突觸融合蛋白6與突觸融合蛋白8的表達(dá)在胃癌預(yù)后中的價(jià)值

馬麗，仝建軍，薛建波，徐濤

（首都醫(yī)科大學(xué)大興教學(xué)醫(yī)院 消化內(nèi)科，北京 102600）

胃癌（gastric cancer, GC）是導(dǎo)致患者死亡的第2大常見惡性腫瘤，全球每年有約80萬人因胃癌致死[1]。盡管關(guān)于胃癌的早期診斷和各種治療方法有了較大的進(jìn)展，但依然存在治愈難、預(yù)后差的難題[2-3]。因此，為了提高胃癌患者的臨床療效，需要進(jìn)一步的探索胃癌發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程中相關(guān)的分子機(jī)制，尋找潛在的治療靶點(diǎn)和預(yù)后標(biāo)志?？扇苄訬-己基順丁烯二酰亞胺敏 感 因子（N-ethyl-maleimide-sensitive factor, NSF）附著蛋白（soluble NSF attachment proteins, SNAP）的膜受體SNARE（SNAP receptors）蛋白在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及侵襲轉(zhuǎn)移進(jìn)程中扮演著重要的角色[4-5]。其成員突觸融合蛋白Syntaxin 6（STX6）、Syntaxin 8（STX8）蛋白分別在食管鱗癌[6]和腦膠質(zhì)瘤[7]的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮重要作用，敲低STX8基因能夠有效抑制腫瘤細(xì)胞增殖。但STX6和STX8是否與胃癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有關(guān)，目前還不清楚。因此，本文通過Kaplan-Meier plotter（KM plotter）在線數(shù)據(jù)庫分析STX6和STX8表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的相關(guān)性，并探討其在胃癌患者預(yù)后中的意義和價(jià)值，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 KM plotter在線數(shù)據(jù)庫分析

通過在線數(shù)據(jù)庫KM plotter（http：//kmplot.com/gastric）獲得的882例胃癌患者臨床病理信息，包括臨床分級(jí)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移狀態(tài)、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移狀態(tài)、Lauren分類、分化程度及HER2狀態(tài)。對(duì)STX6和STX8在胃癌患者總生存期（overall survival, OS）中的預(yù)后價(jià)值進(jìn)行在線分析。根據(jù)STX6和STX8基因表達(dá)水平高于或低于中位數(shù)，分為高表達(dá)和低表達(dá)，并得出相應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)比（hazard ratio, HR）、95%置信區(qū)間（CI）和P值。

1.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 16.0統(tǒng)計(jì)軟件，采用χ2檢驗(yàn)對(duì)臨床資料進(jìn)行相關(guān)性分析，采用Kaplan-Meier法對(duì)患者的生存危險(xiǎn)比及95%CI進(jìn)行分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 STX6和STX8 mRNA表達(dá)與胃癌預(yù)后分析

STX6的Affymetrix ID為：212799_at。KM plotter在線數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，STX6 mRNA的高表達(dá)與胃癌患者較好的OS相關(guān)，STX6 mRNA高表達(dá)胃癌患者的OS要好于低表達(dá)患者（P＜0.05），風(fēng)險(xiǎn)比（95%CI：0.57，0.86）]。STX8的Affymetrix ID為：204690_at。STX8 mRNA的高表達(dá)與胃癌患者OS相關(guān)，STX8 mRNA高表達(dá)胃癌患者的OS要好于低表達(dá)患者（P＜0.05），風(fēng)險(xiǎn)比見附圖。

2.2 STX6和STX8 mRNA表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的相關(guān)性

進(jìn)一步探究STX6、STX8 mRNA表達(dá)與胃癌臨床病理特征的相關(guān)性，發(fā)現(xiàn)STX6 mRNA表達(dá)與胃癌患者的Lauren分型中混合型、HER2狀況、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)（P＜0.05）（見表1）。STX8 mRNA表達(dá)與胃癌患者的臨床分級(jí)的Ⅱ級(jí)和Ⅳ級(jí)、Lauren分型中腸型和彌漫型、HER2陰性、無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移相關(guān)（P＜0.05）（見表2）。

附圖 STX6及STX8 mRNA表達(dá)與胃癌患者生存時(shí)間曲線圖

表1 STX6 mRNA表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的相關(guān)性

表2 STX8 mRNA表達(dá)與胃癌患者臨床病理特征的相關(guān)性

3 討論

隨著對(duì)幽門螺桿菌、易致癌食物等易導(dǎo)致胃癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素的不斷控制以及腫瘤治療手段的長(zhǎng)足發(fā)展，胃癌發(fā)生率及病死率有一定程度的降低，但由于其轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)率依然居高不下，胃癌患者的預(yù)后及遠(yuǎn)期生存仍是亟待解決的難題[8]。Kaplan-Meier plotter通過采用（Gene Expression Omnibus, GEO）數(shù)據(jù)庫檢測(cè)某個(gè)基因在癌癥患者中的預(yù)后價(jià)值。Kaplan-Meier plotter作為1個(gè)有效的工具，目前已經(jīng)通過該平臺(tái)確定許多可以作為預(yù)后標(biāo)志或潛在藥物靶點(diǎn)的基因[9-12]。

SNARE蛋白是作為跨膜蛋白是真核生物中調(diào)節(jié)膜融合的關(guān)鍵因子，參與細(xì)胞各種生理活動(dòng)[13-14]。其中STX6和STX8是其亞家族Syntaxin的成員，STX6作為一種囊泡轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，參與胞內(nèi)蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)，尤其是在細(xì)胞膜重建過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用[15]。STX8在胞內(nèi)主要定位于高爾基體、溶酶體和胞內(nèi)體的膜上，參與細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)運(yùn)輸及膜融合過程[16-17]。研究表明[18]，STX8能夠與STX7蛋白、小泡運(yùn)輸通過相互作用t-SNAREs同源物蛋白（vesicle transport through interaction with t-SNAREs homolog 1B, vti1b）或vti1a蛋白以及小泡相關(guān) 膜 蛋 白7（vesicle-associated membrane protein 7,VAMP7）或VAMP8蛋白在膜融合過程中形成SNARE復(fù)合體，啟動(dòng)囊泡融合，促進(jìn)蛋白降解。研究發(fā)現(xiàn)[19]，STX6在肺癌、食管癌、膀胱癌等腫瘤組織中表達(dá)異常，影響食管鱗狀細(xì)胞癌的生長(zhǎng)和遷移。STX8在多形性腦膠質(zhì)瘤中與有絲分裂誘導(dǎo)基因6（mitogen-inducible gene-6, MIG-6）蛋白形成復(fù)合體，參與表皮生長(zhǎng)因子受體（epidermal growth factor receptor, EGFR）的降解，影響EGFR介導(dǎo)的促腫瘤信號(hào)，進(jìn)而影響腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程[20]。但STX6及STX8在胃癌的預(yù)后中的作用和價(jià)值還未被廣泛的研究。

本研究發(fā)現(xiàn)，胃癌組織中STX6 mRNA的高表達(dá)與患者較好的OS密切相關(guān)，STX6 mRNA高表達(dá)的胃癌患者的OS要高于低表達(dá)患者；其表達(dá)與胃癌患者的Lauren分型中混合型、HER2狀況、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。DU等[6]研究發(fā)現(xiàn)，STX6在食管鱗狀細(xì)胞癌中上調(diào)表達(dá)，沉默STX6能抑制食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞增殖，提示STX6具有一定的促癌作用。但本研究中，STX6 mRNA高表達(dá)的胃癌患者OS較好，提示STX6在胃癌發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮一定的抑癌作用。因此，STX6在不同的腫瘤中可能發(fā)揮不同的功能，也可能是由于存在腫瘤差異性導(dǎo)致，但目前有關(guān)STX6在腫瘤中具體的作用機(jī)制尚不清楚，還需要進(jìn)一步的探索。本研究發(fā)現(xiàn)，STX8 mRNA的高表達(dá)與胃癌患者較好的總生存期OS密切相關(guān)，STX8 mRNA高表達(dá)胃癌患者的OS要好于低表達(dá)患者；其表達(dá)與胃癌患者的臨床分級(jí)的Ⅱ級(jí)和Ⅳ級(jí)、Lauren分型中腸型和彌漫型、HER2陰性、無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。有報(bào)道稱STX8在原發(fā)性肝癌組織中表達(dá)下調(diào)，并與腫瘤的TNM分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)[21]，提示STX8可能在肝癌的發(fā)生發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮抑癌基因作用；但有研究表明[7]，在腦膠質(zhì)細(xì)胞瘤U251細(xì)胞中靶向敲低STX8基因能夠有效抑制細(xì)胞增殖、遷移及侵襲能力，提示STX8可能在腦膠質(zhì)瘤的發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程中發(fā)揮促癌基因功能。因此，STX8基因可能在不同的腫瘤中發(fā)揮不同的作用。本研究發(fā)現(xiàn)STX8 mRNA高表達(dá)胃癌患者OS較好，提示STX8可能對(duì)胃癌的發(fā)生、發(fā)展產(chǎn)生一定的抑癌作用，但還需要進(jìn)一步的研究證實(shí)。胃癌中STX6、STX8的表達(dá)水平能夠作為一種潛在的胃癌遠(yuǎn)期預(yù)后的評(píng)價(jià)指標(biāo)。但還需要大樣本的臨床數(shù)據(jù)對(duì)此進(jìn)行更進(jìn)一步的檢測(cè)和驗(yàn)證。

綜上所述，STX6、STX8 mRNA高表達(dá)可以提高胃癌患者的OS，與胃癌較好的預(yù)后密切相關(guān)。通過檢測(cè)胃癌組織中STX6、STX8的表達(dá)水平，或許能夠作為胃癌患者預(yù)后的一種預(yù)測(cè)指標(biāo)，這將有助于開發(fā)出能夠更準(zhǔn)確地預(yù)測(cè)患者預(yù)后的工具。盡管通過統(tǒng)計(jì)分析表明STX6及STX8在胃癌中具有一定的抑癌作用，但有關(guān)其具體的作用機(jī)制還尚不可知，仍需要基礎(chǔ)研究來探討。