花絨寄甲初孵幼蟲對(duì)替代寄主寄生力測(cè)定

路紀(jì)芳 ，蔡靜蕓 ，趙 斌 ，展茂魁 * ，唐艷龍 ，王 健 ，司徒春南

（1. 貴州省遵義市林業(yè)科學(xué)研究所，貴州 遵義 563000；2. 遵義師范學(xué)院，貴州 遵義 563000）

花絨寄甲（Dastarcus helophoroidesFaimaire），又名花絨穴甲、花絨堅(jiān)甲、木蜂寄甲和縊翅寄甲，同物異名D. longulusSharp，是 天牛類昆蟲的重要寄生性天敵。原 隸屬鞘翅目（ Coleoptera）堅(jiān) 甲科（ Colydiidae），后獨(dú)立出來成為穴甲科（Bothrideridae）昆蟲[1-4]。 2004 年，楊忠岐[5]認(rèn) 為這種甲蟲為寄生性昆蟲，故將其中文名改為更能反映其生物學(xué)習(xí)性的名稱——花絨寄甲。

花絨寄甲是我國(guó)重大林業(yè)害蟲——天牛的主要天敵[4]，針對(duì)其生物學(xué)特性、防治技術(shù)國(guó)內(nèi)外已經(jīng)進(jìn)行了大量研究。張彥龍等[6]研 究了花絨寄甲對(duì)松褐天牛越冬后幼蟲或蛹的控制作用以及在林間大規(guī)模防治的技術(shù)方法，結(jié)果表明花絨寄甲是松褐天牛老熟幼蟲和蛹的高效天敵。近幾年，就花絨寄甲室內(nèi)人工繁育技術(shù)許多研究者也進(jìn)行了一些研究，目前已經(jīng)實(shí)現(xiàn)了其室內(nèi)人工飼養(yǎng)[7]， 但花絨寄甲幼蟲對(duì)替代寄主的寄生率較低，大大增加生產(chǎn)成本，這也是影響花絨寄甲實(shí)現(xiàn)工廠化生產(chǎn)的關(guān)鍵問題。為了提高替代寄主的利用率，筆者研究了花絨寄甲初孵幼蟲對(duì)替代寄主的寄生力，確定了花絨寄甲初孵幼蟲的最佳接蟲時(shí)間，為進(jìn)一步完善人工繁育花絨寄甲技術(shù)提供必要的依據(jù)和技術(shù)支持。

1 材料和方法

1.1 供試蟲源

試驗(yàn)選取室內(nèi)新羽化的健康花絨寄甲成蟲 300 頭，隨機(jī)放入帶有蓋子的塑料培養(yǎng)盒內(nèi)，蓋子四周各留1 個(gè)透氣孔（φ= 5 mm），每盒放入成蟲 30頭，共 10盒。培養(yǎng)盒內(nèi)放入水管和飼料供成蟲補(bǔ)充水分和營(yíng)養(yǎng)，在盒子的中間放置一塊墊有產(chǎn)卵基質(zhì)的松木塊，待 成蟲放入后將培養(yǎng)盒放在恒溫恒濕培養(yǎng)箱內(nèi)（ 溫度25 ℃，濕度 60%，無光照）飼養(yǎng)。

1.2 試驗(yàn)方法

當(dāng)培養(yǎng)室內(nèi)的花絨寄甲成蟲開始大量產(chǎn)卵后，每天 08：00 把產(chǎn)有卵粒的基質(zhì)（卵卡）取出，并更換新的產(chǎn)卵基質(zhì)。連續(xù)取卵卡10 d，將取出的卵卡放入干凈的培養(yǎng)盒內(nèi)（第一天取出的卵卡丟掉不要），蓋上盒蓋并標(biāo)注產(chǎn)卵日期，將培養(yǎng)盒放入恒溫恒濕培養(yǎng)箱內(nèi)（溫度 25 ℃，濕度 80%）培養(yǎng)。當(dāng)培養(yǎng)箱內(nèi)的卵卡開始孵化后，每天 08：00 把同一天孵化的幼蟲放入同一個(gè)培養(yǎng)盒內(nèi)，盒內(nèi)放置一個(gè)裝有濕海綿的培養(yǎng)皿，蓋上蓋子，并在盒子上標(biāo)記日期。從卵孵化出來當(dāng)天 08：00 的幼蟲到第二天 08：00 的幼蟲，定義為 1 日齡幼蟲，第二天 08：00 的幼蟲到第三天 08：00的幼蟲，定義為 2日齡幼蟲……直到幼蟲全部死亡。

挑選大小一致、健康程度相似的新鮮大麥蟲蛹作為替代寄主，供花絨寄甲初孵幼蟲接種。培養(yǎng)箱內(nèi)的卵開始孵化后，每天08：00 在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)把不同日齡的初孵幼蟲接種在新鮮蛹腹部，每頭蛹上接 10 頭健康活躍的幼蟲。接種后的蛹放在平底離心管內(nèi)，管口塞上脫脂棉，同一個(gè)處理放在同一個(gè)培養(yǎng)盒內(nèi)，然后置于培養(yǎng)箱（溫度為 25 ℃，濕度為 60%）內(nèi)培養(yǎng)。每個(gè)處理 30個(gè)重復(fù)。

替代寄主接種上花絨寄甲初孵幼蟲后前 15 d，每隔 5 d在解剖鏡下觀察試管內(nèi)幼蟲的生長(zhǎng)情況，并記錄存活幼蟲數(shù)量。接種45 d后，成蟲羽化，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)掏出每個(gè)試管內(nèi)羽化成蟲并記錄成蟲數(shù)量，如果試管內(nèi)有繭未羽化出成蟲，撥開繭看里面蟲體的狀態(tài)并做記錄。

1.3 數(shù)據(jù)分析

替代寄主接種上花絨寄甲初孵幼蟲后前 15 d，每隔 5 d在解剖鏡下觀察試管內(nèi)幼蟲的生長(zhǎng)情況，分別用數(shù)字 1，2，3，4，5 表示接種后5，10，15 d，化蛹期，羽化期，用i表示觀察的時(shí)間，i= 1，2，3，4，5，Li表示某時(shí)期寄主體表幼蟲或繭和成蟲的數(shù)量，D表示存活率，某個(gè)記錄時(shí)間i的存活率為：

i=1 時(shí)，Di=Li/10

i=2，3，4，5 時(shí)，Di=Li/Li-1

本試驗(yàn)所有數(shù)據(jù)采用 SPSS16.0 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，不同處理間的均值差異采用 LSD 法多重比較。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲在替代寄主上的出蟲率

一般情況下，在溫度為 25 ℃，濕度為 60%的培養(yǎng)箱內(nèi)花絨寄甲初孵幼蟲接種在寄主體表 45 d，成功寄生的幼蟲就會(huì)羽化為成蟲。結(jié)果表明，2 日齡幼蟲接種替代寄主后成蟲出蟲數(shù)最大，為 4.60 頭，最小的為 5 日齡幼蟲，2.43頭。且 1 日齡、2 日齡、3 日齡、4 日齡和5 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率呈極顯著差異（df=4,149，S＜0.001，F(xiàn)=4.96），而 1日齡、2日齡、3 日齡和 4 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率無差異（df=3,119，S=0.500，F(xiàn)=0.794）（ 圖 1）。

2.2 花絨寄甲初孵幼蟲在替代寄主上的存活

試驗(yàn)測(cè)定了同日齡花絨寄甲初孵幼蟲接種到替代寄主體表后 5，10，15 d、化蛹期和羽化期的存活率，結(jié)果表明初孵幼蟲接種后 5，1 0，1 5 d、化蛹期和羽化期的存活率均呈顯著差異（1日齡：df=4,149，F(xiàn)=46.843，S=0.000；2 日齡：d f=4,149，F(xiàn)=13.006，S=0.000；3 日齡：d f=4,149，F(xiàn)=15.080，S=0.000；4 日齡：d f=4,149，F(xiàn)=28.935，S=0.000；5 日齡：d f=4,149，F(xiàn)=30.707，S=0.000），且各日齡初孵幼蟲接種后5 d 的存活率均為最低，分別為50.67%、55.67%、48.33%、48.00%和 33.00%（圖 2） 。這表明花絨寄甲幼蟲接種到替代寄主后前 5 日是影響出蟲率的關(guān)鍵時(shí)期。

試驗(yàn)還測(cè)定了不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲接種到替代寄主體表后 5，10，15 d和蛹期的死亡率，結(jié)果表明不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲接種后 5 d的死亡率呈極顯著差異（df=4,149，F(xiàn)=7.536，S=0.000），而其它時(shí)間均無差異（df=4,149，F(xiàn)=0.093，S=0.985；df=4,149，F(xiàn)=0.414，S=0.799；df=4,149，F(xiàn)=0.527，S=0.716；df=4,149，F(xiàn)=0.998，S=0.411）。

圖2 初孵幼蟲接種后不同時(shí)間在替代寄主體表存活率

3 結(jié)論與討論

花絨寄甲是大型天牛類林木蛀干害蟲最為有效的天敵昆蟲，已引起我國(guó)林業(yè)科研工作者的關(guān)注，并就如何利用該天敵昆蟲做了大量的研究和實(shí)踐工作[3]。 研究表明，花絨寄甲初孵幼蟲依靠發(fā)達(dá)的胸足迅速爬行尋找寄主，找到寄主后，在寄主幼蟲的節(jié)間咬食，咬破表皮后將頭部插入寄主體內(nèi)，取食體內(nèi)物質(zhì)[1,8]。 因此在人工飼養(yǎng)過程中，明確幼蟲的最佳接種時(shí)間是有效提高寄生力的關(guān)鍵。本研究為了明確花絨寄甲幼蟲的最佳接種時(shí)間，在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)測(cè)定了前 5 日齡花絨寄甲初孵幼蟲對(duì)替代寄主的寄生率，試驗(yàn)結(jié)果表明，2日齡幼蟲接種替代寄主后成蟲出蟲數(shù)最大，為 4.60 頭，最小的為5 日齡幼蟲，2.43 頭。且1 日齡、2 日齡、3 日齡、4 日齡和 5 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率呈極顯著差異，而1 日齡、2 日齡、3日齡和4 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率無差異。該研究結(jié)果說明在室內(nèi)進(jìn)行花絨寄甲人工繁育時(shí)，可在幼蟲孵化后 2日和3 日進(jìn)行接種，以提高產(chǎn)量。

本研究還測(cè)定了初孵幼蟲接種到替代寄主體表后不同時(shí)間的死亡率，結(jié)果表明，對(duì)于同日齡花絨寄甲初孵幼蟲，各日齡初孵幼蟲接種后5 d的死亡率均為最高，分別為 49.33%、44.33%、51.67%、52.00%和67.00%，且各日齡初孵幼蟲接種后 5，10，15 d和蛹期死亡率之間均呈顯著差異；不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲，初孵幼蟲接種后 5 d的死亡率呈極顯著差異，而其它均無差異。該結(jié)果可為花絨寄甲的規(guī)?；庇a(chǎn)提供理論依據(jù)。

本研究中采用花絨寄甲前 5日齡初孵幼蟲進(jìn)行試驗(yàn)，因?yàn)樵囼?yàn)中，在溫度為 25 ℃，濕度為 60%的培養(yǎng)箱內(nèi)，無食物和水分供給的情況下，幼蟲存活第 4日活動(dòng)力就有所減弱，第 5日大量幼蟲已經(jīng)死亡，第6 日基本沒有存活的幼蟲。在文獻(xiàn)中尚沒有查到相關(guān)報(bào)道，接下來會(huì)進(jìn)行進(jìn)一步研究。

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