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    不同禽群免疫H5+H7N9二價(jià)苗抗體比較

    2018-08-01 02:19:08陳肇源陳盛文萬慶文陳桂霞
    畜牧獸醫(yī)科技信息 2018年7期
    關(guān)鍵詞:二價(jià)雞場東莞市

    陳肇源,陳盛文,萬慶文,陳桂霞

    (1.廣東省東莞市萬江農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,廣東 東莞 523050;2.東莞市長安鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)技術(shù)服務(wù)中心,廣東 東莞 523846)

    禽流感是由禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)引起的高度接觸性傳染病。其中,H7N9亞型流感是A型流感中的一種,2013年3月31日首先在中國上海和安徽發(fā)現(xiàn)了3例人感染H7N9流感病例。為遏制H7N9流感疫情,2017年7月開始,東莞市進(jìn)行了H5+H7N9二價(jià)苗試點(diǎn)免疫,以掌握疫苗對(duì)家禽的保護(hù)效果和抗體水平消漲情況。

    1 材料與方法

    1.1 樣品采集

    來自東莞市2個(gè)種雞場、2個(gè)肉雞場、1個(gè)肉鵝場。在免疫當(dāng)天(0d)以翅靜脈采血,采集全血樣品2mL,以3500r/min離心15min分離獲得待檢血清,-20℃保存?zhèn)錂z作為免疫前對(duì)比。用哈爾濱維科生物技術(shù)開發(fā)公司提供的重組禽流感病毒(H5+H7)二價(jià)滅活疫苗(H5N1 Re-8株+H7N9 H7-Re1株,批號(hào)為20180603)免疫21d后,采集血清待檢。

    1.2 試劑與方法

    表1 不同禽群免疫21d后H5N1 Re-8株抗體水平比較

    表2 不同禽群免疫21d后H7N9 H7-Re1株抗體水平比較

    1.2.1 1%雞紅細(xì)胞懸液

    采集實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)的3只禽流感和新城疫非免疫的健康公雞的血液與阿氏液等體積混合,用pH值7.2的0.01mol/L PBS液洗滌3次,每次以1000r/min離心10min,洗滌后用PBS液配成體積分?jǐn)?shù)1%雞紅細(xì)胞懸液,4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

    1.2.2 檢測試劑

    抗體檢測試劑禽流感H5N1 Re-8株和H7N9 H7-Re1株抗原及陽性血清,由中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院哈爾濱獸醫(yī)研究所提供。

    1.2.3 主要耗材和儀器

    96孔“V”型反應(yīng)板,離心機(jī),8道移液器,微量震蕩器。

    1.2.4 檢測方法

    按照《高致病性禽流感診斷技術(shù)》(GB/T18936-2003)規(guī)定的血凝與血凝抑制方法操作。以完全抑制4單位抗原的血清最高稀釋倍數(shù)作為HI的滴度。HI效價(jià)小于或等于31og2判陰性,HI效價(jià)大于或等于41og2判陽性,判定為抗體合格。

    2 結(jié) 果(見表1.2)

    2.1 種雞場群體抗體水平

    兩個(gè)種雞場免疫前H5N1 Re-8株整體抗體水平為100%,H7N9 H7-Re1株抗體水平為24.14%,免疫21d后,H5N1 Re-8株為100%,H7N9 H7-Re1株為91.38%。

    2.2 肉雞場群體抗體水平

    2個(gè)肉雞場免疫前H5N1 Re-8株整體抗體水平為96.67%,H7N9 H7-Re1株抗體水平為0,免疫21d后,H5N1 Re-8株為100%,H7N9 H7-Re1株為78.57%。

    2.3 肉鵝場群體抗體水平

    免疫前H5N1 Re-8株整體抗體水平為96.15%,H7N9 H7-Re1株抗體水平為 0,免疫 21d后,H5N1 Re-8株為100%,H7N9 H7-Re1株為96.43%。

    3 討論

    3.1 試驗(yàn)禽在免疫H5+H7N9二價(jià)苗前已有免疫H5亞型疫苗的基礎(chǔ),在免疫該二價(jià)苗后H5N1 Re-8株抗體水平基本未受到H7N9 H7-Re1株的影響,同時(shí)仍有較大增幅,抗體陽性率均達(dá)到100%。

    3.2 試驗(yàn)禽在免疫后,H7N9 H7-Re1株抗體水平基本能達(dá)到70%以上,甚至95%以上,證明該二價(jià)苗在H7N9 H7-Re1株上有較好的保護(hù)力,肉雞場A抗體為69.23%,送樣的15份血清中有2份發(fā)生溶血,對(duì)檢測結(jié)果造成了一定影響。另外,種雞場在免疫前已檢到一定的抗體,據(jù)調(diào)查,種雞場A和種雞場B在農(nóng)業(yè)部試點(diǎn)免疫H5+H7N9二價(jià)苗前已私下購買使用其他廠家的H5+H7N9二價(jià)苗,也不排除存在其他可能因素,目前,該兩個(gè)種雞場已因畜禽養(yǎng)殖污染整治被清理,當(dāng)時(shí)抽檢的雞群也已宰殺銷售,具體原因暫未能查明。

    3.3 肉鵝場在免疫一次H5+H7N9二價(jià)苗后,抗體水平能夠達(dá)到96.43%,說明H7N9 H7-Re1株對(duì)水禽也能產(chǎn)生明顯的免疫應(yīng)答反應(yīng),這和相關(guān)研究也是相吻合的。

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