試析高效液相色譜法在藥品檢驗中的應(yīng)用

高姍姍

【摘 要】高效液相色譜法是一種有效的分離分析技術(shù)方法，在藥品檢驗領(lǐng)域中凸顯出應(yīng)用優(yōu)勢。隨著檢測器自動化程度的不斷提高，分離模式的日益增多，以及聯(lián)用技術(shù)的出現(xiàn)，勢必會推動高效液相色譜法的快速發(fā)展，使其成為藥品檢驗中的主流色譜分析方法，從而提高藥品檢測結(jié)果的可靠性，為加強(qiáng)藥品質(zhì)量控制提供有力依據(jù)。本文主要分析了高效液相色譜法在藥品檢驗中的應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】高效液相色譜法；藥品檢驗；應(yīng)用

高效液相色譜法在藥品檢驗中迅速發(fā)展起來，現(xiàn)在已經(jīng)發(fā)展成為了一種比較主流的藥品質(zhì)量控制方法。高效液相色譜法是從經(jīng)典液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展出來的一種效率更高、效果更好的色譜方法。這種方法采用了顆粒更細(xì)的均勻規(guī)則的固定相，傳質(zhì)阻抗小，分離效率高。同時，這種方法輸送流動相使用了高壓輸送泵，分析所需時間更短，采用了靈敏度更高的檢測器，獲得了更高的靈敏度，為高效液相色譜法的發(fā)展帶來了更大的空間。

一、高效液相色譜法概念和特點(diǎn)

（一）高效液相色譜法概念

高效液相色譜法又稱“高壓液相色譜”、“高速液相色譜”、“高分離度液相色譜”、“近代柱色譜”等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進(jìn)入檢測器進(jìn)行檢測，從而實(shí)現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。

（二）高效液相色譜法特點(diǎn)

一，高速：分析速度快、載液流速快，較經(jīng)典液體色譜法速度快得多，通常分析一個樣品在15～30分鐘，有些樣品甚至在5分鐘內(nèi)即可完成，一般小于1小時。二，高壓：流動相為液體，流經(jīng)色譜柱時，受到的阻力較大，為了能迅速通過色譜柱，必須對載液加高壓。三，高效：分離效能高?？蛇x擇固定相和流動相以達(dá)到最佳分離效果，比工業(yè)精餾塔和氣相色譜的分離效能高出許多倍。四，高靈敏度：紫外檢測器可達(dá)0.01ng，進(jìn)樣量在μL數(shù)量級。五，應(yīng)用范圍廣：百分之七十以上的有機(jī)化合物可用高效液相色譜分析，特別是高沸點(diǎn)、大分子、強(qiáng)極性、熱穩(wěn)定性差化合物的分離分析，顯示出優(yōu)勢。六，柱子可反復(fù)使用：用一根柱子可分離不同化合物；七，樣品量少、容易回收：樣品經(jīng)過色譜柱后不被破壞，可以收集單一組分或做制備。此外高效液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點(diǎn)，但也有缺點(diǎn)，與氣相色譜相比各有所長，相互補(bǔ)充。

二、高效液相色譜法在藥品檢驗中的應(yīng)用

（一）高效液相色譜法在測定藥品含量中的應(yīng)用

在測定實(shí)驗原料中各組分、各雜質(zhì)的含量時，可應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行測定，獲取更加可靠、準(zhǔn)確、快速的檢驗結(jié)果。如，在螺旋霉素發(fā)酵液中有機(jī)酸含量的測定中，可應(yīng)用高效液相色譜法測定有機(jī)酸的種類，為分析螺旋霉素代謝機(jī)制奠定基礎(chǔ)；在測定鹽酸萘甲唑啉鼻用劑型凝膠中的鹽酸萘甲唑啉含量中，應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行測定，采用乙腈將高分子物質(zhì)從凝膠基質(zhì)中析出，可有效解決高分子物質(zhì)堵塞液相柱的問題，減少測定的干擾因素；在四環(huán)素類抗生素的測定中，可應(yīng)用高效液相色譜法對四環(huán)素類抗生素及其立體異構(gòu)體進(jìn)行分離測定；在吡羅昔康含量的測定中，由于該藥物是一種酰胺類化合物，容易被氧化和水解，導(dǎo)致其水溶液的化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，所以可應(yīng)用高效液相色譜法進(jìn)行測定。在實(shí)際操作中，溶劑選用0.01mol/L的鹽酸甲醇溶液，既可以增強(qiáng)溶劑的溶解性，又可以增加吡羅昔康溶液的穩(wěn)定性，保證了檢測結(jié)果質(zhì)量；由此可見，利用高效液相色譜法對藥品進(jìn)行樣品抽檢，能夠準(zhǔn)確檢測到原料藥、中間體、各組分、各雜質(zhì)的含量，杜絕假冒偽劣藥品的流通，從而保證藥品質(zhì)量和安全。

（二）高效液相色譜法在檢測有關(guān)物質(zhì)中的應(yīng)用

由于藥品的生產(chǎn)需要經(jīng)歷多個環(huán)節(jié)，因此，藥品在不同的環(huán)節(jié)都有可能帶入雜質(zhì)。隨著我國藥品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的不斷提高，為了保障藥品的安全，對藥品中的有關(guān)物質(zhì)檢驗要求也越來越高，要求檢驗有關(guān)物質(zhì)的藥品品種大幅增加。但由于這些有關(guān)物質(zhì)的含量較低，難以通過傳統(tǒng)的色譜分析方法進(jìn)行檢測。例如，在對13批卡托普利片有關(guān)物質(zhì)檢測時，傳統(tǒng)檢測方法的檢出率也同樣小于采用高效液相色譜法檢出率，且高效液相色譜法的檢測較為便利，因此，對于藥物的日常檢測具有較為明顯的優(yōu)勢。

（三）高效液相色譜法在藥物鑒別中的應(yīng)用

運(yùn)用高效液相色譜法法鑒別藥物，可通過保留時間與組分結(jié)構(gòu)和性質(zhì)，將其作為藥物定性的參數(shù)。如，在南北五味子的鑒別中，運(yùn)用高效液相色譜法法對兩種五味子中組分含量進(jìn)行測定，采用C18柱，流動相為配比是65：35的甲醇-水，流速控制在每分鐘1.0mL，檢測波長控制在250nm，能夠快速鑒別出南北五味子的組分含量。因此，將高效液相色譜法法應(yīng)用在藥物鑒別中，能夠開辟藥物鑒別的新方法和新思路。

（四）高效液相色譜法在檢驗抗生素藥品中的應(yīng)用

對于抗生素含量的檢測，高效液相色譜法檢測主要體現(xiàn)在三方面：一，對非抗生素藥物中抗生素含量的檢測，有效地防止抗生素的濫用。目前，我國對于抗生素使用具有嚴(yán)格的限制，因抗生素易使人體對其產(chǎn)生一定的耐藥性，不利于患者自身疾病的治療，為了有效的避免抗生素的濫用對于人或動物產(chǎn)生過度的耐藥，必須嚴(yán)格限制使用。通過高效液相色譜法檢測技術(shù)，可以有效地檢測各類藥物當(dāng)中抗生素的含量，將其控制在合理范圍之內(nèi)，這樣就能更好地控制抗生素的使用；二，有效的檢測動物性食品中抗生素的含量，可有效防止抗生素的濫用。此外，高效液相色譜檢測技術(shù)也被廣泛應(yīng)用到對于動物性食品的檢測中，通過對這種技術(shù)的應(yīng)用可有效地檢測出動物性食品當(dāng)中抗生素的殘留量，有效避免了人使用了含有抗生素的肉蛋白和奶質(zhì)品后，攝入了一定的抗生素，從而使得人體對抗生素產(chǎn)生了耐藥性；三，對抗生素藥物當(dāng)中的雜質(zhì)進(jìn)行限制，有效確保抗生素的藥效達(dá)標(biāo)。通過高效液相色譜檢測技術(shù)能夠更好地對抗生素藥物進(jìn)行檢測，并對雜質(zhì)的限量進(jìn)行控制，也具有較為重要的意義。臨床上采用抗生素對于其所存在的不良反應(yīng)進(jìn)行檢測，分析主要原因，這是因原料中的中間體和降解產(chǎn)物，特別是聚合物而引起藥物使用者會出現(xiàn)不良反應(yīng)，且有時會產(chǎn)生非常嚴(yán)重的后果，甚至?xí)颊叩纳踩a(chǎn)生較嚴(yán)重的威脅。

（五）高效液相色譜法在檢測中藥質(zhì)量中的應(yīng)用

中藥成分的特點(diǎn)呈多樣化和復(fù)雜性，這給分析中藥成分帶來了重重阻力，中藥所含成分既多又復(fù)雜，只有各成分之間組合得當(dāng)，才能發(fā)揮療效。高效液相色譜法的出現(xiàn)，能夠?qū)⒅兴幹懈鞒煞只虼郎y成分與其他雜質(zhì)進(jìn)行有效地、快速地脫軌、剝離，進(jìn)而把中藥中所含成分搞得清清楚楚。

三、結(jié)束語

高效液相色譜法能夠有效、準(zhǔn)確、高效率的進(jìn)行藥品含量的測定，還能夠進(jìn)行藥品相關(guān)物質(zhì)的檢查，對非法違禁成分擋風(fēng)監(jiān)控和抗生素進(jìn)行檢測。高效液相色譜法有著較高的抗干擾能力，對成分復(fù)雜的中藥以及以中藥為基礎(chǔ)的保健品中的違禁品的測量效果良好，對規(guī)范保健品市場有著重要的意義。

【參考文獻(xiàn)】

[1]賁新琰.淺談高效液相色譜法在藥品檢驗中的體現(xiàn)[J].科技創(chuàng)新與應(yīng)用，2016（16）：74-74.

[2]楊慧，封公喜，單蘭天.高效液相色譜法在藥品檢驗中的應(yīng)用研究[J].山東工業(yè)技術(shù)，2017（13）：268-268.

[3]韓秀偉，高衛(wèi)曉.芻議高效液相色譜法在藥品檢驗中的應(yīng)用[J].醫(yī)藥衛(wèi)生：全文版，2016（12）：00115-00115.