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    Capn4和Ki-67在宮頸癌中的表達及意義

    2018-07-26 03:08:02李東豫
    中國實驗診斷學(xué) 2018年7期
    關(guān)鍵詞:蠟塊漿膜宮頸癌

    楊 帆,李東豫,袁 藝

    (河南省第二人民醫(yī)院 1.婦產(chǎn)科;2.病理科, 河南 新鄭451191)

    宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)最常見的惡性腫瘤,占據(jù)女性惡性腫瘤死亡率第二位,而腫瘤細胞的浸潤是其致死的主要因素,早診斷、早治療是提高宮頸癌遠期生存率的重要方法[1]。已有研究證實Capn4和Ki-67與結(jié)腸癌等惡性腫瘤的侵襲、發(fā)展密切相關(guān)[2]。本研究通過檢測Capn4和Ki-67在宮頸癌中的表達及其臨床意義,進一步探討宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移等過程的具體機制[3]。

    1 資料與方法

    1.1一般資料

    于2015年6月-2016年12月,選擇我院擇期行宮頸癌根治術(shù)患者的癌組織病理蠟塊70例作為實驗組,選取因子宮脫垂等其它良性病變行子宮切除術(shù)的正常宮頸組織病理蠟塊35例作為對照組,所有蠟塊均經(jīng)術(shù)后病理確診。納入標準:患者臨床資料完整;TNM分期Ⅰ-Ⅳ期;術(shù)前未接受過任何針對宮頸癌的治療。實驗組年齡在28-85歲之間,中位數(shù)是60歲;淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者40例,未轉(zhuǎn)移者30例;分化級別高分化31例,中分化28例,低分化11例;TNM分期Ⅰ期和Ⅱ期29例;Ⅲ期和Ⅳ期41例。TNM分期遵循國際婦產(chǎn)科協(xié)會(FIGO)及國際婦產(chǎn)腫瘤協(xié)會(IGCS)制定的最新《婦科惡性腫瘤分期及臨床實踐指南》。

    1.2方法

    實驗組所有病理蠟塊均采用免疫組織化學(xué)S-P法,蠟塊切片水化后,使用蒸餾水和PBS分別沖洗,甩掉多余的血清后分別滴加一抗:濃度為1∶300的兔抗人Capn4多克隆抗體(大連微生物庫存所)、濃度為1∶100的鼠抗人Ki-67單克隆抗體(大連市金宇生物技術(shù)有限公司,)孵育過夜,PBS沖洗后滴加二抗,蘇木素染色后顯微鏡下觀察。對照組使用PBS代替所有其他試劑。

    1.3觀察指標

    Capn4蛋白主要在細胞質(zhì)中表達,Ki-67蛋白主要在細胞核中表達。細胞質(zhì)陽性表達標準是:5個400倍視野中陽性細胞的數(shù)目所占百分率≤5%記0分,6%-25%記1分,26%-50%記2分,51%-75%記3分,>75%記4分;顯色強度中未著色者記0分,淡黃色記1分,深黃色記2分,深褐色記3分。數(shù)目+顯色記分≥3即為陽性。細胞核陽性表達標準是:5個高倍鏡視野陽性細胞占百分率≥10%。

    1.4統(tǒng)計學(xué)分析

    應(yīng)用 SPSS20.0 軟件進行數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析。計數(shù)資料采用卡方檢驗及秩和檢驗;數(shù)據(jù)間相關(guān)性采用Spearman分析,P<0.05即有統(tǒng)計學(xué)差異。

    2 結(jié)果

    2.12組患者Capn4和Ki-67的表達

    宮頸癌組織中Capn4和Ki-67的表達率分別是72.9%(51/70)、85.7%(60/70)顯著高于正常宮頸組織(P<0.05),見表1。

    表1 2組患者Capn4蛋白和Ki-67蛋白的表達

    注:*P<0.05與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義

    2.2宮頸癌組織中Capn4和Ki-67蛋白的表達水平與其臨床病理特點的相關(guān)性

    浸潤范圍方面,侵及漿膜層組宮頸癌組織中Capn4和Ki-67蛋白的表達陽性率分別為85.2%和96.3%,顯著高于未侵及漿膜層組(P<0.05);TNM分期方面,Ⅲ-Ⅳ期宮頸癌組織中Capn4和Ki-67蛋白的表達陽性率分別為95.1%和97.6%,顯著高于Ⅰ-Ⅱ期組(P<0.05);淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移方面,淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的宮頸癌組織中Capn4和Ki-67蛋白的表達陽性率分別為95.0%和90.7%,顯著高于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移組(P<0.05),而兩者的表達水平在患者的年齡及腫瘤分化程度分級中無明顯差異(P>0.05),見表2。

    表2 Capn4蛋白、Ki-67蛋白表達與宮頸癌臨床特點的相關(guān)性

    3 討論

    Capn4是Calpains家族中的一個小亞基,目前研究證實,Capn4在維持細胞的正常功能中起到重要作用[4],對細胞的凋亡起到促進和抑制的雙向作用,近幾年研究證實Capn4在肝癌、腎透明細胞癌、鼻咽癌、直腸癌等惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、浸潤、轉(zhuǎn)移等過程中發(fā)揮重要作用[5]。本研究經(jīng)免疫組化檢測結(jié)果提示宮頸癌組織中Capn4的表達率高達72.9%顯著高于正常宮頸組織(P<0.05),且其表達水平與宮頸癌的浸潤深度(侵及漿膜層者85.2%)、TNM分期(Ⅲ-Ⅳ期95.1%)、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者95.0%)密切相關(guān)。細胞核增殖指數(shù)(Ki-67)是細胞的分裂及增殖活性的標志物,其表達水平越高,提示細胞的分裂及增殖活性越高[6],目前已有研究證實Ki-67在胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌中表達明顯升高且其表達水平與惡性腫瘤的浸潤范圍、TNM分期及淋巴結(jié)是否轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。本研究中,宮頸癌組織中Ki-67的表達率高達85.7%顯著高于正常宮頸組織(P<0.05),且其表達水平與宮頸癌的浸潤深度(侵及漿膜層者96.3%)、TNM分期(Ⅲ-Ⅳ期97.6%)、有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者90.7%)密切相關(guān),驗證了以往研究的結(jié)果,也進一步證明了Ki-67在預(yù)測宮頸癌中的重要價值。

    綜上所述,宮頸癌組織中Capn4和Ki-67的陽性表達率較正常宮頸組織顯著升高且與宮頸癌組織的浸潤范圍、TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān),分期越晚、浸潤范圍越廣、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性者其表達水平越高,提示兩者可能成為預(yù)測宮頸癌的敏感指標且能起到評估宮頸癌惡性程度的作用,為宮頸癌的早期診斷及治療提供了新的臨床思路。

    作者簡介:楊帆(1982-),女,河南新鄭人,本科學(xué)歷,河南省第二人民醫(yī)院婦產(chǎn)科主治醫(yī)師。

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