幾種環(huán)境因子對黃花磯松種子萌發(fā)的影響

王靖靖，余 玲，朱 恭，陳香來，胡小文

(1.蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)生態(tài)系統(tǒng)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 蘭州大學(xué)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部草牧業(yè)創(chuàng)新重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院，甘肅 蘭州 730020； 2. 蘭州市南北兩山環(huán)境綠化工程指揮部，甘肅 蘭州 730046)

黃花磯松(Limoniumaureum)又名黃花補(bǔ)血草、金色補(bǔ)血草、金匙草等，白花丹科(Plumbaginaceae)補(bǔ)血草屬(Limonium)，多年生旱生泌鹽草本植物[1]。其具有抗鹽堿、抗干旱等特性，對惡劣環(huán)境的適應(yīng)性極強(qiáng)，常見于灘地、流動(dòng)沙丘、戈壁、荒漠等干旱半干旱荒漠地區(qū)。在我國呼倫貝爾沙地、河西走廊沙地以及華北北部等地均有分布[2-3]。作為干旱荒漠地區(qū)為數(shù)不多的野生花卉之一，黃花磯松有著十分重要的觀賞、生態(tài)和藥用等價(jià)值。

黃花磯松在惡劣環(huán)境下能夠生長發(fā)育的前提是種子能夠萌發(fā)。然而，種子萌發(fā)通常是植物生活史最為脆弱的階段，容易受外界環(huán)境因子如溫度、水分、光照等影響[4-5]。溫度是影響植物時(shí)空分布的控制因子，對種子萌發(fā)以及出苗起到關(guān)鍵性作用，能夠促進(jìn)或抑制種子吸水，影響酶促過程[6-7]；光照作為一種信號分子影響種子萌發(fā)，促進(jìn)或抑制種子休眠，進(jìn)而調(diào)控種子在適宜條件下的萌發(fā)[8-9]；水分是干旱半干旱地區(qū)種子萌發(fā)的決定因素，尤其是荒漠鹽漬化地區(qū)，主要通過滲透脅迫影響種子的萌發(fā)[10]；鹽分是鹽漬化地區(qū)種子萌發(fā)的限制因子，嚴(yán)重影響該地區(qū)種子的萌發(fā)以及出苗生長；埋藏深度直接影響植物的出苗率以及出苗速率[11]。因此，研究多環(huán)境因子對種子萌發(fā)的影響對于明確黃花磯松在自然條件下的萌發(fā)機(jī)制、栽培利用等都具有重要意義。

目前，圍繞黃花磯松引種栽培、組織培養(yǎng)、育苗技術(shù)、化學(xué)成分、超干保存、結(jié)構(gòu)解剖學(xué)以及鹽脅迫機(jī)制等方面的研究工作報(bào)道較多[12-13]，但有關(guān)其種子萌發(fā)特性的研究比較零散，如李陽春等[14]和王俊年等[15]研究了溫度對其種子萌發(fā)的影響；高天鵬等[16]和馬全林等[17]探究了埋深對其種子萌發(fā)的作用；尤佳等[18-19]探討了鹽脅迫對其種子萌發(fā)的影響機(jī)理。這些研究都從單一方面為探究黃花磯松種子的萌發(fā)特性提供了參考。但種子萌發(fā)通常會受到多種環(huán)境因子的影響，因此系統(tǒng)研究多種環(huán)境因子對黃花磯松種子萌發(fā)、出苗以及生理生態(tài)學(xué)特性具重要意義。此外，黃花磯松作為一種旱生泌鹽植物，目前尚不清晰其對干旱和鹽漬化的耐受程度，所以開展黃花磯松種子萌發(fā)對水分和鹽分脅迫的耐受閾值分析研究，可為明確黃花磯松種子抗旱耐鹽性能，發(fā)掘其在荒漠鹽漬化地區(qū)土壤改良方面的潛能奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)地點(diǎn)和時(shí)間

本研究于2017年3月至2017年6月在蘭州大學(xué)草地農(nóng)業(yè)科技學(xué)院榆中校區(qū)實(shí)驗(yàn)站完成。萌發(fā)試驗(yàn)于光照培養(yǎng)箱中進(jìn)行，埋深試驗(yàn)于智能溫室中進(jìn)行。

1.2 供試材料

供試種為野生種，于2016年采集于甘肅省民勤縣沙生植物園，種子清選后貯藏于室溫條件下備用。千粒重為(0.73±0.05) g。

1.3 不同環(huán)境因子對黃花磯松種子萌發(fā)的影響

1.3.1溫度和光照 采用培養(yǎng)皿紙上發(fā)芽法，設(shè)置5、10、15、20、25、30、35、40、45 ℃共9個(gè)恒溫和15/25、20/30 ℃兩個(gè)變溫條件以及12 h光照/12 h黑暗(12 h L/12 h D)、24 h黑暗(24 h D)兩個(gè)光照條件。試驗(yàn)中使用雙層錫箔紙將培養(yǎng)皿包裹嚴(yán)實(shí)來模擬全黑暗條件。每個(gè)處理設(shè)置4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50粒種子。以胚根突破種皮為標(biāo)準(zhǔn)來判斷種子是否萌發(fā)，萌發(fā)高峰期增加統(tǒng)計(jì)次數(shù)，其余時(shí)間每24 h統(tǒng)計(jì)一次，種子萌發(fā)高峰期過后連續(xù)3 d沒有種子萌發(fā)即視為試驗(yàn)結(jié)束，試驗(yàn)期共21 d。全黑暗條件下的樣品僅于試驗(yàn)結(jié)束后統(tǒng)計(jì)一次，以防試驗(yàn)期內(nèi)統(tǒng)計(jì)時(shí)遇光影響結(jié)果的可靠性，與光照條件下的樣品同時(shí)結(jié)束，以確?？杀容^性。

1.3.2水分脅迫和NaCl脅迫 同上使用培養(yǎng)皿紙上發(fā)芽法，在25 ℃、12 h L/12 h D條件下，根據(jù)Michel和Kaufmann[20]的方法按照公式計(jì)算設(shè)置水勢為0(CK)、-0.3、-0.6、-0.9、-1.2和-1.5 MPa的6個(gè)PEG-6000溶液以及滲透勢為0(CK)、-0.3、-0.6、-0.9、-1.2、-1.5、-1.8、-2.1和-2.4 MPa的9個(gè)NaCl溶液，NaCl溶液對應(yīng)的摩爾濃度依次為0、0.090、0.151、0.213、0.274、0.336、0.398、0.459、0.521 mol·L-1。每個(gè)處理設(shè)置4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)50粒種子，萌發(fā)標(biāo)準(zhǔn)同上。每24 h統(tǒng)計(jì)一次，種子萌發(fā)高峰期過后連續(xù)3 d沒有種子萌發(fā)即視為試驗(yàn)結(jié)束，脅迫期共14 d。在水分脅迫和鹽脅迫試驗(yàn)結(jié)束后立即進(jìn)行恢復(fù)試驗(yàn)，即將脅迫處理?xiàng)l件下未萌發(fā)的種子轉(zhuǎn)移到加有蒸餾水的培養(yǎng)皿中，定期統(tǒng)計(jì)萌發(fā)個(gè)數(shù)直至試驗(yàn)結(jié)束并且計(jì)算恢復(fù)萌發(fā)率，恢復(fù)試驗(yàn)結(jié)束標(biāo)準(zhǔn)同上，恢復(fù)期為11 d。

1.3.3埋深 埋深試驗(yàn)采用盆缽法，設(shè)置8個(gè)埋深梯度：0(CK)、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0、3.0和4.0 cm，每個(gè)處理設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)100粒黃花磯松種子。基質(zhì)沙層和覆蓋沙層購買于榆中縣夏官營鎮(zhèn)沙場，均需過篩(粒徑2 mm)且130 ℃高溫消毒2 h。黃花磯松子葉突出表層即視為出苗，試驗(yàn)期間每24 h觀察一次出苗情況，種子出苗高峰期過后連續(xù)3 d沒有種子出苗即視為試驗(yàn)結(jié)束，試驗(yàn)周期21 d。

1.4 測定指標(biāo)

共測定萌發(fā)率、出苗率、萌發(fā)指數(shù)、出苗指數(shù)、恢復(fù)萌發(fā)率(recovering germination percentage,RGP)[21]、總萌發(fā)率(total germination percentage,TGP)[21]、耐旱(鹽)適宜濃度、耐旱(鹽)半致死濃度、耐旱(鹽)完全致死濃度。

萌發(fā)(出苗)率=(n/N)×100%;

式中：n為供試種子中萌發(fā)(出苗)的種子數(shù)；N為供試種子數(shù)。

萌發(fā)(出苗)指數(shù)=∑(Gt/Dt)；

式中：Gt為供試種子中與Dt相對應(yīng)每天萌發(fā)(出苗)的種子數(shù)；Dt為萌發(fā)天數(shù)。

RGP=[m/(N-n)]×100%；

式中：m為恢復(fù)試驗(yàn)中萌發(fā)的種子數(shù)；n為脅迫試驗(yàn)中萌發(fā)的種子數(shù)；N為進(jìn)行脅迫試驗(yàn)的總種子數(shù)。

TGP=[(m+n)/N]×100%；

式中：m為恢復(fù)試驗(yàn)中萌發(fā)的種子數(shù)；n為脅迫試驗(yàn)中萌發(fā)的種子數(shù)；N為進(jìn)行脅迫試驗(yàn)的總種子數(shù)。

耐旱(鹽)適宜濃度：種子萌發(fā)率為對照的75%時(shí)所對應(yīng)的滲透勢。

耐旱(鹽)半致死濃度：種子萌發(fā)率為對照的50%時(shí)所對應(yīng)的滲透勢。

耐旱(鹽)完全致死濃度：種子萌發(fā)率為0時(shí)所對應(yīng)的滲透勢。

1.5 數(shù)據(jù)分析

數(shù)據(jù)采用Excel 2013錄入并作圖， SPSS 21.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，用Duncan法進(jìn)行One-way(P<0.05)、Two-way ANOVA分析(P<0.001)和線性回歸分析(P<0.001)，用LSD多重比較法檢驗(yàn)其差異顯著性。

2 結(jié)果

2.1 溫度和光照對黃花磯松種子萌發(fā)的影響

隨溫度的升高黃花磯松種子萌發(fā)率以及萌發(fā)指數(shù)均呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(圖1)。萌發(fā)率在大于30 ℃的高溫以及低于15 ℃時(shí)顯著下降(P<0.05)。萌發(fā)指數(shù)在25、30和20/30 ℃時(shí)較高，相比于20～30 ℃，5～15和35～45 ℃溫度條件下萌發(fā)指數(shù)均顯著下降(P<0.05)(圖1)。

35和40 ℃時(shí)，光照條件下黃花磯松種子萌發(fā)率顯著高于黑暗條件下(P<0.05)(圖1)，其余溫度條件下有無光照不影響黃花磯松種子的萌發(fā)率(P>0.05)。

圖1 溫度和光照對黃花磯松種子萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)的影響Fig. 1 Effect of temperature and light on the germination percentage and index of Limonium aureum

同一因素不同處理間不同小寫字母表示差異顯著(P<0.05)，下同。

Different lowercase letters represent significant differences aming the different treatments under the same factor at the 0.05 level; similarly for the following figures.

雙因素方差分析的結(jié)果表明，溫度、光照以及二者互作均極顯著影響黃花磯松種子的萌發(fā)率(P<0.001)(表1)。

2.2 水分脅迫和NaCl脅迫對黃花磯松種子萌發(fā)的影響

隨著水分脅迫和鹽脅迫的加重，黃花磯松種子的萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)逐漸降低(圖2)。當(dāng)PEG溶液滲透勢為-1.5 MPa時(shí)無種子萌發(fā)。然而，當(dāng)NaCl溶液滲透勢為-2.4 MPa時(shí)仍有8%的種子能夠萌發(fā)。

在等滲的PEG和NaCl條件下，黃花磯松種子除了萌發(fā)率在0、-0.3和-0.6 MPa以及萌發(fā)指數(shù)在0和-0.3 MPa無顯著差異(P>0.05)(圖2)外，在其他滲透勢下，鹽脅迫條件下的萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)均顯著高于水分脅迫條件下(P<0.05)。

回歸分析結(jié)果表明，無論是干旱脅迫還是鹽脅迫，黃花磯松種子萌發(fā)率和滲透勢均呈極顯著正相關(guān)關(guān)系(P<0.001)(表2)，脅迫對種子萌發(fā)率的影響程度為PEG>NaCl，說明PEG脅迫對黃花磯松種子萌發(fā)的抑制作用更強(qiáng)。在這兩種等滲溶液中，種子萌發(fā)的抗旱和耐鹽半致死濃度分別為-0.64和-0.84 MPa。黃花磯松種子萌發(fā)對兩種脅迫的耐受程度為適宜濃度是PEG>NaCl；而半致死濃度值和和完全致死濃度是NaCl>PEG。

表1 溫度、光照及其互作對黃花磯松種子萌發(fā)率的影響的雙因素方差分析Table 1 Two-way ANOVA of the effect of temperature, light and their interaction on the germination percentage of Limonium aureum

圖2 水分脅迫和NaCl脅迫對黃花磯松種子萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)的影響Fig. 2 Effect of water and NaCl stress on germination percentage and index of Limonium aureum

脅迫類型 Stress type決定系數(shù)R2回歸方程 Linear regression 適宜濃度 Suitable concentration/MPa半致死濃度Median lethal concentration/MPa完全致死濃度 Total lethal concentration/MPaPEG0.875***y=97.405+76.095x-0.32-0.64-1.28NaCl0.802***y=79.922+36.972x-0.18-0.84-2.16

***表示在0.001水平上差異顯著。

*** indicate significant differences at the 0.001 level.

隨PEG溶液和NaCl溶液滲透勢的下降，黃花磯松種子的恢復(fù)萌發(fā)率逐漸升高，而總萌發(fā)率呈現(xiàn)先降低后升高的趨勢，在-0.6 MPa時(shí)最小(圖3)。在等滲的PEG和NaCl脅迫條件下，黃花磯松種子恢復(fù)萌發(fā)率只有在-0.3 MPa以及總萌發(fā)率在-0.6 MPa時(shí)，NaCl顯著高于等滲的PEG(P<0.05)，在其余條件下均無顯著差異(P>0.05)。

2.3 埋深對黃花磯松種子萌發(fā)的影響

隨埋深增加黃花磯松出苗率和出苗指數(shù)均呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(圖4)。埋深0.5 cm 時(shí)，出苗率與出苗速率達(dá)到最大，而后隨埋深增加，出苗率顯著下降(P<0.05)，埋深3 cm及以上時(shí)，出苗率為0。

圖3 水分脅迫和NaCl脅迫對黃花磯松種子恢復(fù)萌發(fā)率和總萌發(fā)率的影響Fig. 3 Effect of water and NaCl stress on recovering germination percentage and total germination percentage of Limonium aureum

圖4 埋藏深度對黃花磯松種子出苗率和出苗指數(shù)的影響Fig. 4 Effect of buried depth on seeding emergence percentage and seeding emergence index of Limonium aureum

3 討論

3.1 溫度和光照對黃花磯松種子萌發(fā)的影響

溫度是植物生長發(fā)育過程中一個(gè)至關(guān)重要的環(huán)境因子[22]。溫度過低或過高都不利于種子的萌發(fā)和生長，如溫度太低，酶活性過低不足以催化各種代謝反應(yīng)進(jìn)行，而溫度太高導(dǎo)致酶變性失活[23-24]。本研究表明，黃花磯松種子在5～45 ℃均能萌發(fā)，表明其具有較寬的萌發(fā)溫幅。這與李陽春和劉存琦[14]的研究結(jié)果一致，其研究發(fā)現(xiàn)黃花磯松種子在5～40 ℃均可萌發(fā)。此外，黃花磯松在10～40 ℃條件下萌發(fā)率均超過50%，說明其適宜在較大溫度范圍內(nèi)萌發(fā)建植。隨溫度升高萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)均表現(xiàn)為先升高后降低的趨勢，其最適溫度為恒溫25和30 ℃以及變溫20/30 ℃，這與王俊年和李得祿[15]的研究結(jié)果(15～20 ℃)有異議，兩個(gè)研究的種子均是采自甘肅省民勤縣沙生植物園，生境相同，但是王俊年和李得祿[15]的試驗(yàn)材料是當(dāng)年秋季采集，于10月進(jìn)行萌發(fā)試驗(yàn)，為新鮮種子；而本研究所用種子經(jīng)過半年時(shí)間貯藏?？赡茈S著貯藏時(shí)間的增加，種子會緩慢后熟，休眠釋放，進(jìn)而改變種子的萌發(fā)行為[25-26]。

光照和溫度一樣，亦是影響種子萌發(fā)和幼苗建成的重要環(huán)境因子。植物種子萌發(fā)究竟是否需要光照的存在，這不僅由植物自身遺傳物質(zhì)決定，還受到外部環(huán)境因子的影響[27]。本研究表明，光照對種子萌發(fā)的影響因溫度而異，如黃花磯松種子在溫度為35和40 ℃的高溫時(shí)，光照顯著促進(jìn)了其種子的萌發(fā)率，而在其余溫度條件下有無光照并不影響黃花磯松種子的萌發(fā)率。說明35和40 ℃的高溫會誘導(dǎo)黃花磯松種子形成次生休眠[4，7-8]，而光照可以作為一種信號分子抑制休眠[25，28]，因此，高溫條件下光照的存在會促進(jìn)種子萌發(fā)。

3.2 水分脅迫和NaCl脅迫對黃花磯松種子萌發(fā)的影響

植物種子對水分脅迫的響應(yīng)一定程度反映著其抗旱性強(qiáng)弱，而抗旱性強(qiáng)弱代表了植物在干旱環(huán)境中的生存能力[29]。隨著溶液滲透勢逐漸降低，黃花磯松種子的萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)也逐漸降低，這與劉萍等[30]對補(bǔ)血草(Limonium)種子的研究結(jié)果一致；黃花磯松種子在滲透勢為-1.5 MPa時(shí)種子萌發(fā)完全受到抑制，而耳葉補(bǔ)血草(L.otolepis)和簇枝補(bǔ)血草(L.chrysocomum)種子在滲透勢為-0.9 MPa時(shí)萌發(fā)完全受到抑制[30-31]，表明黃花磯松種子的抗旱性強(qiáng)于耳葉補(bǔ)血草和簇枝補(bǔ)血草。黃花磯松種子的抗旱半致死濃度和完全致死濃度分別為-0.64和-1.28 MPa，大于鹽節(jié)木(Halocnermumstrobilaceum)種子的抗旱半致死濃度(-0.75 MPa)和完全致死濃度(-1.46 MPa)[32]，說明鹽節(jié)木更抗旱，這可能與鹽節(jié)木是矮小半灌木這一特性有關(guān)。

鹽分對植物種子萌發(fā)的影響程度決定著該植物對鹽漬化土壤的適應(yīng)度，鹽溶液通過滲透脅迫阻礙種子吸水和(或)鹽離子效應(yīng)造成離子毒害進(jìn)而抑制種子萌發(fā)[18,33]。黃花磯松種子萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)均隨著NaCl脅迫的加重而逐漸下降，這和尤佳等[18-19]研究結(jié)果一致。當(dāng)NaCl濃度為0.521 mol·L-1(-2.4 MPa)時(shí)，黃花磯松萌發(fā)率為8%。而耳葉補(bǔ)血草和簇枝補(bǔ)血草種子在NaCl濃度為0.4 mol·L-1時(shí)萌發(fā)已完全受到抑制，說明黃花磯松的耐鹽性要強(qiáng)于另外兩種補(bǔ)血草[30-31]。此外，黃花磯松種子萌發(fā)期的耐鹽半致死濃度和完全致死濃度分別為0.201 mol·L-1(-0.84 MPa)和0.471 mol·L-1(-2.16 MPa)，小于鹽節(jié)木種子的耐鹽半致死濃度(0.47 mol·L-1)和完全致死濃度(0.83 mol·L-1)[32]，這表明鹽節(jié)木種子相比于黃花磯松種子而言更具耐鹽能力。但與同為補(bǔ)血草屬植物的二色補(bǔ)血草(L.bicolor)以及甜土植物水稻(Oryzasativa)、大豆(Glycinemax)相比，黃花磯松種子的耐鹽半致死濃度大于二色補(bǔ)血草、水稻和大豆的耐鹽半致死濃度[34-35]。

有研究表明，同一植物對等滲的水分脅迫和鹽脅迫的敏感程度不同[32]。本研究中，當(dāng)滲透勢低于-0.6 MPa時(shí)黃花磯松種子在鹽脅迫條件下的萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)基本都要高于等滲的水分脅迫條件，并且當(dāng)NaCl滲透勢為-2.4 MPa時(shí)仍然有8%的萌發(fā)率。說明鹽脅迫不利于黃花磯松種子萌發(fā)主要是由滲透脅迫造成的，而離子毒害作用較小甚至沒有。究其原因，可能是因?yàn)辄S花磯松為鹽生植物，少量Na+低濃度鹽可以促進(jìn)滲透調(diào)節(jié)、降低種子滲透勢、加速種子吸水和刺激呼吸酶產(chǎn)生作用，而PEG為大分子物質(zhì)，不易進(jìn)入種子內(nèi)部[18，36-37]。

隨水分脅迫和鹽脅迫的加重，黃花磯松種子的恢復(fù)萌發(fā)率逐漸升高，高脅迫條件下的總萌發(fā)率與對照無顯著差異。這表明高強(qiáng)度的干旱脅迫和鹽脅迫并沒有對黃花磯松種子造成不可逆的損害，沒有使種子永久性的喪失萌發(fā)能力，僅是暫時(shí)地抑制了種子吸水[29,38]，種子仍保持較高的萌發(fā)潛力。一旦脅迫解除進(jìn)行復(fù)水萌發(fā)，黃花磯松種子會恢復(fù)其萌發(fā)能力，達(dá)到較高的萌發(fā)率。這可能是黃花磯松種子能夠在鹽堿地以及干旱地區(qū)萌發(fā)的關(guān)鍵原因。此外，黃花磯松的總萌發(fā)率隨著兩種脅迫程度的加深呈先降低后升高的趨勢，在中等滲透勢條件下最低。可能是由于在中等滲透勢條件下誘導(dǎo)了黃花磯松種子形成生理休眠，萌發(fā)潛力降低，使得恢復(fù)萌發(fā)率較低，進(jìn)而總萌發(fā)率最低[39]。有研究表明，鹽生植物主要有耐鹽型和避鹽型兩種生存策略。耐鹽型植物在高鹽條件下主要表現(xiàn)為高萌發(fā)率和(或)高萌發(fā)速率，而避鹽型植物表現(xiàn)為高恢復(fù)萌發(fā)率[21]。黃花磯松在高鹽條件下有高恢復(fù)萌發(fā)率，表明黃花磯松為避鹽型植物?；謴?fù)研究表明，黃花磯松種子總萌發(fā)率都有所增加，這不僅體現(xiàn)了黃花磯松耐旱耐鹽這一大特性，也反映了黃花磯松長期生存于荒漠干旱環(huán)境中，種子萌發(fā)持續(xù)而分散、萌發(fā)速率低，是其在與干旱環(huán)境千百萬年的博弈中而演化出的萌發(fā)適應(yīng)對策[40-41]。這種策略提高了黃花磯松種子的利用率，同時(shí)由于其萌發(fā)時(shí)間的不一致性，降低了因外界環(huán)境巨變造成物種滅絕的風(fēng)險(xiǎn)。

3.3 埋深對黃花磯松種子萌發(fā)的影響

研究結(jié)果顯示，隨著埋藏深度的增加黃花磯松出苗率和出苗速率先升高后下降。黃花磯松種子最適埋藏深度為0.5 cm，這與高天鵬等[16]和馬全林等[17]研究結(jié)果一致。當(dāng)種子置于基質(zhì)表層時(shí)，出苗率比較低可能是由于表層水分蒸發(fā)過快，使得水分不能滿足種子出苗所需。當(dāng)埋藏深度達(dá)到3和4 cm時(shí)沒有種子出苗，可能是由于以下原因造成：1)隨著埋藏深度增加，頂土壓力增大，而黃花磯松種子較小，種子自身能量不足以讓其突破阻礙到達(dá)表面[11,42]；2)當(dāng)埋深到達(dá)一定程度時(shí)，土壤中含氧量滿足不了種子萌發(fā)的氧分壓，種子進(jìn)行無氧呼吸，呼吸產(chǎn)物對種子產(chǎn)生毒害作用，代謝氣體與周圍氣體環(huán)境之間的相互作用導(dǎo)致了種子休眠或死亡[42]，故黃花磯松種子適合淺播。

4 結(jié)論

綜上所述：1)黃花磯松種子的最適萌發(fā)范圍為25、30和20/30 ℃；2)當(dāng)溫度為35和40 ℃時(shí)光照的存在可以更好地促進(jìn)黃花磯松種子萌發(fā)，光照對黃花磯松種子萌發(fā)的影響依賴于溫度的變化；3)隨著PEG濃度增大黃花磯松種子萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)降低，在-1.5 MPa時(shí)無種子萌發(fā)；4)黃花磯松種子萌發(fā)率和萌發(fā)指數(shù)隨著NaCl脅迫的加重而逐漸下降，主要是由滲透脅迫造成，離子毒害作用甚微；5)黃花磯松種子適宜播種深度為0.5 cm。