不同預(yù)處理對(duì)茶樹(shù)葉厭氧發(fā)酵產(chǎn)氣的影響

孫和臨， 李建昌， 邵瓊麗

(云南師范大學(xué)， 云南 昆明 650500)

我國(guó)茶園種植面積為138萬(wàn)公頃，茶年產(chǎn)量突破百萬(wàn)噸，排名世界第一[1]。茶樹(shù)生長(zhǎng)過(guò)程中形成大量落葉，并且需要修剪枝葉。在茶園生態(tài)系統(tǒng)中，修剪枝葉和凋落葉一起，形成了一個(gè)凋落層，它們?cè)谕寥辣韺永鄯e、分解，對(duì)茶園土壤環(huán)境產(chǎn)生著深刻的影響。對(duì)于剩余茶樹(shù)枝葉的處理，目前大部分仍然是直接粉碎還田，不但生物轉(zhuǎn)化率低，還會(huì)對(duì)造成土壤酸化[2]。將茶樹(shù)葉通過(guò)厭氧發(fā)酵技術(shù)轉(zhuǎn)化為沼氣，以可豐富沼氣原料來(lái)源，減緩?fù)寥牢廴?。茶?shù)葉作為沼氣原料，由于含有較高的半纖維素、纖維素高度結(jié)晶物質(zhì)和木質(zhì)素對(duì)纖維素包埋作用，這些物質(zhì)難易降解使得厭氧微生物無(wú)法快速對(duì)其進(jìn)行分解和利用[3]，導(dǎo)致發(fā)酵過(guò)程中出現(xiàn)運(yùn)行緩慢、底物降解率低、產(chǎn)氣量小的問(wèn)題。因此，在發(fā)酵前對(duì)茶葉進(jìn)行有效預(yù)處理十分必要。

采用物理、化學(xué)、生物[4-6]預(yù)處理方法改變?cè)衔锢砘瘜W(xué)結(jié)構(gòu)，使復(fù)雜底物轉(zhuǎn)化為簡(jiǎn)單物質(zhì)可提高厭氧發(fā)酵速率與產(chǎn)氣量。物理預(yù)處理主要是通過(guò)機(jī)械、高溫等方法改變?cè)牧系耐庥^形態(tài)或內(nèi)部物質(zhì)結(jié)構(gòu)，研究[7]表明以稻草為原料，通過(guò)切碎與研磨方法預(yù)處理都可以提高稻草的產(chǎn)氣潛能，但研磨比相比于切碎預(yù)處理方法可以提高產(chǎn)氣量12.5%；陳金發(fā)[8]等通過(guò)干燥、粉碎、堆漚方法處理紫荊澤蘭可以降低原料中毒素對(duì)沼氣發(fā)酵影響并提高產(chǎn)氣總量。化學(xué)預(yù)處理是通過(guò)化學(xué)藥品作用于底物原材料，破壞原材料中纖維素與木質(zhì)素形成的共價(jià)鍵從而達(dá)到提產(chǎn)甲烷菌對(duì)纖維素類物質(zhì)利用。如杜婷婷[9]等研究不同功能復(fù)合添加劑對(duì)牛糞厭氧發(fā)酵的影響，得到結(jié)果通過(guò)添加復(fù)合添加劑可提高牛糞產(chǎn)氣率并且功能添加劑不同組分對(duì)厭氧發(fā)酵有明顯促進(jìn)。生物預(yù)處理是將發(fā)酵原材料通過(guò)細(xì)菌、真菌等微生物預(yù)先降解處理，可促進(jìn)原料中木質(zhì)素和纖維素的降解。趙靜[10]等探究NaOH和H2SO4與纖維素酶預(yù)處理方法對(duì)水稻秸稈厭氧消化產(chǎn)氣影響，發(fā)現(xiàn)纖維素酶預(yù)處理效果優(yōu)于其他實(shí)驗(yàn)組。因此，利用纖維類含量較高原料進(jìn)行發(fā)酵，需要對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理降解。

目前對(duì)于茶樹(shù)葉沼氣發(fā)酵研究鮮有報(bào)道，本文在茶樹(shù)葉機(jī)械粉碎的基礎(chǔ)上，對(duì)茶樹(shù)葉分別進(jìn)行了高溫預(yù)處理、堿預(yù)處理及纖維素酶處理，并設(shè)置了空白對(duì)照組，比較處理后茶樹(shù)葉的發(fā)酵情況及沼氣產(chǎn)量，并把Modified Gompertz[11]模型引入到茶樹(shù)葉發(fā)酵中。李建昌[12]等將Modified Gompertz應(yīng)用于城市生活垃圾沼氣發(fā)酵，得出城市生活垃圾沼氣發(fā)酵的累計(jì)產(chǎn)氣量隨時(shí)間變化與Modified Gompertz模型具有較好的相關(guān)性?；诖耍煌A(yù)處理必然會(huì)導(dǎo)致茶樹(shù)葉厭氧發(fā)酵累積產(chǎn)氣量變化，進(jìn)而使Modified Gompertz模型參數(shù)改變，借此可以對(duì)試驗(yàn)數(shù)據(jù)深入分析，評(píng)價(jià)發(fā)酵參數(shù)對(duì)底物產(chǎn)甲烷特性的影響，得出合理判斷與結(jié)論，以期對(duì)茶樹(shù)葉廢棄物的資源化利用提供了參考。

1 材料和方法1.1 試驗(yàn)材料與接種物

茶樹(shù)葉采集于昆明高香萬(wàn)畝茶園，自然風(fēng)干并粉碎，過(guò)1 mm篩備用，并測(cè)定其理化指標(biāo)，物料特性見(jiàn)表1；接種物取自云南師范大學(xué)太陽(yáng)能研究所生物質(zhì)能研究室豬糞為原料發(fā)酵結(jié)束后殘余物。物料特性見(jiàn)表1。纖維素酶為中溫酶(上海埃博商貿(mào)有限公司)；氫氧化鈉(分析純)。

表1 茶樹(shù)葉與接種物的物料特性 (%)

1.2 試驗(yàn)裝置

試驗(yàn)裝置主要由溫控儀(WMZK-01型，控制范圍10℃～100℃)，傳感器、電熱管(500W)、恒溫水箱，500 mL廣口消化瓶，1500 mL計(jì)量瓶和1000 mL的錐形瓶等部分組成(見(jiàn)圖1)。計(jì)量瓶用于收集從錐形瓶中被排出的水，以計(jì)算產(chǎn)氣量，消化瓶與集氣瓶瓶口用膠塞塞緊，各部分用硅膠管連接，所有接口處均用密封膠密封。

1.溫控儀; 2.交流接觸器； 3.水槽; 4.電熱管； 5.熱電偶; 6.循水泵; 7.發(fā)酵瓶; 8.取樣口; 9.玻璃三通; 10.集氣瓶; 11.計(jì)量瓶圖1 試驗(yàn)裝置

1.3 試驗(yàn)方法

試驗(yàn)過(guò)程分為預(yù)試驗(yàn)階段和正式厭氧發(fā)酵階段，兩階段在同一裝置中進(jìn)行，試驗(yàn)過(guò)程采用中溫發(fā)酵(35℃±1℃)。預(yù)試驗(yàn)設(shè)3個(gè)質(zhì)量百分?jǐn)?shù)處理水平：堿處理方法分別在茶樹(shù)葉干物質(zhì)中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%，4%，6%的NaOH；酶處理法是分別在茶樹(shù)葉干物質(zhì)中加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%，0.5%，1%的纖維素酶；高溫處理組將經(jīng)粉碎的茶樹(shù)葉置于l00℃，110℃，120℃高壓滅菌鍋中處理；同時(shí)設(shè)置一個(gè)對(duì)照組(無(wú)預(yù)處理措施)。正式試驗(yàn)產(chǎn)沼氣階段是在上述預(yù)試驗(yàn)結(jié)果的基礎(chǔ)上，選取每種預(yù)處理方法中效果最優(yōu)的一組，再次重復(fù)預(yù)試驗(yàn)的步驟，進(jìn)行厭氧發(fā)酵產(chǎn)沼氣試驗(yàn)。

1.3.1 原料預(yù)處理

(1)高溫預(yù)處理：將粉碎的茶樹(shù)葉分別置于100℃，110℃，120℃高壓滅菌鍋中處理3 h。

(2)纖維素酶處理：向粉碎的茶樹(shù)葉分別加入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%，0.5%，1%的纖維素酶，混合均勻。纖維素酶預(yù)處理溫度保持在35℃～40℃。

(3)NaOH處理：將經(jīng)粉碎的茶樹(shù)葉用蒸餾水把預(yù)處理體系含水率調(diào)為80%，以占茶葉干物質(zhì)質(zhì)量分?jǐn)?shù)2%，4%，6%的NaOH分別處理15 d。

1.3.2 裝瓶發(fā)酵

裝料系數(shù)為發(fā)酵罐的80%，即500 mL×80%=400 mL；發(fā)酵液總固體含量7%；接種物的接種量(接種物干物質(zhì)質(zhì)量占發(fā)酵原料干物質(zhì)質(zhì)量的百分比)為25%；發(fā)酵液pH值用緩沖溶液調(diào)節(jié)至7.2±0.2，以未經(jīng)預(yù)處理的茶葉為對(duì)照，在水浴加熱下發(fā)酵，平均溫度為35℃±1℃。每天定時(shí)測(cè)量產(chǎn)氣量，待產(chǎn)氣穩(wěn)定后測(cè)定各處理氣體中的甲烷體積分?jǐn)?shù)。

緩沖溶液：KH2PO4(6.1 g·L-1)，K2HPO4(9.6 g·L-1)，KCl(2.22 g·L-1)，NH4Cl(0.28 g·L-1)，MgSO4·7H2O(100 mg·L-1)，CaCl2·H2O(10 mg·L-1)。

1.3.3 指標(biāo)數(shù)據(jù)處理

Gompertz模型是三參數(shù)方程，對(duì)應(yīng)曲線特點(diǎn)是增長(zhǎng)率>0(見(jiàn)圖2)，其函數(shù)表態(tài)與參數(shù)密切相關(guān)[13]。

Gompertz模型如方程(1)：

y(t)=a×exp-expb-ct

(1)

在Gompertz模型中，參數(shù)a，b，c通常不具有生物學(xué)意義，因此，對(duì)Gompertz模型變換，并付予Modified Gompertz模型參數(shù)特殊的生物學(xué)意義。獲得Modified Compertz模型如方程(2)：

(2)

式中：y(t)為時(shí)間t時(shí)的累積產(chǎn)氣量(accumulative biogas yield)，mL，當(dāng)t→∞時(shí)，y(t)→a，有Hm=a為最大累積產(chǎn)氣量(mL)；Rm=a·c/e為最大產(chǎn)氣速率，mL·d-1；λ=(b-1)/c，λ為發(fā)酵滯留時(shí)間，d；e為exp(1)=2.71828。實(shí)際數(shù)據(jù)處理過(guò)程中，利用origin軟件對(duì)參數(shù)a,b,c進(jìn)行擬合，然后轉(zhuǎn)換為Hm,Rm,λ的值，進(jìn)而計(jì)算原料的TS產(chǎn)氣率(mL·g-1),VS產(chǎn)氣率(mL·g-1)，以及產(chǎn)氣90%時(shí)的發(fā)酵周期(沼氣發(fā)酵能源回收突出顯示在發(fā)酵時(shí)間的90%)。形成了以擬合茶樹(shù)葉發(fā)酵的累積產(chǎn)氣量的方法，從而獲得了最大累積產(chǎn)氣量、最大比產(chǎn)氣速率和滯留時(shí)間3個(gè)動(dòng)力學(xué)參數(shù)，借此評(píng)價(jià)不同預(yù)處理對(duì)茶樹(shù)葉產(chǎn)氣特性的影響。

圖2 Modified Gompertz模型形態(tài)

1.3.4 測(cè)定項(xiàng)目與分析方法

含水量、總固體(TS)、揮發(fā)性固體(VS)：沼氣常規(guī)分析法[14]；灰分：依據(jù)TS和VS測(cè)定值計(jì)算；產(chǎn)氣量：排水法測(cè)定；pH值：PHS-3C型pH計(jì)測(cè)定；CH4體積分?jǐn)?shù)：福立GC9790Ⅱ型氣相色譜儀。

試驗(yàn)結(jié)束后，綜合數(shù)據(jù)進(jìn)行指標(biāo)分析，計(jì)算出最大累積產(chǎn)氣量(Hm，mL)；最大產(chǎn)氣速率(Rm，mL)；水力滯留時(shí)間(λ，d)的值；90%產(chǎn)氣周期(T90%，d)；原料TS和VS產(chǎn)氣率。

2 結(jié)果與分析

根據(jù)預(yù)試驗(yàn)各處理組的日產(chǎn)氣量、甲烷含量以及預(yù)處理藥品用量，選擇空白處理、處理效果最優(yōu)的1%纖維素酶預(yù)處理,4%NaOH預(yù)處理，120℃高溫預(yù)處理進(jìn)行日產(chǎn)氣量變化，CH4含量變化，Modified Gompertz模型擬合的對(duì)比分析相關(guān)討論。

2.1 不同預(yù)處理對(duì)茶樹(shù)葉厭氧發(fā)酵產(chǎn)氣的影響

圖3所示各處理日產(chǎn)氣量。經(jīng)處理后的茶樹(shù)葉可以較快啟動(dòng)發(fā)酵并且有不同程度產(chǎn)氣高峰期，而對(duì)照組沒(méi)有明顯的產(chǎn)氣高峰。預(yù)處理試驗(yàn)組均在第2天開(kāi)始產(chǎn)氣，其中，1%纖維素酶處理后試驗(yàn)組啟動(dòng)最快，迅速產(chǎn)氣，并且在第2天就達(dá)到產(chǎn)氣高峰，產(chǎn)氣量為230 mL，隨后產(chǎn)氣下降，在第5天達(dá)到谷底，產(chǎn)氣量為40 mL，之后的產(chǎn)氣峰上升，在第9天達(dá)到第2個(gè)產(chǎn)氣高峰，日產(chǎn)氣量190 mL；從各預(yù)處理方法來(lái)看，4%NaOH預(yù)處理的效果最佳，啟動(dòng)第3天達(dá)到產(chǎn)氣高峰，產(chǎn)氣量為170 mL，隨后進(jìn)入波谷期，后又上升至高峰期，在17天達(dá)到最大產(chǎn)氣量，為210 mL，產(chǎn)氣速率與累積產(chǎn)氣量均要明顯高于其他處理。高溫預(yù)處理組與對(duì)照組較類似，始終保持一個(gè)較低的產(chǎn)氣率，總體來(lái)說(shuō)，4%NaOH預(yù)處理組累積產(chǎn)氣量最高。纖維素預(yù)處理組產(chǎn)氣28 d，產(chǎn)氣總量次于NaOH預(yù)處理組。高溫預(yù)處理組與對(duì)照組產(chǎn)氣效果明顯不及纖維素酶與堿預(yù)處理，產(chǎn)氣時(shí)間短(高溫處理26 d，對(duì)照21 d)并且產(chǎn)氣速率與累積產(chǎn)氣量均要低很多。

圖3 各處理日產(chǎn)氣量隨發(fā)酵時(shí)間的變化

2.2 不同預(yù)處理對(duì)茶樹(shù)葉厭氧發(fā)酵產(chǎn)甲烷的影響

由圖4可看出，纖維素酶與NaOH預(yù)處理組的甲烷體積百分?jǐn)?shù)從發(fā)酵開(kāi)始階段就開(kāi)始很快增加。纖維素酶預(yù)處理組發(fā)酵過(guò)程中甲烷含量上升速度最快，在第7天就達(dá)到30%以上，隨發(fā)酵進(jìn)行，甲烷含量繼續(xù)增加，最高含量可達(dá)65.4%。4%NaOH預(yù)處理組甲烷含量高峰稍有滯后，在第13 天甲烷含量達(dá)到30%以上，在此基礎(chǔ)上繼續(xù)增加，最高含量達(dá)到67.5%。高溫預(yù)處理組甲烷上升速度較為緩慢，并且甲烷含量最高僅有38.1%。對(duì)照組整體甲烷含量較低，始終持續(xù)在10%～20%之間。綜上可見(jiàn)，纖維素酶與NaOH預(yù)處理組均可穩(wěn)定和大幅度提高厭氧發(fā)酵過(guò)程中甲烷含量，主要由于大分子的纖維素、半纖維素類物質(zhì)被預(yù)先降解，可供產(chǎn)甲烷菌所利用。接種物中的產(chǎn)酸菌和產(chǎn)甲烷菌能很容易的利用底物來(lái)生長(zhǎng)繁殖，產(chǎn)生大量的氣體。隨著反應(yīng)的進(jìn)行，這些容易降解組分被產(chǎn)甲烷菌大量的消耗而減少，產(chǎn)酸菌和產(chǎn)甲烷菌的生長(zhǎng)代謝減慢，產(chǎn)氣量與甲烷下降，直到最后產(chǎn)氣停止。

圖4 各處理厭氧消化過(guò)程中CH4含量的變化

2.3 不同預(yù)處理原料Modified Gompertz模型擬合的對(duì)比分析

根據(jù)圖3試驗(yàn)數(shù)據(jù)計(jì)算出各預(yù)處理實(shí)際累積產(chǎn)氣量(見(jiàn)圖5)并聯(lián)合Modified Gompertz模型擬合處理后得出結(jié)果如圖6與表2。

試驗(yàn)過(guò)程中，發(fā)酵罐內(nèi)日產(chǎn)氣量的變化趨勢(shì)反映了產(chǎn)氣情況的好壞與微生物生長(zhǎng)及利用底物情況息息相關(guān)。Modified Gompertz模型對(duì)不同試驗(yàn)組日產(chǎn)氣量的數(shù)據(jù)進(jìn)行擬合得到最大累積產(chǎn)氣量(Hm)與圖5中實(shí)際累積產(chǎn)氣量相比，實(shí)際累積產(chǎn)氣量略低于Hm，相對(duì)偏差分別為0.31%，0.93%，1.45%，1.24%，因此模型擬合效果較好。如圖6所示，各組預(yù)處理試驗(yàn)剛開(kāi)始啟動(dòng)階段，產(chǎn)氣速率上升較快，隨后產(chǎn)氣達(dá)到最高產(chǎn)氣速率階段，后期產(chǎn)氣速率趨于平緩，累計(jì)產(chǎn)氣量達(dá)到最大固定值。其中1%纖維素酶與4%NaOH預(yù)處理組初始產(chǎn)氣速率上升較快，并且4%NaOH預(yù)處理組累積產(chǎn)氣量達(dá)到最高值。因此選擇4%NaOH預(yù)處理茶樹(shù)葉厭氧發(fā)酵產(chǎn)氣效果最好。

圖5 各試驗(yàn)條件下實(shí)際實(shí)驗(yàn)累計(jì)產(chǎn)氣量

圖6 各試驗(yàn)組對(duì)應(yīng)的累積產(chǎn)氣量擬合曲線

表2為日產(chǎn)氣量數(shù)據(jù)擬合后獲得不同預(yù)處理試驗(yàn)組的動(dòng)力學(xué)參數(shù)及相關(guān)系數(shù)，得到各底物最大累積產(chǎn)氣量、最大日產(chǎn)氣量、滯留時(shí)間。由表2可以看出，所得到擬合曲線相關(guān)系數(shù)都在0.98以上，具有良好的相關(guān)性，進(jìn)而獲得相關(guān)參數(shù)指標(biāo)。根據(jù)累計(jì)產(chǎn)氣量計(jì)算得到各預(yù)處理的TS產(chǎn)氣率和VS產(chǎn)氣率測(cè)定與計(jì)算結(jié)果，其中TS產(chǎn)氣率即單位原料干物質(zhì)產(chǎn)氣量，主要反映原料的產(chǎn)氣潛力；VS產(chǎn)氣率即單位原料揮發(fā)性有機(jī)物產(chǎn)氣量，主要反映原料有機(jī)質(zhì)的轉(zhuǎn)化潛力[15]。

表2 各預(yù)處理的茶樹(shù)葉發(fā)酵Gompertz動(dòng)力學(xué)參數(shù)比較

各種預(yù)處理方法不同程度的破壞茶樹(shù)葉纖維素結(jié)構(gòu)，有助于產(chǎn)甲烷菌對(duì)發(fā)酵底物的利用和酶解的進(jìn)行，提高茶樹(shù)葉的厭氧發(fā)酵轉(zhuǎn)化率。從表2可以看出，未經(jīng)處理的茶樹(shù)葉累積產(chǎn)氣量最少，僅為805 mL，最大產(chǎn)氣速率為62.1 mL·d-1，滯留時(shí)間長(zhǎng)達(dá)2.35 d，表明該條件下發(fā)酵啟動(dòng)時(shí)間為2.35 d，TS產(chǎn)氣率和VS產(chǎn)氣率僅分別為30.84 mL·g-1，32.86 mL·g-1，但經(jīng)過(guò)各種預(yù)處理后，各產(chǎn)氣指標(biāo)有了大幅度提升。其中4%NaOH預(yù)處理效果最好，處理后茶樹(shù)葉的累積產(chǎn)氣量達(dá)到2860 mL，最大產(chǎn)氣速率127.9 mL·d-1，TS產(chǎn)氣率，VS產(chǎn)氣率分別為109.58 mL·g-1，116.73 mL·g-1，并且滯留時(shí)間為0.08 d，NaOH預(yù)處理后茶樹(shù)葉沼氣發(fā)酵啟動(dòng)時(shí)間大幅縮短。發(fā)酵周期隨預(yù)處理效果增加而增加，NaOH預(yù)處理90%發(fā)酵周期最長(zhǎng)為28.9 d，表明發(fā)酵期集中在前29 d，這可能由于處理后可供產(chǎn)甲烷菌利用物質(zhì)含量增多隨之代謝時(shí)間延長(zhǎng)。纖維素酶處理組效果僅次于NaOH處理組，累積產(chǎn)氣量2598 mL。茶樹(shù)葉經(jīng)過(guò)纖維素酶預(yù)處理后破壞了包覆在纖維素分子表面的半纖維素和木質(zhì)素分子，使纖維素、半纖維素與木質(zhì)素分離，并且發(fā)生部分分解，改善了茶樹(shù)葉的厭氧消化性質(zhì)，為厭氧菌提供了易消化的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[16]，這是導(dǎo)致纖維素預(yù)處理試驗(yàn)組滯留時(shí)間最短(0.06 d)的主要原因。高溫預(yù)處理組各產(chǎn)氣特性提高不顯著，發(fā)酵累積產(chǎn)氣量1472 mL，TS和VS產(chǎn)氣率分別為56.40 mL·g-1，60.08 mL·g-1，滯留時(shí)間相比纖維素酶與NaOH預(yù)處理較長(zhǎng)，90%發(fā)酵周期僅比對(duì)照組延長(zhǎng)3.4 d，并且高溫預(yù)處理方式需要額外的能量消耗，勢(shì)必增加預(yù)處理成本。

綜上，筆者認(rèn)為本試驗(yàn)所采用的幾種預(yù)處理方法中，1%纖維素酶，120℃高溫處理，4%NaOH累積產(chǎn)氣量分別達(dá)到2598 mL，1472 mL，2860 mL，較對(duì)照組分別提高232.7%，82.9%，255.3%，處理效果：4%NaOH>1%纖維素酶>120℃高溫處理>對(duì)照。

3 結(jié)論

(1)相比于對(duì)照組，纖維素酶處理、高溫處理、NaOH處理均能有效縮短茶樹(shù)葉發(fā)酵啟動(dòng)時(shí)間，并能不同程度提高茶樹(shù)葉發(fā)酵產(chǎn)氣的能力。

(2)不同預(yù)處理產(chǎn)氣氣體成分分析表明1%纖維素酶與4%NaOH預(yù)處理后的茶樹(shù)葉發(fā)酵產(chǎn)氣甲烷量顯著提升，甲烷含量最高分別可達(dá)65.4%和67.5%。

(3)Modified Gompertz模型分析不同預(yù)處理?xiàng)l件對(duì)茶樹(shù)葉厭氧發(fā)酵產(chǎn)氣影響，具有較好的相關(guān)性，根據(jù)Modified Gompertz模型獲得相關(guān)參數(shù)指標(biāo)，可以對(duì)不同預(yù)處理茶樹(shù)葉厭氧發(fā)酵效果做出合理評(píng)價(jià)。就累積產(chǎn)氣影響、原料轉(zhuǎn)化效率而言，不同預(yù)處理方法的對(duì)比處理效果為4%NaOH>1%纖維素酶>120℃高溫處理>對(duì)照。其中NaOH預(yù)處理最適合茶樹(shù)葉沼氣發(fā)酵，采取4%NaOH對(duì)含水率為80%的茶樹(shù)葉處理15 d后，以7%的總固體濃度在35℃發(fā)酵累積產(chǎn)氣2860 mL，與對(duì)照組相比，提高了255.3%，主要產(chǎn)氣階段集中在前29 d，此時(shí)TS和VS產(chǎn)氣率分別為109.58 mL·g-1，116.73 mL·g-1。

(4)由于該試驗(yàn)只進(jìn)行了固定預(yù)處理時(shí)間，無(wú)法確定不同時(shí)長(zhǎng)與種類的堿處理對(duì)茶樹(shù)葉厭氧發(fā)酵影響，后續(xù)研究可對(duì)堿處理的條件，如堿的種類與處理時(shí)間等因素進(jìn)行進(jìn)一步的優(yōu)化。