HLA-B27、血沉、CRP診斷強(qiáng)直性脊柱炎的臨床意義

秦曼妮，梁逸仙

（廣東省東莞市第三人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，東莞 523326）

強(qiáng)直性脊柱炎是由于脊柱附著點(diǎn)和骶髂關(guān)節(jié)的炎癥引起的一種疾病，它是一種以關(guān)節(jié)和骨化強(qiáng)直病變?yōu)樘攸c(diǎn)的慢性炎癥性疾病。強(qiáng)制性脊柱炎早期發(fā)病非常緩慢，許多患者無(wú)法察覺(jué)，到了后期，病情發(fā)展速度加快，短時(shí)間內(nèi)就會(huì)造成駝背畸形、膝關(guān)節(jié)以及髖關(guān)節(jié)等產(chǎn)生強(qiáng)直，所以，強(qiáng)制性脊柱炎的早期診斷非常重要[1]。強(qiáng)制性脊柱炎屬于風(fēng)濕病的范疇，但是發(fā)病機(jī)制上尚未明確，臨床上認(rèn)為，血沉、C反應(yīng)蛋白（CRP）以及人類(lèi)白細(xì)胞抗原B27（HLA-B27）對(duì)強(qiáng)制性脊柱炎的產(chǎn)生有很大的影響作用。研究表明，血沉、CRP的水平變化可以作為強(qiáng)制性脊柱炎病情變化的反應(yīng)指標(biāo)，有效降低強(qiáng)制性脊柱炎患者的炎性情況，緩解患者的病情，HLA-B27的陽(yáng)性率變化并不能作為強(qiáng)制性脊柱炎的診斷指標(biāo)，但是可以增加強(qiáng)制性脊柱炎診斷的可能性[2]。為探究血沉、CRP以及HLA-B27對(duì)強(qiáng)制性脊柱炎診斷的作用，本文對(duì)HLA-B27、血沉、CRP診斷強(qiáng)制性脊柱炎的臨床意義進(jìn)行研究。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年11月-2017年3月在廣東省東莞市第三人民醫(yī)院診斷為強(qiáng)制性脊柱炎的患者60例為研究對(duì)象并作為觀察組，選取我院同期健康體檢者60例作為對(duì)照組。其中觀察組男32例，女28例；年齡20歲-64歲，平均（39.6±4.8）歲，病程3年-6年，平均（4.6±0.6）年。強(qiáng)制性脊柱炎組男31例，女29例；年齡18歲-66歲，平均（37.9±4.2）歲；病程2年-7年，平均（4.4±0.8）年。兩組患者一般資料比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可比性?；颊邔?duì)本研究知情同意并簽署知情同意書(shū)，本研究經(jīng)我院倫理委員會(huì)批準(zhǔn)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①患者晨僵、腰痛的癥狀超過(guò)3個(gè)月，并且通過(guò)休息并無(wú)緩解；②患者的胸廓活動(dòng)范圍比同年齡的健康人小（健康人的擴(kuò)胸運(yùn)動(dòng)≥180°，患有強(qiáng)直性脊柱炎的擴(kuò)胸運(yùn)動(dòng)＜160°）；③患者在前屈、后屈以及側(cè)屈方向上具有活動(dòng)受阻的癥狀[3]，例如：行走、向前屈身、彎腰等。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有腫瘤疾病者；②患有風(fēng)濕性免疫系統(tǒng)疾病者；③患有甲狀旁腺功能亢進(jìn)者[4]。

1.2 方法 清晨抽取強(qiáng)制性脊柱炎組患者和對(duì)照組體檢者空腹肘部靜脈血2 mL，并將采取的靜脈血置入真空管和血常規(guī)抗凝管內(nèi)。

1.2.1 血沉的檢測(cè) 以3,000 r/min的速度對(duì)采集的靜脈血進(jìn)行10 min的離心分離，分離完成后，將血清吸去，用Westergren法檢測(cè)上清液（正常范圍為女性0-22 mm/ h，男性0-15 mm/h）。

1.2.2 HLA-B27的檢測(cè) 6 h內(nèi)對(duì)患者實(shí)施行熒光抗體染色，將15 μg的熒光抗體與25 μg的抗凝全血進(jìn)行徹底混合，并置于暗處室溫進(jìn)行30 min的孵育，隨后加入2 mL的溶血素迅速混合均勻，再在暗處進(jìn)行10 min的孵育，接著以速度2,000 r/min進(jìn)行離心分離5 min，將血清吸去，并加入2 mL、pH 7.8的磷酸鹽酸進(jìn)行洗滌，HLA-B27直標(biāo)單克隆抗體以及溶血素由美國(guó)Becton-Dickinson（BD）公司提供，所采用的儀器為BD公司的FCSCalibur流式細(xì)胞儀。

1.2.3 CRP的檢測(cè) 各抽取強(qiáng)直性脊柱炎組患者和對(duì)照組體檢者空腹肘部靜脈血2 mL置入真空管內(nèi)，進(jìn)行分離后，取上清液，并用免疫濁度分析法進(jìn)行檢測(cè)（＜10 mg/L為正常），所采用的儀器為美國(guó)Beck-man-Coulter公司的Immage 800雙光徑免疫濁度分析儀，所有試劑均由美國(guó)貝克曼公司提供。

1.3 觀察標(biāo)準(zhǔn)及療效判定 比較兩組血沉、CPR水平、HLA-B27陽(yáng)性率、心電圖異常率及X線改變率。

強(qiáng)制性脊柱炎患者的療效診斷標(biāo)準(zhǔn)：疾病活動(dòng)情況運(yùn)用Cowling法進(jìn)行檢測(cè)。疾病活動(dòng)情況分為3個(gè)水平，包括活動(dòng)、可疑活動(dòng)、靜止。活動(dòng)的標(biāo)準(zhǔn)：前4周患者晨僵、腰疼以及關(guān)節(jié)痛的情況加重，需要增加抗炎藥的用量；可疑活動(dòng)的標(biāo)準(zhǔn)：患者出現(xiàn)持續(xù)晨僵、腰痛的現(xiàn)象，需要堅(jiān)持服用抗炎藥；靜止的標(biāo)準(zhǔn)：患者沒(méi)有或出現(xiàn)很少的癥狀，不需要服用或者需要服用少量的抗炎藥[5]。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 18.0對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（Mean±SD）表示，采用t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料采用率（%）表示，采用卡方檢驗(yàn)。采用直線回歸模型對(duì)強(qiáng)制性脊柱炎進(jìn)行單因素分析，采用多因素Logistic回歸模型進(jìn)行多因素分析。以以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 強(qiáng)制性脊柱炎單因素分析 Cowling檢測(cè)中，強(qiáng)制性脊柱炎組活動(dòng)、可疑發(fā)生率高于對(duì)照組，靜止發(fā)生率低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。強(qiáng)制性脊柱炎組血沉、CRP水平、HLA-B27的陽(yáng)性率、心電圖異常率及X線改變率均高于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見(jiàn)表1。

2.2 強(qiáng)制性脊柱炎與各項(xiàng)指標(biāo)多因素分析情況以及ROC曲線的檢測(cè)結(jié)果 從多因素分析強(qiáng)制性脊柱炎與各項(xiàng)指標(biāo)的情況來(lái)看，血沉和CRP水平對(duì)強(qiáng)制性脊柱炎的發(fā)生密切相關(guān)，從敏感性和特異性分析看，雖然HLA-B27的敏感度和特異性均較高，但是HLA-B27的陽(yáng)性率指標(biāo)并不能成為強(qiáng)制性脊柱炎疾病的診斷標(biāo)準(zhǔn)，由此得出，血沉和CRP可以作為強(qiáng)制性脊柱炎的診斷指標(biāo)。見(jiàn)表2、3。

3 討論

強(qiáng)直性脊柱炎在初期時(shí)發(fā)生于16歲-25歲的青年，尤其是男性青年較多，強(qiáng)直性脊柱炎的起病原因一般比較隱匿，不容易被發(fā)現(xiàn)，初期時(shí)一般沒(méi)有任何臨床表現(xiàn)，部分患者會(huì)出現(xiàn)乏力、厭食或者低熱、貧血等輕微癥狀[6]。由于強(qiáng)直性脊柱炎在早期的病情較輕，大多數(shù)患者很難做到及時(shí)發(fā)現(xiàn)并進(jìn)行治療，故導(dǎo)致病情逐漸加重，使其失去了最佳的治療時(shí)間。強(qiáng)制性脊柱炎中期時(shí)大多數(shù)患者的關(guān)節(jié)會(huì)發(fā)生病變[7]，首先發(fā)生病變的關(guān)節(jié)一般是骶髂，以后慢慢發(fā)展到頸椎，并且會(huì)出現(xiàn)持續(xù)的腰痛和僵硬感，出現(xiàn)的關(guān)節(jié)病變一般有骶髂關(guān)節(jié)炎、腰椎病變、胸椎病變以及頸椎病變和周?chē)P(guān)節(jié)病變[7]，同時(shí)，也會(huì)誘發(fā)一些關(guān)節(jié)外病變現(xiàn)象，如心臟病變、神經(jīng)系統(tǒng)病變以及腎和前列腺病變、耳部、肺部病變等[8]。臨床上對(duì)于強(qiáng)制性脊柱炎的檢查一般采用電子計(jì)算機(jī)斷層掃描、磁共振和單光子發(fā)射計(jì)算機(jī)斷層掃描以及實(shí)驗(yàn)室檢查和X線檢查等方法，通過(guò)診斷和檢查一般會(huì)有腰骶關(guān)節(jié)勞損、結(jié)核性脊椎炎、腸病性關(guān)節(jié)炎以及反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎等強(qiáng)制性脊柱炎診斷類(lèi)別[9]?，F(xiàn)在臨床上對(duì)于強(qiáng)制性脊柱炎的治療常采用控制治療方法、體療、物理治療和藥物治療以及手術(shù)治療，控制治療一般從患者的家屬入手，讓他們了解該病的性質(zhì)和大致的病程以及干預(yù)措施，增強(qiáng)患者抗病的信心和耐心，并且要注意維持患者正常的姿勢(shì)和活動(dòng)能力等[10]；體療是對(duì)患者采取針對(duì)性的體育治療，保持患者的脊柱生理彎曲，并且防止骨質(zhì)疏松和肌肉性萎縮；物理治療是用熱療、礦泉溫泉浴和水盆浴等進(jìn)行治療，有利于增加血液的循環(huán)[11]；藥物治療一般給予患者非甾體類(lèi)抗炎藥、腎上腺皮質(zhì)激素等藥物進(jìn)行服用。本研究通過(guò)對(duì)強(qiáng)制性脊柱炎患者和健康者血清中血沉、CRP以及HLA-B27的檢測(cè)，對(duì)HLA-B27、血沉、CRP診斷強(qiáng)直性脊柱炎的臨床意義進(jìn)行了探究。

強(qiáng)制性脊柱炎患者全部都存在骶髂關(guān)節(jié)炎癥以及其他類(lèi)型的關(guān)節(jié)炎癥，由肝臟合并形成的CRP在炎性反應(yīng)中直接參與了其中的反應(yīng)過(guò)程，并且強(qiáng)制性脊柱炎患者的CRP水平較正常人群來(lái)看，明顯高于健康人群的水平，特別是在強(qiáng)制性脊柱炎的活動(dòng)期，血清中的CRP水平會(huì)出現(xiàn)顯著升高[12]。強(qiáng)制性脊柱炎患者血清中CRP水平的明顯升高，提示強(qiáng)制性脊柱炎患者的體液免疫系統(tǒng)功能發(fā)生了改變。CRP是存在于急性強(qiáng)制性脊柱炎時(shí)期的一種反應(yīng)蛋白，它可以作為炎癥組織損傷程度的參考指標(biāo)，CRP在急性時(shí)期的生理應(yīng)激作用比較明顯，可以將免疫復(fù)合物進(jìn)行清除，通過(guò)與補(bǔ)體Clq的結(jié)合可以激活補(bǔ)體，并且通過(guò)FCγ受體的結(jié)合介導(dǎo)吞噬細(xì)胞對(duì)免疫復(fù)合物以及凋亡的細(xì)胞碎片進(jìn)行清除，對(duì)單核細(xì)胞表面存在的細(xì)胞因子等進(jìn)行刺激，從而導(dǎo)致血清中的CRP水平升高[13]。同時(shí)，強(qiáng)制性脊柱炎患者急性炎癥發(fā)生時(shí)，血清中的炎性因子明顯增多，導(dǎo)致了血沉的上升速度明顯加快[14]。血沉對(duì)于強(qiáng)制性脊柱炎患者的診斷雖然擁有較低的特異性，但是血清中血沉的明顯升高可以間接地反映出有炎癥和組織損傷的存在，并且通過(guò)相關(guān)性分析可以得出，血沉的上升速度和升高的程度與組織的損傷程度和炎癥程度呈正相關(guān)，故血沉可以作為檢測(cè)疾病活動(dòng)情況的指標(biāo)[15]。HLA-B27基因位于人類(lèi)第6號(hào)染色體的短臂上，是人類(lèi)分子B位點(diǎn)的等位基因，在臨床上，人們?cè)缫呀?jīng)發(fā)現(xiàn)了JHLA-B27抗原與強(qiáng)制性脊柱炎的發(fā)生情況具有高度的相關(guān)性，并且大多數(shù)強(qiáng)制性脊柱炎患者的HLA-B27的抗原表達(dá)為陽(yáng)性[15]。近年來(lái)，許多醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究者對(duì)HLA-B27抗原和強(qiáng)制性脊柱炎的相關(guān)性進(jìn)行了研究，并表明強(qiáng)制性脊柱炎的發(fā)生與HLA-B27抗原的表達(dá)有著明顯的相關(guān)性[17]。在本研究中，強(qiáng)制性脊柱炎患者HLA-B27陽(yáng)性率為76.67%，而為健康人群的對(duì)照組中HLA-B27的陽(yáng)性率為0%，因此，HLA-B27抗原對(duì)強(qiáng)直性脊柱炎的診斷和鑒別具有重要的輔助作用[18]。通過(guò)Cowling法檢測(cè)以及CRP檢測(cè)和HLA-B27、血沉檢測(cè)得出強(qiáng)制性脊柱炎組患者在靜止、活動(dòng)、可疑活動(dòng)以及血沉和CRP水平、心電圖的異常率和X線片的改變率均高于健康人群（P＜0.05），因此，影響強(qiáng)制性脊柱炎的因素有血沉、CRP以及HLA-B27。

HLA-B27的抗原具有高度的多形性，但是，當(dāng)HLA中B27抗原呈現(xiàn)出陽(yáng)性時(shí)，只有3%左右的患者會(huì)發(fā)展為強(qiáng)制性脊柱炎[19]，HLA-B27抗原呈現(xiàn)為陽(yáng)性的人群是強(qiáng)制性脊柱炎的易感人群，但是陽(yáng)性患者并未出現(xiàn)發(fā)病的情況，因此在人群中并不能將HLA-B27陽(yáng)性作為強(qiáng)制性脊柱炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)[20]。從單因素和多因素對(duì)強(qiáng)制性脊柱炎的分析來(lái)看，患者的病情活動(dòng)、心電圖異常率以及X線片改變率對(duì)強(qiáng)制性脊柱炎的發(fā)生無(wú)影響作用（P＞0.05），從單因素和多因素對(duì)血沉、CRP、HLA-B27的情況分析來(lái)看，CRP水平和血沉與強(qiáng)制性脊柱炎的發(fā)生相關(guān)性強(qiáng)。綜上所述，血沉、CRP的水平變化可以作為強(qiáng)制性脊柱炎病情情況的反應(yīng)指標(biāo)，與強(qiáng)制性脊柱炎的病情活動(dòng)密切相關(guān)。盡管HLA-B27具有較高的特異性和敏感性，以增加強(qiáng)制性脊柱炎的診斷的可能性，但是HLA-B27的陽(yáng)性率變化并不能成為強(qiáng)制性脊柱炎的診斷標(biāo)準(zhǔn)，在臨床治療中有效的降低強(qiáng)制性脊柱炎的炎癥情況，對(duì)于改善患者的病情有很大幫助。

表1 兩組疾病活動(dòng)情況、血生化指標(biāo)、心電圖、X線情況比較

表2 強(qiáng)制性脊柱炎與各項(xiàng)指標(biāo)多因素分析

表3 各相關(guān)指標(biāo)ROC曲線