浸泡6 min，酒精（70%）蘸2～3 s＋次氯酸鈉（2%）浸泡9 min。每個(gè)處理在次氯酸鈉浸泡后均用無菌水沖洗4次，在酒精浸蘸后用無菌水沖洗1次、用濾紙吸干表面水分再放入次氯酸鈉溶液中浸泡，并用酒精浸蘸后再將嫩梢從母枝上剪下，以免傷口吸收過多的酒精。每個(gè)處理經(jīng)過滅菌后的嫩梢均剪成約1 cm長(zhǎng)的莖段并分別接種于下列4種培養(yǎng)基上，即3/4MS＋6-BA 1.0 mg/L＋I(xiàn)BA 0.3 mg/L，3/4MS＋6-BA 1.0 mg/L＋I(xiàn)AA 0.3 mg/L，1/2MS＋I(xiàn)BA 0.3 mg/L，MS＋6-BA 0.5 mg/L。接種后在培養(yǎng)室培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：溫度22～28 ℃，光照1 500～2 000 lx，每天光照14 h。

在培養(yǎng)室培養(yǎng)1周后，每處理隨機(jī)調(diào)查30個(gè)接種莖段統(tǒng)計(jì)污染率和存活率。污染率等于污染莖段數(shù)占調(diào)查莖段數(shù)的百分?jǐn)?shù)，存活率等于存活莖段數(shù)占調(diào)查莖段數(shù)的百分?jǐn)?shù)，莖段存活的標(biāo)志是無褐化、保持接種時(shí)的新鮮綠色。

培養(yǎng)3周后，調(diào)查4種培養(yǎng)基上未污染莖段的萌芽狀況。

1.2.3 櫻桃李春季田間萌發(fā)新梢莖段滅菌接種培養(yǎng)試驗(yàn)

2017年5月下旬，取櫻桃李田間當(dāng)年萌生的半木質(zhì)化新捎，去掉葉片，剪成長(zhǎng)度略小于滅菌液容器直徑的莖段，進(jìn)行滅菌處理。滅菌時(shí)先將莖段用70%酒精蘸2～3 s，用無菌水沖洗后晾干，然后再放入次氯酸鈉（2%）浸泡，在次氯酸鈉（2%）溶液中浸泡的時(shí)間設(shè)4個(gè)處理，分別是10、15、20、25 min，在次氯酸鈉溶液中浸泡后用無菌水沖洗4次，然后將莖段剪成長(zhǎng)度約1.5 cm、帶1～2個(gè)芽的莖段接種于培養(yǎng)基上，培養(yǎng)基為附加6-BA 0.5 mg/L的MS培養(yǎng)基，接種后于培養(yǎng)室培養(yǎng)，培養(yǎng)2周后調(diào)查莖段的污染率和萌芽情況。

2 結(jié)果與分析

2.1 赤霉素對(duì)櫻桃李休眠芽萌發(fā)的影響

赤霉素浸泡處理對(duì)櫻桃李休眠芽萌發(fā)及嫩梢生長(zhǎng)的影響效果見圖1、圖2和表1。

由圖1可見，水培5 d時(shí)，所有赤霉素浸泡處理的櫻桃李休眠芽萌發(fā)率均達(dá)到10%以上，其中赤霉素（200 mg/L）浸泡2 h處理萌芽率接近25%，而清水浸泡處理幾乎沒有芽萌動(dòng)。水培10 d后，所有赤霉素浸泡處理萌芽率達(dá)到15%以上，赤霉素（200 mg/L）浸泡2 h處理萌芽率達(dá)到其最高值37.3%，清水浸泡處理萌芽率此時(shí)僅為5%左右。上述結(jié)果表明，與清水浸泡相比，本試驗(yàn)中所有赤霉素浸泡處理均可以促進(jìn)櫻桃李休眠芽提早萌發(fā)，其中以赤霉素（200 mg/L）浸泡2 h處理效果最好。

圖1 赤霉素（GA3）溶液浸泡后櫻桃李休眠芽的萌發(fā)動(dòng)態(tài)（一）

圖2中也可以看出，赤霉素（200 mg/L）浸泡2 h處理的萌芽時(shí)間比清水浸泡處理的明顯提前，這與圖1結(jié)果相似。與圖1不同的是，圖2中無論是赤霉素浸泡還是清水浸泡其萌芽都明顯早于圖1。圖2中赤霉素浸泡處理的萌芽率在水培3 d時(shí)就達(dá)到了35%左右，在水培5 d時(shí)則接近50%，清水浸泡處理的萌芽率在水培5 d時(shí)也達(dá)到25%左右。這一結(jié)果表明，1月18日取樣的櫻桃李休眠枝可以明顯比12月8日取樣的提早萌芽，其原因可能是1月18日取樣的櫻桃李休眠芽獲得了較多的打破休眠所需的低溫，其休眠已經(jīng)部分解除的緣故。

圖2 赤霉素（GA3）溶液浸泡后櫻桃李休眠芽的萌發(fā)動(dòng)態(tài)（二）

由表1可見，水培2周后，對(duì)于12月8日取樣的櫻桃李休眠枝，赤霉素（200 mg/L）浸泡2 h和赤霉素（100 mg/L）浸泡2 h處理的萌芽率較高，分別為37.7%和32.8%，這兩者之間差異不顯著，但均顯著高于其他3個(gè)處理。兩個(gè)赤霉素浸泡1 h的處理與清水浸泡之間的萌芽率無顯著差異。結(jié)果表明，與清水浸泡相比，不同濃度赤霉素浸泡2 h的處理不僅可以促使櫻桃李休眠芽提早萌發(fā)，而且可以明顯提高萌芽率。對(duì)于1月18日取樣的櫻桃李休眠枝，水培2周后，赤霉素（200 mg/L）浸泡2 h處理與清水浸泡之間萌芽率無顯著差異，均明顯高于12月8日取樣的萌芽率，其原因可能仍然與其獲得低溫量較多、部分解除休眠有關(guān)。

表1 赤霉素對(duì)櫻桃李休眠芽萌發(fā)和萌生嫩梢莖長(zhǎng)的影響（水培2周后調(diào)查）

注：表內(nèi)數(shù)據(jù)后大寫字母不同表示1%水平差異極顯著，小寫字母不同表示5%水平差異顯著。下同

由表1還可看出，水培2周后，無論是12月8日取樣還是1月18日取樣，赤霉素浸泡處理的櫻桃李休眠芽萌發(fā)后形成的嫩梢長(zhǎng)度及可用嫩梢率均顯著或極顯著地高于清水浸泡，其原因一方面可能是赤霉素浸泡處理促進(jìn)了櫻桃李休眠芽提早萌發(fā)，因而增多了嫩梢的生長(zhǎng)時(shí)間；另一方面的原因可能是因?yàn)槌嗝顾鼐哂写龠M(jìn)莖加長(zhǎng)生長(zhǎng)的作用。

綜合上述，與清水浸泡相比，赤霉素（100 mg/L或200 mg/L）浸泡1 h或2 h，可以明顯促進(jìn)櫻桃李休眠芽提早萌發(fā)和嫩梢的加長(zhǎng)生長(zhǎng)，并明顯提高可用嫩梢率，赤霉素（100 mg/L或200 mg/L）浸泡2 h還可以明顯提高12月上旬取樣的櫻桃李休眠枝的萌芽率，赤霉素處理的這些結(jié)果可以導(dǎo)致獲得更多的用于滅菌接種的莖段外植體，這對(duì)于完善櫻桃李組培快繁中的外植體滅菌接種技術(shù)環(huán)節(jié)具有實(shí)踐意義。

2.2 酒精和次氯酸鈉對(duì)櫻桃李水培萌發(fā)莖段的滅菌效果

櫻桃李水培萌發(fā)莖段的滅菌試驗(yàn)結(jié)果見表2。

由表2可見，對(duì)于櫻桃李水培萌發(fā)形成的嫩梢，在用次氯酸鈉滅菌前用酒精（70%）浸泡2～3 s（蘸一下）處理的污染率極顯著地低于未用酒精浸泡的處理，其原因一方面可能是酒精（70%）本身具有較強(qiáng)的殺菌效果，另一方面可能是酒精能夠幫助次氯酸鈉藥液更好地展著于外植體表面，提高了次氯酸鈉的滅菌效果。用酒精（70%）浸蘸后，再用次氯酸鈉（2%）藥液浸泡6 min和9 min均可使外植體的污染率降低為0，而且外植體的存活率均為100%，沒有造成對(duì)外植體的傷害，表明這兩種滅菌方法對(duì)于櫻桃李水培萌發(fā)嫩梢都是適宜的。而從經(jīng)濟(jì)角度考慮，以酒精（70%）浸蘸結(jié)合次氯酸鈉（2%）浸泡6 min的滅菌方法更好。

表2 酒精和次氯酸鈉對(duì)櫻桃李水培萌發(fā)莖段滅菌效果的影響

2.3 不同培養(yǎng)基對(duì)櫻桃李莖段初代培養(yǎng)的影響

櫻桃李莖段在不同培養(yǎng)基上的萌芽狀況調(diào)查結(jié)果見表3。

由表3可見，櫻桃李莖段在MS＋6-BA（0.5 mg/L）培養(yǎng)基上的萌芽率最高為71.4%，在3/4MS＋6-BA（1.0 mg/L）＋I(xiàn)BA（0.3 mg/L）培養(yǎng)基上的萌芽率居第二為64%，這兩者之間萌芽率差異不顯著，但均極顯著高于3/4MS＋6-BA（1.0 mg/L）＋I(xiàn)AA（0.3 mg/L）和1/2MS＋I(xiàn)BA（0.3 mg/L）兩種培養(yǎng)基上的萌芽率。后兩種培養(yǎng)基上的萌芽率之間差異也不顯著。結(jié)果表明，對(duì)于櫻桃李莖段的初代培養(yǎng)，可以采用MS＋6-BA（0.5 mg/L）培養(yǎng)基或3/4MS＋6-BA（1.0 mg/L）＋I(xiàn)BA（0.3 mg/L）培養(yǎng)基，這兩種培養(yǎng)基均可獲得較高的萌芽率，其中以MS＋6-BA（0.5 mg/L）培養(yǎng)基更好，因?yàn)樵撆囵B(yǎng)基使用的植物激素種類少且含量更低。

表3 不同培養(yǎng)基對(duì)櫻桃李莖段初代培養(yǎng)效果的影響

2.4 次氯酸鈉對(duì)櫻桃李田間當(dāng)年萌發(fā)莖段的滅菌效果

次氯酸鈉對(duì)櫻桃李當(dāng)年新梢莖段的滅菌效果見表4。

由表4可見，對(duì)于5月下旬田間采集的櫻桃李當(dāng)年生新梢莖段，用酒精（70%）浸蘸后，次氯酸鈉（2%）不同的浸泡時(shí)間處理之間在接種莖段的污染率、存活率和萌芽率等指標(biāo)上均沒有顯著差異，而且污染率小于5%、存活率達(dá)到100%、萌芽率達(dá)到80%以上，結(jié)果表明次氯酸鈉（2%）浸泡時(shí)間在10～25 min之間均可以達(dá)到比較理想的莖段滅菌效果，而從經(jīng)濟(jì)角度考慮，以次氯酸鈉（2%）浸泡10 min更好。

表4 次氯酸鈉浸泡時(shí)間對(duì)櫻桃李田間當(dāng)年新梢莖段滅菌效果的影響

3 討論與結(jié)論

外植體的滅菌培養(yǎng)是植物離體快速繁殖技術(shù)的首要環(huán)節(jié)，而帶芽莖段是木本植物離體快繁中較為常用的外植體，因其遺傳穩(wěn)定、易于培養(yǎng)且便于滅菌操作[6]。木本植物莖段外植體適宜的采集時(shí)間受到季節(jié)的影響而比較短暫，一般認(rèn)為5月份是最佳時(shí)期，這時(shí)可以采集當(dāng)年生新梢莖段做外植體，帶菌量小易于滅菌，且枝條生長(zhǎng)旺盛。秋季采集的莖段帶菌量大不易滅菌，休眠期的莖段滅菌更為困難且萌芽率低，這兩個(gè)時(shí)期都不適合采集莖段直接滅菌培養(yǎng)。為延長(zhǎng)莖段外植體的取材時(shí)間，人們也做了一些嘗試。延志蓮等3月初采集大木棗休眠枝進(jìn)行水培，萌芽率可達(dá)95.8%，對(duì)萌發(fā)的嫩梢滅菌培養(yǎng)獲得了較為理想的結(jié)果[10]。趙錦等研究表明，12月份至次年3月份采集棗休眠枝進(jìn)行水培，萌芽率達(dá)到90%以上，對(duì)水培萌發(fā)的嫩梢滅菌培養(yǎng)后，其滅菌效果明顯好于7、8月份田間采集的莖段并與5、6月份田間采集的莖段相當(dāng)[11]。這兩項(xiàng)研究也指出11月份采集的棗休眠枝萌芽率明顯偏低，只有40%～50%左右，而且發(fā)芽延遲，并且認(rèn)為這與棗枝條仍處于休眠階段有關(guān)。本項(xiàng)結(jié)果表明，1月采集的櫻桃李休眠枝可以達(dá)到50%左右的萌芽率，而12月初采集的萌芽率只有24.6%，且發(fā)芽明顯推遲，這與棗休眠枝的表現(xiàn)相似。有研究表明赤霉素（GA3）可以打破盆栽桃芽的休眠而使其提早發(fā)芽[12-13]。本研究中，用赤霉素溶液對(duì)12月初和1月中旬采集的櫻桃李1年生休眠枝做浸泡處理，可使其提早發(fā)芽，并可明顯增加萌發(fā)嫩梢的莖長(zhǎng)，12月初處理的還可明顯提高萌芽率，這些結(jié)果可以導(dǎo)致獲得明顯增多的用于滅菌接種的莖段外植體，對(duì)于延長(zhǎng)櫻桃李莖段外植體的取材時(shí)期和完善櫻桃李外植體滅菌技術(shù)環(huán)節(jié)具有實(shí)踐意義。

升汞是外植體滅菌中常用的滅菌劑[14-18]。劉崇琪等和李海臣等在櫻桃李當(dāng)年生莖段的滅菌中均以升汞做主要滅菌劑[7-8]。升汞殺菌效果較好，但使用過的升汞廢液容易對(duì)環(huán)境造成污染，因此應(yīng)盡量減少升汞的使用。本試驗(yàn)中，結(jié)合酒精浸蘸，用次氯酸鈉（2%）對(duì)櫻桃李休眠枝水培萌發(fā)形成的嫩梢莖段浸泡6～9 min、對(duì)春季采集的櫻桃李田間當(dāng)年生新梢莖段浸泡10～25 min均可以獲得理想的滅菌效果，這一結(jié)果顯示對(duì)于帶菌量較少的莖段外植體可以采用次氯酸鈉做主要滅菌劑進(jìn)行滅菌，這對(duì)于減少外植體滅菌過程中升汞的使用和減輕環(huán)境污染具有積極意義。

莖段外植體滅菌接種后，其上的芽萌發(fā)后就可以形成無菌嫩梢用于繼代培養(yǎng)，而莖段的萌芽率決定著形成無菌嫩梢的數(shù)量，萌芽率越高越有利于獲得較多的無菌嫩梢。劉崇琪等研究結(jié)果表明，在附加6-BA 0.8 mg/L和IAA 0.4 mg/L的MS培養(yǎng)基上櫻桃李莖段外植體的成苗率為70%，在附加6-BA 1.0 mg/L和IAA 0.3 mg/L的3/4MS培養(yǎng)基中莖段的增殖系數(shù)可達(dá)到6.2[7]。本試驗(yàn)中，在附加6-BA 1.0 mg/L和IAA 0.3 mg/L的3/4MS培養(yǎng)基中櫻桃李莖段外植體的萌芽率僅為26.3%，這一結(jié)果與劉崇琪等人的研究不一致，其原因可能是所用櫻桃李莖段的生理狀態(tài)不同所致。本試驗(yàn)中，在附加6-BA 0.5 mg/L的MS培養(yǎng)基中，櫻桃李休眠枝水培萌發(fā)莖段的萌芽率達(dá)到71.4%、櫻桃李春季田間新梢莖段的萌芽率達(dá)到80.0%～95.5%，表明該種培養(yǎng)基比較適合于櫻桃李莖段外植體的初代培養(yǎng)。

綜上所述，與清水浸泡相比，赤霉素（100 mg/L或200 mg/L）浸泡1 h或2 h，可以明顯促進(jìn)櫻桃李休眠芽提早萌發(fā)，并增加嫩梢長(zhǎng)度，赤霉素（100 mg/L或200 mg/L）浸泡2 h還可以明顯提高12月上旬采集的櫻桃李休眠枝的萌芽率。結(jié)合酒精浸蘸，用次氯酸鈉（2%）對(duì)櫻桃李休眠枝水培萌生的嫩梢莖段浸泡6～9 min、對(duì)春季采集的櫻桃李田間當(dāng)年生新梢莖段浸泡10～25 min，污染率接近于0，存活率為100%。在附加6-BA 0.5 mg/L的MS培養(yǎng)基中，櫻桃李休眠枝水培萌生莖段的萌芽率達(dá)到71.4%、櫻桃李春季田間新梢莖段的萌芽率達(dá)到80.0%～95.5%。本項(xiàng)結(jié)果可以為延長(zhǎng)櫻桃李外植體取材時(shí)間和完善其外植體滅菌培養(yǎng)技術(shù)提供參考。

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責(zé)任編輯：楊霞

Studies on gibberellin advancing dormant buds germinating and sterilizing and culturing technique of stem sections of myrobalan plums (Ehrh.)

SHI Yi, CHAI Ci-jiangCorresponding Author, FENG Tao, HUANG Lei

（College of Horticulture and Landscape, Tianjin Agricultural University, Tianjin 300384, China）

This paper aimed at researching on the hastening effect of GA3on dormant buds germination and on the sterilizing and culturing technique of stem sections of. The annual dormant shoot oftaken in the first ten-day period of December and middle ten-day period of January were soaked in GA3solution and then cultured in water for bud busting. The stem sections ofwere sterilized with alcohol and sodium hypochlorite and then inoculated in different media. The result showed that soaked in GA3(100 mg/L or 200 mg/L) solution for 1 or 2 hours the dormant buds of thegerminated obviously earlier and the shoot was marvelously longer compared with the control soaked in water. For annual dormant shoot taken in the first ten-day period of December the treatment of soaked in GA3(100 mg/L or 200 mg/L) solution for 2 hours, the germination rate increased obviously. After soaked in alcohol not only the young shoot fromdormant buds germinating cultured in water were soaked in sodium hypochlorite (2%) solution for 6-9 minutes but also the stem section oftaken in field in spring were soaked in sodium hypochlorite (2%) solution for 10-25 minutes. The both obtained the same result that the pollution rate was near to 0 and the survival rate was 100%. In MS medium added 0.5 mg/L of 6-BA the young shoot fromdormant buds germinating cultured in water had the germination rate of 71.4% while the stem section oftaken in field in spring had the germination rate of 80.0%-95.5%. These results can supply reference for prolonging the period when theexplants were taken and perfecting the sterilizing and culturing technique of theexplants.

; dormant buds; gibberellin; stem section; sterilizing; culturing

S604.3；S723.132.6

A

2018-02-27

國(guó)家星火計(jì)劃項(xiàng)目（2008GA610015）；天津市星火計(jì)劃項(xiàng)目（08ZHXHNC07000）；天津市林果現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目（ITTFPRS2018002）

侍藝（1996-），女，本科在讀，主要從事園藝植物組織培養(yǎng)方面的研究。E-mail：shiyigood@qq.com。

柴慈江（1960-），男，教授，碩士，主要從事園藝植物組織培養(yǎng)方面的研究。E-mail：cijiang666@163.com。

1008-5394（2018）02-0024-06

10.19640/j.cnki.jtau.2018.02.007