豇豆中5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥殘留的毛細(xì)管氣相色譜測(cè)定

周振榮 黃敏 黎小鵬 陳楠 馬世柱

摘 要：本文建立了豇豆中五氯硝基苯、乙烯菌核利、異菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥的氣相色譜ECD檢測(cè)器測(cè)定方法。樣品經(jīng)乙腈提取，氮吹濃縮后弗羅里矽柱固相萃取小柱凈化，正己烷定容后上機(jī)測(cè)定。五氯硝基苯、乙烯菌核利、異菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯等5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥在0.05～1.0 mg/L范圍內(nèi)均具有較好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)均不低于0.99897，待測(cè)5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥在0.3mg/kg和0.8mg/kg兩個(gè)水平加標(biāo)回收率為80.3%～105.4%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.8%～11.4%。該方法靈敏度和精密度都能滿足蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)的要求，且前處理較為簡單，雜質(zhì)干擾少，適合在同行檢測(cè)機(jī)構(gòu)推廣使用。

關(guān)鍵詞：氣相色譜法；豇豆；有機(jī)氯農(nóng)藥；擬除蟲菊酯類農(nóng)藥；殘留量

豇豆是我國栽培面積較大的一種蔬菜，尤其在南方熱帶亞熱帶地區(qū)廣泛種植。然后，豇豆在種植過程中容易受到蟲害，若不施用農(nóng)藥，很難獲得理想的收成。然后，施用農(nóng)藥很容易造成豇豆農(nóng)藥殘留超標(biāo)，自從海南毒豇豆事件爆發(fā)后，豇豆農(nóng)藥殘留問題引起了大家的高度重視。

目前有關(guān)豇豆農(nóng)藥殘留檢測(cè)主要集中在有機(jī)磷農(nóng)藥和氨基甲酸酯農(nóng)藥[1-3]，日常有關(guān)蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)國標(biāo)也主要是針對(duì)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥。

而豇豆中有機(jī)氯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥殘留檢測(cè)鮮見報(bào)道。本文利用氣相色譜ECD檢測(cè)器同時(shí)對(duì)豇豆中五氯硝基苯、乙烯菌核利、異菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥進(jìn)行快速測(cè)定，該方法回收率和靈敏度均較高，滿足農(nóng)藥殘留分析檢測(cè)的要求。

一、實(shí)驗(yàn)部分

1.實(shí)驗(yàn)儀器

配有ECD檢測(cè)器的7890A型氣相色譜儀（美國安捷倫），BSA22型百分之一電子分析天平（賽多利斯），T-18 basic型勻漿機(jī)（IKA），HGC-24A型氮吹儀（天津恒奧），24管固相萃取裝置（Supelco），VORTEX 3型旋渦混合器（IKA）。

2.實(shí)驗(yàn)試劑及耗材

前處理用乙腈、氯化鈉、丙酮和正己烷均為分析純，金華大品牌；弗羅里矽柱固相萃取小柱（1000mg 6mL），CNW公司生產(chǎn)；最終凈化和定容用丙酮和正己烷均為色譜純，Genius公司生產(chǎn)；過濾用2毫升一次性注射器，雙鴿集團(tuán)公司生產(chǎn)；過濾用0.22 μm有機(jī)相針筒過濾器，CNW公司生產(chǎn)； 2毫升進(jìn)樣瓶，安捷倫公司生產(chǎn)。

3.標(biāo)準(zhǔn)溶液的配置

五氯硝基苯、乙烯菌核利、異菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品均從農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研監(jiān)測(cè)所（天津）采購，濃度分別為1000mg/L，用不含以上5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥的豇豆正己烷基質(zhì)溶液將以上5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品配置成濃度分別為0.05、0.1、0.2、0.5、1.0 mg/L的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，待上機(jī)測(cè)定。

4.樣品提取和凈化

用百分之一電子分析天平稱取約20.0g搗碎的豇豆樣品到150mL燒杯中，量取40.0mL分析純乙腈溶液到燒杯中，以10000r/min的速度高速勻漿2min左右，將勻漿后的樣品提取液過濾，濾液收集到裝有7g左右氯化鈉的具塞錐形瓶中，帶塞劇烈震蕩2min，室溫靜置30min，使乙腈和水相完全分層。

用移液管從具塞錐形瓶中準(zhǔn)確移取10.00mL上層乙腈溶液到10mL刻度離心管中，放入氮吹儀邊通氮?dú)膺呉?5℃溫度加熱，當(dāng)刻度離心管吹至近干時(shí)，從氮吹儀拿出刻度離心管并冷卻，用移液管準(zhǔn)確移取2.00mL色譜純正己烷溶解殘?jiān)?，待固相萃取凈化?/p>

凈化用弗羅里矽柱固相萃取小柱預(yù)先分別用5.0mL色譜純丙酮+正己烷（10+90）混合溶液、5.0mL色譜純正己烷預(yù)淋洗活化，當(dāng)溶劑液面到達(dá)柱吸附層表面時(shí)，立即倒入上述待凈化正己烷溶液，15mL尖底離心管收集洗脫液，用10mL丙酮+正己烷（10+90）分兩次沖洗刻度離心管后過柱。將裝有洗脫液的尖底離心管置于氮吹儀，60℃氮吹至近干，用色譜純正己烷定容至5mL，旋渦混合均勻，過0.22 μm有機(jī)濾膜，供氣相色譜分析測(cè)定。

5.上機(jī)測(cè)定條件

色譜柱：HP-5柱 30 m×320 μm×0.25 μm；載氣：氮?dú)?；載氣流速：2.5 mL/min；尾吹氣：氮?dú)?0 mL/min；進(jìn)樣口溫度：200 ℃；檢測(cè)器及溫度：ECD 300 ℃；程序柱溫：150 ℃，保持2min，以8℃/min升溫至260℃，保持8 min；進(jìn)樣體積：1 μL；進(jìn)樣方式：分流進(jìn)樣；分流比：10：1；定量方法：外標(biāo)法。

二、結(jié)果與討論

1.5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥的標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

由于待測(cè)的5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥極性均較低，實(shí)驗(yàn)直接選擇弱極性的固定相HP-5柱作為分析柱，按照上述1.5的上機(jī)測(cè)定條件，測(cè)定待測(cè)的5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品，得到5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖（圖1），測(cè)定結(jié)果表明，5種待測(cè)有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥在21分鐘內(nèi)獲得了良好分離。

1.五氯硝基苯；2.乙烯菌核利；3.異菌脲；4-1.氟氰戊菊酯-1； 4-2.氟氰戊菊酯-2；5. 氟胺氰菊酯

2.標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍及檢出限

將上述1.3配置好的五氯硝基苯、乙烯菌核利、異菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥豇豆正己烷基質(zhì)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液直接用氣相色譜ECD檢測(cè)器測(cè)定。以各種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰峰高比噪音S/N>3計(jì)算方法定性限，以各種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品色譜峰面積對(duì)該農(nóng)藥的濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到各農(nóng)藥的線性方程及相關(guān)系數(shù)（表1）。五氯硝基苯、乙烯菌核利、異菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥在0.05-1.0mg·L-1范圍內(nèi)呈現(xiàn)出較好的線性關(guān)系，r2均不低于0.99897。

3.方法回收率和精密度

在不含待測(cè)五氯硝基苯、乙烯菌核利、異菌脲、氟氰戊菊酯和氟胺氰菊酯5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥的空白豇豆樣品中分別添加0.3mg/kg和0.8mg/kg兩個(gè)水平的5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥混合標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)，并進(jìn)行6個(gè)樣品重復(fù)測(cè)定，待測(cè)的5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥的加標(biāo)回收率在80.3%～105.4%之間，6個(gè)重復(fù)樣品的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在5.8%～11.4%之間。方法回收率和精密度均能滿足蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)的要求。

三、結(jié)語

本文利用乙腈提取，氮吹濃縮后弗羅里矽柱固相萃取小柱凈化，正己烷定容后上機(jī)測(cè)定，建立了氣相色譜ECD檢測(cè)器測(cè)定豇豆中5種有機(jī)氯和菊酯類農(nóng)藥的快速測(cè)定方法。方法靈敏度和精密度都能滿足蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)的要求，且前處理較為簡單，雜質(zhì)干擾少，適合在同行檢測(cè)機(jī)構(gòu)推廣使用。

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作者簡介： 周振榮（1963-）， 男，廣東茂名人，大專。

通訊簡介： 黎小鵬（1965-）， 女， 廣東中山人，高級(jí)農(nóng)藝師。