呋蟲胺對不同蟲態(tài)煙粉虱的室內(nèi)毒力測定

孟 臻 ，王菲菲 ，張典利 ，劉政軍 ，姬小雪 *

（1. 山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 植物保護學(xué)院，山東 泰安 271018； 2. 山東濱農(nóng)科技有限公司，山東 濱州 256600；3. 山東泰陽生物科技有限公司，山東 泰安 271000）

煙粉虱（Bemisia tabaci）又名棉粉虱，在世界范圍內(nèi)普遍發(fā)生，其寄主植物種類高達74科500種以上[1]。在我國主要為害蔬菜、煙草等經(jīng)濟作物。煙粉虱的繁殖能力強，在我國南方一年可發(fā)生數(shù)十代，并且存在世代重疊現(xiàn)象，嚴重影響我國的農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。目前對煙粉虱的防治還是主要依靠化學(xué)藥劑，由于煙粉虱對各種藥劑抗性發(fā)展嚴重，急需尋找高效低毒、環(huán)境友好的替代藥劑[2]。

新煙堿類殺蟲劑是近 30 年間主要開發(fā)的一類新型殺蟲劑。由于用量少、持效性強、對大多數(shù)節(jié)肢動物的高神經(jīng)毒性以及獨特的選擇性作用機制，使得其在不到 20年的時間里，一躍成為全世界使用最為廣泛、發(fā)展最快的一類殺蟲劑[3]。 目前常用的煙堿類殺蟲劑有吡蟲啉、噻蟲嗪、噻蟲啉等藥劑，以吡蟲啉為代表的第一代煙堿類殺蟲劑使用多年，煙粉虱早已對其產(chǎn)生抗性；以噻蟲啉為代表的第二代煙堿類殺蟲劑對環(huán)境友好，是目前發(fā)展的主要對象，但昂貴的價格限制了它們的使用[4]； 而第三代煙堿類殺蟲劑呋蟲胺為煙粉虱的防治提供了新思路。本試驗以吡蟲啉為對照藥劑探究呋蟲胺對煙粉虱各個蟲態(tài)的毒力，以期為呋蟲胺的合理應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗藥劑

95%呋蟲胺原藥（山東中農(nóng)聯(lián)合生物科技股份有限公司），95%吡蟲啉原藥（山東濰坊潤豐化工股份有限公司）。

1.2 供試蟲源

煙粉虱采自山東農(nóng)業(yè)大學(xué)溫室煙草植物上，在溫室內(nèi)盆栽煙草上連續(xù)飼養(yǎng)三代以上，經(jīng)基因序列鑒定和系統(tǒng)發(fā)育分析，為B型煙粉虱種群，分別采集成蟲、卵、若蟲用于測定。供試煙草（Nicotiana tobaccoL.）為野生型的珊西煙（N. tabacumcv.Xanthinc）。在紗籠罩的育苗盤中育苗，生長在溫室自然光照條件下，溫度(25±1)℃，濕 度(75±5)%。煙 苗長至2～4片葉時將其移栽至放置在紗籠中的塑料花盆中（Φ=12 cm，H=10 cm），正常管理，每兩周施一次肥。煙苗生長至 5 葉期時供試驗用。煙粉虱成蟲在溫室內(nèi)煙苗籠罩條件下連續(xù)飼養(yǎng)，且整個飼養(yǎng)期間無用藥史。

1.3 試驗方法

卵試驗及若蟲試驗參照《農(nóng)藥室內(nèi)生物測定試驗準則殺蟲劑生物測定——瓊脂保濕浸葉法》（NY/T 1154.16—2013）。（1）瓊脂板的制備，在100 mL三角瓶中加入 0.90 g瓊脂粉，再加入60 mL去離子水，與微波爐加熱溶解至澄清，配成15 g/L的瓊脂，然后量取 15 mL倒入直徑 9 cm的培養(yǎng)皿中冷卻凝固備用；（2）浸葉，取含有適量卵或若蟲的葉片于藥劑中浸泡 5 s，取出后用吸水紙吸干殘余液體，放于瓊脂上進行培養(yǎng)，以清水為對照；（3）培養(yǎng)，將處理好的葉片放于光照培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)條件(26±2)℃、相對濕度70%～80%、L：D=14 h：10 h。卵處理 10 d后，對照組全部孵化時檢查結(jié)果，記錄卵總數(shù)以及孵化數(shù)。孵化標準：煙粉虱卵孵化后會在葉片上形成一個黃色或淡黃色的圓點，根據(jù)圓點數(shù)量統(tǒng)計孵化數(shù)。若蟲處理 48 h后查結(jié)果，記錄蟲總數(shù)和死亡數(shù)。死亡標準：蟲體消失或呈現(xiàn)暗黑色即視為死亡。

成蟲試驗參照《農(nóng)藥室內(nèi)生物測定準則殺蟲劑生物測定——藥膜法》（NY/T 1154.11—2008）。分別取 500 μL不同濃度的兩種藥劑加入 20 mL玻璃試管中，在平臺上不斷滾動試管使藥液在試管內(nèi)壁形成均勻藥膜，以用丙酮成膜的玻璃管為對照。每管內(nèi)接入發(fā)育一致的煙粉虱成蟲 50 頭，管口用細紗網(wǎng)封住且管口朝下傾斜 35°放置，重復(fù)4 次，置于(26±2)℃、相對濕度 70%～80%、L：D=14 h：10 h的恒溫光照培養(yǎng)箱內(nèi)，保存培養(yǎng) 6 h。6 h后檢查結(jié)果，記錄死、活蟲數(shù)。死亡標準：用零號毛筆筆尖輕觸試蟲蟲體，不動者視為死亡。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析

空白對照死亡率小于 5%無需校正；空白對照死亡率在 5%～10%，用 Abott 公式計算各處理的校正死亡率；空白對照死亡率 10%以上，則需重做試驗。

分別記錄每個處理所有重復(fù)的原始數(shù)據(jù)，采用 SPSS 數(shù)據(jù)處理軟件計算試驗結(jié)果，并分別求出呋蟲胺對煙粉虱各個蟲齡的毒力回歸方程和LC50及 95%置信限。

2 結(jié)果與分析

由表 1 可知：呋蟲胺對煙粉虱若蟲、卵和成蟲LC50分別為 24.68，10.55，75.91 mg/L；吡蟲啉對煙粉虱卵、若蟲、成蟲LC50分別為 56.07，25.77，111.83 mg/L。呋蟲胺和吡蟲啉對不同蟲態(tài)煙粉虱的毒力存在較大差異，相比對卵和若蟲，呋蟲胺對煙粉虱成蟲的毒殺效果較差，呋蟲胺對所有蟲態(tài)的煙粉虱毒殺效果均優(yōu)于對照藥劑吡蟲啉。

表1 呋蟲胺對煙粉虱卵、若蟲、成蟲的室內(nèi)毒力測定

3 討論與結(jié)論

我國對煙粉虱的防治目前還是以化學(xué)防治為主，由于藥劑不科學(xué)的使用，煙粉虱已對有機磷和菊酯類等常規(guī)殺蟲劑產(chǎn)生了較高的抗性[5]。 Rauch等[6]發(fā) 現(xiàn)以色列煙粉虱種群對吡蟲啉的抗性達361 倍。如何有效的控制煙粉虱已成為各國植保工作者的重要研究課題[7]。

煙粉虱在我國北方 7、8月份發(fā)生嚴重，在南方幾乎全年發(fā)生，并且有世代重疊現(xiàn)象，重點防治時期應(yīng)在若蟲以前，可以有效減少煙粉虱的種群基數(shù)。我國北方在 6月份煙粉虱發(fā)生初期施藥可有效防治卵和低齡若蟲，在我國南方通過農(nóng)藥的合理混用可有效控制種群，延緩抗藥性的發(fā)生。本研究以吡蟲啉為對照藥劑測定了呋蟲胺對煙粉虱卵、若蟲、成蟲 3 個時期的毒力，研究表明呋蟲胺對卵和若蟲的毒力較高，而對成蟲的毒力不高。因此，田間采用呋蟲胺進行防治時，適宜的蟲齡應(yīng)該選擇卵和若蟲盛期，可發(fā)揮最高效的毒殺活性，能夠有效控制煙粉虱群體的擴大。由于呋蟲胺對煙粉虱成蟲的殺滅效果較差，如果在煙粉虱發(fā)生的后期使用可能會造成控制效果差和藥劑的浪費。所以呋蟲胺可與煙粉虱成蟲毒殺活性高的殺蟲劑結(jié)合互補使用，可以有效毒殺各個齡期煙粉虱，提高防治效果。

[1]周堯, 閆鳳鳴. 中國粉虱科新種和新紀錄(同翅目)[J]. 昆蟲分類學(xué)報, 1988, X(3/4)：243-247.

[2]胡榮利, 朱偉, 祝樹德. 烯啶蟲胺對煙粉虱的使用技術(shù)及抗性風(fēng)險評估研究[J]. 生物災(zāi)害科學(xué), 2012, 35(4)： 359-365.

[3]藺哲廣,孟飛,鄭火青,等.新煙堿類殺蟲劑對蜜蜂健康的影響[J].昆蟲學(xué)報,2014,57(5)：607-615.

[4]張沖,葛峰,單正軍,等.噻蟲啉環(huán)境行為研究[J].農(nóng)藥,2010,49(11)：830-833.

[5]何玉仙, 翁啟勇, 黃建, 等. 煙粉虱田間種群的抗藥性[J]. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報, 2007, 18(7)： 1578-1582.

[6]Rauch N, Nauen R. Identification of biochemical markers linked to neonicotinoid cross resistance inBemisia tabaci(Hemiptera：Aleyrodidae)[J]. Archives Insect Biochemistry and Physiology, 2003, 54(4)： 165-176.

[7]Tan L, Bu Y, Cheng Y, et al. Indoor toxicity research of imidacloprid on honeybee larvae[J]. Asian Journal of Ecotoxicology, 2016,11(4)： 900-905.