哮喘分期及激素敏感性和血清糖皮質(zhì)激素受體水平及其分型相關(guān)性研究

劉蓓蕾 陳玉華

(深圳市坪山新區(qū)人民醫(yī)院 深圳 518000)

哮喘是一種常見的臨床疾病，將會對患者造成一定的不良影響，并降低其生活質(zhì)量，臨床中主要分為激素敏感型和抵抗型，醫(yī)生主要讓患者服用糖皮質(zhì)激素進(jìn)行治療，能夠有效的使患者進(jìn)入疾病的緩解期[1]。若想進(jìn)一步的采取針對性的治療方案，則需要對患者的GRα、GRβ、GRγ、GRP含量進(jìn)行測量，并需要明確不同哮喘ACQ5評分和哮喘糖皮質(zhì)激素受體GRα、GRβ、GRγ、GRP四型的相關(guān)性，如此才能夠提升治療效果[2～3]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年1月～2018年4月50例哮喘中重度患者，依據(jù)不同類型分為激素敏感性和激素抵抗型哮喘患者。激素敏感性哮喘患者25例，作為激素敏感性組，男18例，女7例，年齡為39～58歲，平均年齡為(48.5±4.9)歲；激素抵抗型哮喘患者25例，作為激素抵抗型組，男19例，女6例，年齡為40～59歲，平均年齡為(49.6±5.1)歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)符合《2008年中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會制定的支氣管哮喘防治指南》中關(guān)于哮喘疾病的臨床診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)未患有其他呼吸疾病。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)患有嚴(yán)重的心、肝、腎等疾病；(2)對糖皮質(zhì)激素過敏。將本研究的目的與方法向患者及其家屬講明，并自愿簽署知情同意書。在醫(yī)院倫理委員會同意并監(jiān)督的情況下進(jìn)行本實(shí)驗(yàn)。使用相應(yīng)的統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對兩組患者的一般資料進(jìn)行處理，結(jié)果顯示兩組患者之間的性別、年齡、病情等差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上不具有顯著性(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

(1)使患者服用糖皮質(zhì)激素，如潑尼松(國藥準(zhǔn)字H62020285，甘肅扶正藥業(yè)科技股份有限公司)，每日40mg，連續(xù)服用2周。

(2)使用PCR測量GRα、GRβ、GRγ、GRP含量：①早晨空腹抽取哮喘患者外周肘靜脈血5ml, EDTA抗凝試管；離心后取上層清液，用1∶1無菌生理鹽水稀釋下層血細(xì)胞，吸取淋巴細(xì)胞分離液 5ml于15ml離心管中，傾斜離心管45度，緩慢加入稀釋好的血細(xì)胞，進(jìn)行離心，用滴管小心吸取白膜層轉(zhuǎn)移至于另一15ml離心管，10ml無菌生理鹽水洗滌細(xì)胞2次，之后再次進(jìn)行離心，向15ml離心管加1ml無菌生理鹽水，將細(xì)胞吹散，用細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)，然后分裝到1.5ml EP 管中，每管細(xì)胞數(shù)1.0×106～1.0×107，1500rpm離心5min，-80℃保存。②總 RNA 提取 0.1%的 DEPC 水浸泡所有提取 RNA 的器具，高壓滅菌后使用，液體試劑用高壓滅菌的0.1%的DEPC水配制。參照試劑說明書提取總 RNA和反轉(zhuǎn)錄。③PCR反應(yīng)按TaKaRa SYBR PrimeScrip RT-PCR試劑盒說明書進(jìn)行，使用LightCycler 480 Real-time PCR儀擴(kuò)增及檢測，反應(yīng)結(jié)束后分析擴(kuò)增曲線和融解曲線，所有PCR產(chǎn)物均經(jīng)融解曲線分析以分辨目的產(chǎn)物與非特異產(chǎn)物及引物二聚體，電腦分析熒光信號并轉(zhuǎn)換為Ct值。

1.3 觀察指標(biāo)

(1)GRα、GRβ、GRγ、GRP含量。

(2)不同哮喘ACQ5評分和哮喘糖皮質(zhì)激素受體四型的相關(guān)性。

(3)患者的急性發(fā)作期與緩解期的哮喘ACQ5評分，主要包括喘息發(fā)作、肺部出現(xiàn)喘鳴音、喘息突然發(fā)作與其他特應(yīng)性病史等?？偡殖^5分則說明患者有嚴(yán)重的哮喘，總分低于4分則說明為疑似哮喘病。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

建立Excel數(shù)據(jù)庫對數(shù)據(jù)資料進(jìn)行分析，分析軟件工具SPSS20.0，計(jì)量資料采用均數(shù)方差表示且用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用百分率表示且用χ2檢驗(yàn)。當(dāng)P<0.05時，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的GRα、GRβ、GRγ、GRP含量比較

激素抵抗型哮喘患者的GRα明顯低于激素敏感性患者，但其余指標(biāo)均較高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表1。

2.2 兩組患者的不同哮喘ACQ5評分和哮喘糖皮質(zhì)激素受體四型的相關(guān)性

不同哮喘ACQ5評分和哮喘糖皮質(zhì)激素受體四型呈正相關(guān)性，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表2。

2.3 兩組患者的急性發(fā)作期與緩解期的哮喘ACQ5評分

兩組患者急性發(fā)作期的哮喘ACQ5評分無顯著差異，不具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；激素抵抗型組的緩解期的哮喘ACQ5評分明顯高于激素敏感性組，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，見表3。

3 討論

支氣管哮喘是呼吸系統(tǒng)疾病中常見的氣道慢性過敏反應(yīng)性炎癥性疾病，已有研究資料表明，我國約有3000萬哮喘患者，哮喘已經(jīng)成為我國第二大呼吸系統(tǒng)疾病。為進(jìn)行有效的治療，目前醫(yī)生常使用糖皮質(zhì)激素等藥物，能夠獲得顯著的臨床效果[4]。然而由于不同類型的哮喘患者對于治療將產(chǎn)生不同效果，因此需要明確不同類型患者的GRα、GRβ、GRγ、GRP含量，同時還需要明確不同哮喘ACQ5評分和哮喘糖皮質(zhì)激素受體四型的相關(guān)性，如此才能夠進(jìn)行針對性的治療[5～6]。依據(jù)本項(xiàng)研究結(jié)果可知，激素抵抗型哮喘患者的GRα明顯較低，但其他3項(xiàng)指標(biāo)明顯較高，并且不同哮喘ACQ5評分和哮喘糖皮質(zhì)激素受體四型呈正相關(guān)性，正是鑒于上述研究結(jié)果的存在，為臨床上對可能存在激素抵抗型的哮喘患者，需要及早做出判斷，以免因控制哮喘病情，大劑量長期應(yīng)用激素帶來嚴(yán)重副作用及并發(fā)癥的可能，進(jìn)而能夠有效的對患者起到良好的治療效果，使患者擺脫病痛，提升生活質(zhì)量。

表1 兩組患者的GRα、GRβ、GRγ、GRP含量比較

組別GRαGRβGRγGRP激素抵抗型組(n=25)0.44±0.160.58±0.190.59±0.240.56±0.16激素敏感性組(n=25)0.59±0.210.41±0.230.37±0.180.41±0.05t2.8412.8493.6674.474P0.0070.0060.00060.000

表2 兩組患者的不同哮喘ACQ5評分和哮喘糖皮質(zhì)激素受體四型的相關(guān)性

組別βSEWaldχ2POR95%CI激素抵抗型組(n=25)1.130.2912.02<0.013.131.34～6.41激素敏感性組(n=25)-0.310.1117.74<0.010.670.05～0.91

表3 兩組患者的急性發(fā)作期與緩解期的哮喘ACQ5評分

組別急性發(fā)作期緩解期激素抵抗型組(n=25)6.24±0.423.69±0.25激素敏感性組(n=25)6.25±0.372.03±0.13t0.08929.456P0.9290.000

綜上所述，本文認(rèn)為糖皮質(zhì)激素能夠有效的治療哮喘病，但仍然需要對不同類型患者的GRα、GRβ、GRγ、GRP含量進(jìn)行檢測，并研究上述指標(biāo)與哮喘ACQ5評分的相關(guān)性，如此才能夠提升治療效果。