核干細(xì)胞因子在食管腺癌組織中的表達(dá)及其與臨床特征的關(guān)系

管淑敏，孫麗麗

濮陽市人民醫(yī)院病理科，河南 濮陽457000

食管腺癌具有較高的發(fā)病率，且近年來其發(fā)病率呈現(xiàn)逐年增高的趨勢，嚴(yán)重威脅著患者的生命健康[1]，因此，如何有效地診斷與治療食管腺癌具有重要意義。相關(guān)研究顯示，核干細(xì)胞因子在細(xì)胞的增殖過程中起到了關(guān)鍵性作用，且呈現(xiàn)較高水平的表達(dá)[2-3]。本研究對食管腺癌患者體內(nèi)核干細(xì)胞因子的表達(dá)情況進(jìn)行分析，并對核干細(xì)胞因子表達(dá)與食管腺癌患者臨床特征的關(guān)系進(jìn)行探討，旨在為食管腺癌的診斷與治療提供參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2006年1月至2016年12月濮陽市人民醫(yī)院收治的食管腺癌患者80例。納入標(biāo)準(zhǔn)：①均經(jīng)病理學(xué)檢查確診為食管腺癌；②生存期≥3年。排除標(biāo)準(zhǔn)：①不符合臨床食管腺癌的診斷標(biāo)準(zhǔn)；②伴有嚴(yán)重的心肝腎功能不全者；③臨床資料不全者。80例食管腺癌患者中，男46例，女34例；年齡39～77歲，平均（57.85±4.61）歲；≥60歲50例，＜60例30例；腫瘤直徑：≥5.0 cm 45例，＜5.0 cm 35例；組織分化程度：低分化30例，中分化28例，高分化22例；TNM分期：Ⅰ期15例，Ⅱ期25例，Ⅲ期28例，Ⅳ期12例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況：有轉(zhuǎn)移30例，無轉(zhuǎn)移50例；浸潤深度：黏膜及黏膜下層20例，深肌層18例，纖維膜20例，淺肌層12例，周圍軟組織10例。

1.2 標(biāo)本采集

選取食管腺癌患者的病灶組織及其對應(yīng)的癌旁5.0 cm內(nèi)的正常組織作為此次研究的標(biāo)本，且所有選取的標(biāo)本均經(jīng)過40.0 g/L多聚甲醛溶液固定處理，隨后常規(guī)脫水和石蠟包埋處理，切片厚度為4.0～6.0 μm，最后進(jìn)行HE染色與免疫組織化學(xué)染色處理[4]。

1.3 檢查方法

采用鏈霉親和素-生物素-過氧化物酶復(fù)合物法（strept avidin-biotin complex，SABC）對核干細(xì)胞因子進(jìn)行測定，試劑盒為武漢博士德生物工程有限公司提供的即用型SABC免疫組化染色試劑盒，抗體為鼠抗羊IgGNS抗體。其中，以牛血清蛋白作為標(biāo)準(zhǔn)品，核干細(xì)胞因子的稀釋比例為1∶100。嚴(yán)格按照SABC進(jìn)行操作，且需要進(jìn)行二氨基聯(lián)苯胺（diaminobenzidine，DAB）顯色處理，緊接著蒸餾水沖洗和蘇木素復(fù)染處理，給予70%、85%、95%梯度濃度的乙醇進(jìn)行脫水。最后，二甲苯透明和中性樹膠進(jìn)行封片處理[5-6]。

1.4 判斷標(biāo)準(zhǔn)

組織切片中細(xì)胞核內(nèi)染色為黃褐色則判斷為陽性染色。其中，陽性細(xì)胞所占比例≥20.00%為陽性；陽性細(xì)胞所占比例＜20.00%為陰性。另外，應(yīng)用磷酸鹽緩沖液（phosphate buffer saline，PBS）替代一抗作為陰性對照。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用SPSS 18.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同組織中核干細(xì)胞因子表達(dá)情況的比較

核干細(xì)胞因子在食管腺癌組織、癌旁正常組織中的陽性表達(dá)率分別為75.0%（60/80）、31.2%（25/80），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=30.74，P＜0.01）。（圖1）

圖1 核干細(xì)胞因子在不同組織中的表達(dá)情況（HE染色，×200）

2.2 核干細(xì)胞因子表達(dá)與食管腺癌患者臨床特征的關(guān)系

核干細(xì)胞因子的陽性表達(dá)與食管腺癌患者的組織分化程度、浸潤深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)（P＜0.05）；核干細(xì)胞因子的陽性表達(dá)與食管腺癌患者的性別、年齡、腫瘤直徑及TNM分期無關(guān)（P＞0.05）。（表1）

3 討論

食管腺癌是消化內(nèi)科常見的一種疾病，在臨床具有較高的發(fā)病率和病死率，嚴(yán)重影響患者的生命健康[7]。相關(guān)研究顯示，食管腺癌的發(fā)生、發(fā)展受到癌基因與抑癌基因的影響，癌基因與抑癌基因相互作用，可以引發(fā)腫瘤的發(fā)生[8-9]。核干細(xì)胞因子基因在多種腫瘤中高表達(dá)，尤其在胃癌、肝癌及結(jié)腸癌中表達(dá)水平更高，因此，核干細(xì)胞因子可以作為臨床上診斷腫瘤的重要標(biāo)志物。人類的核干細(xì)胞因子基因位于3p21.1，與小鼠具有81%的編碼同源，核干細(xì)胞因子蛋白有538個(gè)氨基酸，由堿性區(qū)域、雙螺旋區(qū)和一級(jí)GTP組成。相關(guān)研究顯示，核干細(xì)胞因子可以通過與p53、c-MYC等相關(guān)的途徑影響細(xì)胞周期的進(jìn)展，進(jìn)而直接或間接地影響腫瘤細(xì)胞的增殖與分化[10-11]。大量臨床試驗(yàn)結(jié)果顯示，干細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞之間存在較多的相似性，其中協(xié)調(diào)控制的自我更新與保證分化是有效維持干細(xì)胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定的重要因素，一旦平衡失調(diào)，便會(huì)導(dǎo)致腫瘤發(fā)生[12-14]。另外，研究還顯示，核干細(xì)胞因子在急性白血病患者中呈現(xiàn)出較高水平的表達(dá)[15]。同時(shí)，相關(guān)臨床研究顯示，核干細(xì)胞因子在卵巢癌患者體內(nèi)也呈現(xiàn)高表達(dá)，并且臨床常將其作為診斷卵巢癌的重要標(biāo)志物之一[16]。既往的臨床研究顯示，核干細(xì)胞因子可能參與食管癌的發(fā)生、發(fā)展[17]。因此，為了全面地了解食管腺癌的發(fā)生與發(fā)展情況，本研究進(jìn)一步分析了核干細(xì)胞因子在食管腺癌中的表達(dá)及其與患者臨床特征的關(guān)系。

表1 核干細(xì)胞因子表達(dá)與食管腺癌患者臨床特征的關(guān)系

本研究結(jié)果顯示，食管腺癌組織中核干細(xì)胞因子的陽性表達(dá)率為75.0%，明顯高于癌旁正常組織的31.2%（P＜0.01），核干細(xì)胞因子在食管腺癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，表明核干細(xì)胞因子可能參與了食管腺癌的發(fā)生過程。本研究還發(fā)現(xiàn)，核干細(xì)胞因子的陽性表達(dá)與食管腺癌患者的組織分化程度、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)，但與食管腺癌患者的性別、年齡、TNM分期及腫瘤直徑無關(guān)。核干細(xì)胞因子的表達(dá)與食管腺癌的發(fā)生、發(fā)展有著緊密聯(lián)系，可以將其作為診斷食管腺癌病情嚴(yán)重程度的標(biāo)志物。同時(shí)，可以將核干細(xì)胞因子作為靶向治療的重要目標(biāo)基因，為臨床中治療食管腺癌提供新的方向[18]。

綜上所述，核干細(xì)胞因子在食管腺癌組織中呈現(xiàn)高表達(dá)，且其陽性表達(dá)與食管腺癌患者的組織分化程度、浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況有關(guān)，臨床中可以將其作為診斷食管腺癌的一種重要標(biāo)志物。

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