SREBP1在多囊卵巢綜合征和Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及意義

鈕紅麗，王孜涵，翟俊英

0 引言

子宮內(nèi)膜癌(Endometrial cancer，EC)是發(fā)生于女性子宮內(nèi)膜的一組上皮性惡性腫瘤，以雌激素依賴型(Ⅰ型)較為常見[1]。Ⅰ型EC患者固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白質(zhì)1 (Sterol regulatory element binding protein 1，SREBP1)表達(dá)上調(diào)，與患者脂代謝紊亂相關(guān)[2]。多囊卵巢綜合征(Polycystic ovary syndrome，PCOS)是一種多發(fā)于育齡期婦女的內(nèi)分泌、糖脂代謝異常性疾病，影響患者生育能力，增加患者內(nèi)分泌失調(diào)、罹患心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)[3]。研究表明，PCOS可能增加患者發(fā)生Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌的風(fēng)險(xiǎn)，嚴(yán)重影響女性身體健康和生命安全[4]。然而，PCOS和EC發(fā)病的分子機(jī)制尚不明確。因此，尋找與PCOS和Ⅰ型EC疾病相關(guān)的基因，對(duì)評(píng)估PCOS和EC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)具有重要價(jià)值。本研究旨在通過檢測(cè)PCOS患者和Ⅰ型EC患者血清中SREBP1水平，分析其與PCOS患者和Ⅰ型EC患者代謝參數(shù)之間的關(guān)系，探討SREBP1水平與PCOS和EC發(fā)病的關(guān)系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年10月至2017年7月在我院婦產(chǎn)科診治的PCOS患者47例、Ⅰ型EC患者41例為研究對(duì)象，選取同期45例正常女性體檢者作為對(duì)照。其中PCOS組年齡(39.75±11.97)歲，EC組年齡(50.95±19.84)歲。PCOS診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]：①月經(jīng)稀發(fā)、閉經(jīng)、子宮不規(guī)律流血；②至少一側(cè)卵巢直徑2～9 mm小卵泡數(shù)目≥12和/或卵巢體積≥10 ml；③血清睪酮≥60 mg/dl或雄烯二酮≥9.5 nmol/L。PCOS組納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合鹿特丹會(huì)議修訂的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]，即出現(xiàn)第1條和2～3條任一癥狀且排除其他病因者，可診斷為PCOS；②子宮內(nèi)膜經(jīng)組織病理學(xué)檢查未見異常增生者；③臨床資料完整患者。PCOS組排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除分泌雄性激素瘤患者；②排除1、2型糖尿病患者；③排除甲狀腺功能障礙患者；④排除3個(gè)月內(nèi)接受過藥物或手術(shù)治療患者。Ⅰ型EC組納入標(biāo)準(zhǔn)：①經(jīng)組織檢查首次確診為子宮內(nèi)膜癌患者；②Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌患者；③患者1個(gè)月均未進(jìn)行任何放化療及激素治療；④臨床資料保存完整。EC組排除標(biāo)準(zhǔn)：①排除Ⅱ型子宮內(nèi)膜癌患者；②排除其他惡性腫瘤患者；③排除1、2型糖尿病患者；④排除年齡超過70歲的患者。選取同期月經(jīng)正常、因其他因素在我院檢查的健康女性45例作為對(duì)照，年齡(48.79±12.73)歲。本研究經(jīng)我院道德倫理委員會(huì)批準(zhǔn)通過。所有患者均知悉全部研究?jī)?nèi)容，并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 臨床參數(shù)檢測(cè) 基本參數(shù)：分別測(cè)量各受試者身高、體重、臀圍、腰圍等并做好記錄，計(jì)算腰臀比(Waist-hip ratio，WHR)和體重指數(shù)(Body mass index，BMI)，WHR=腰圍/臀圍；BMI=體重/身高2。

生化參數(shù)：采集受試者清晨空腹肘靜脈血(5 ml/例)，采用DI-806全自動(dòng)生化分析儀(江西英諾華醫(yī)療公司)檢測(cè)三酰甘油(Triglycerides，TG)、總膽固醇(Total cholesterol，TC)、高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)水平及空腹血糖(Fasting blood-glucose，F(xiàn)BG)、空腹胰島素(Fasting insulin，F(xiàn)INS)水平。根據(jù)HOMA-IR=FINS×FBG/22.5，計(jì)算各受試者胰島素抵抗指數(shù)(Homeostasis model of assessment for insulin resistance index，HOMA-IR)。

1.2.2 ELISA法檢測(cè)血清SREBP1水平 主要試劑：ELISA SREBP1試劑盒(武漢華美生物公司)。采用酶聯(lián)免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測(cè)各受試者血清中SREBP1蛋白含量，嚴(yán)格按照ELISA試劑盒說明書進(jìn)行操作。

2 結(jié)果

2.1 不同婦女血清中SREBP1含量比較 Ⅰ型EC組、PCOS組、對(duì)照組血清中SREBP1含量分別為(467.59±59.77)、(384.75±36.91)、(211.38±30.39) pg/ml，三組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=392.854，P<0.05)。Ⅰ型EC組血清SREBP1含量高于PCOS組和對(duì)照組(P<0.05)；PCOS組血清SREBP1含量高于對(duì)照組(P<0.05)。

2.2 受試者基本資料比較 對(duì)照組、PCOS組、Ⅰ型EC組WHR、MBI均逐漸升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。PCOS組患者年齡小于Ⅰ型EC組和對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；Ⅰ型EC組與對(duì)照組年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，見表1。

表1 受試者基本資料比較

注：*與對(duì)照組比較，P<0.05；#與PCOS組比較，P<0.05

2.3 三組受試者脂代謝指標(biāo)比較 與對(duì)照組比較，PCOS組和Ⅰ型EC組的TG、TC、LDL-C、HOMA-IR水平升高，HDL-C水平降低，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與PCOS組比較，Ⅰ型EC組TG、TC、LDL-C、HOMA-IR水平升高，HDL-C水平降低(P<0.05)。見表2。

2.4 血清SREBP1含量與Ⅰ型EC、PCOS患者代謝參數(shù)的相關(guān)性分析 Spearman檢驗(yàn)結(jié)果表明，血清SREBP1含量與PCOS患者BMI(r=0.549)、WHR(r=0.517)、TG(r=0.731)、LDL-C(r=0.573)、HOMA-IR(r=0.624)水平呈正相關(guān)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與TC、Apo A、Apo B、HDL-C水平無明顯相關(guān)性，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。血清SREBP1含量與Ⅰ型EC患者BMI (r=0.581)、WHR (r=0.607)、TG (r=0.683)、HOMA-IR (r=0.597)水平呈正相關(guān)，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與TC、Apo A、Apo B、HDL-C、LDL-C水平無明顯相關(guān)性(P>0.05)。見表3。

2.5 影響PCOS患者發(fā)病的危險(xiǎn)因素分析 Logistic多因素回歸分析表明，在調(diào)整年齡、BMI、WHR、脂代謝參數(shù)、胰島素抵抗等因素后，血清SREBP1、HOMA-IR是影響患者PCOS患者發(fā)病的危險(xiǎn)因素(OR=1.327，95%CI1.025～1.718，P<0.05；OR=1.307，95%CI1.011～1.670，P<0.05)。見表4。

2.6 影響Ⅰ型EC患者發(fā)病的危險(xiǎn)因素分析 Logistic多因素回歸分析表明，在調(diào)整年齡、BMI、WHR、脂代謝參數(shù)、胰島素抵抗等因素后，血清SREBP1是影響 Ⅰ 型EC患者發(fā)病的危險(xiǎn)因素(OR=2.723，95%CI1.017～7.219，P<0.05)。見表5。

3 討論

PCOS是一種病因復(fù)雜、臨床表現(xiàn)多樣的內(nèi)分泌代謝紊亂疾病[6]，在我國(guó)育齡婦女中的發(fā)生率為5%～10%[7]。EC是發(fā)生于女性生殖器最常見的婦科惡性腫瘤之一，近年來，其發(fā)病呈年輕化趨勢(shì)[8]。隨著PCOS疾病的發(fā)展，患者易發(fā)生Ⅰ型EC等疾病，嚴(yán)重威脅女性生命健康。

SREBP是哺乳動(dòng)物細(xì)胞中一類固醇調(diào)節(jié)元件結(jié)合蛋白，存在SREBP1a、SREBP1c和SREBP2 3種形式，其表達(dá)受到細(xì)胞中胰島素和固醇水平調(diào)控，參與調(diào)節(jié)組織細(xì)胞中脂肪的合成，SREBP1主要參與調(diào)節(jié)脂肪酸合成和代謝[9]，而SREBP2主要參與膽固醇調(diào)節(jié)[10]。Guo等[11]發(fā)現(xiàn)，SREBP1不僅參與調(diào)解癌癥發(fā)生過程中的脂質(zhì)合成，還可激活磷脂酰肌醇-4、5-雙磷酸鹽3-激酶(PI3K)通路，協(xié)同促進(jìn)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤等腫瘤細(xì)胞的增殖和生長(zhǎng)。Lin等[12]發(fā)現(xiàn)，與正常子宮內(nèi)膜比較，EC患者子宮內(nèi)膜組織中SIRT1和SREBP1表達(dá)上調(diào)，可通過促進(jìn)腫瘤細(xì)胞脂質(zhì)合成促進(jìn)子宮內(nèi)膜腫瘤生長(zhǎng)。本研究結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，PCOS組、EC組患者血清中SREBP1含量明顯增加，與Lin等[12]在EC患者中的結(jié)論一致。推測(cè)血清SREBP1表達(dá)異?？赡苁菍?dǎo)致PCOS、EC發(fā)病的原因之一。

脂肪呈男性化分布即中心性肥胖，是脂代謝異常的一個(gè)重要標(biāo)志。Moran等[13]發(fā)現(xiàn)，PCOS患者往往存在脂肪代謝異常，表現(xiàn)為肥胖，發(fā)生胰島素抵抗和心血管疾病的風(fēng)險(xiǎn)較高[14]。Papalou等[15]發(fā)現(xiàn)，PCOS的發(fā)生與患者BMI呈正相關(guān)。本研究顯示，PCOS組WHR、MBI高于對(duì)照組，且WHR、MBI是影響PCOS發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的危險(xiǎn)因素。表明PCOS患者體型多呈中心性肥胖。血脂異常是代謝紊亂的另一重要表現(xiàn)。易丹妮等[16]發(fā)現(xiàn)，PCOS患者往往存在脂肪代謝異常，并發(fā)現(xiàn)與肥胖、高胰島素血癥及胰島素抵抗有一定關(guān)系。本研究發(fā)現(xiàn)，PCOS患者的TG、TC、LDL-C水平均顯著升高，且TG、LDL-C、HOMA-IR與血清SREBP1含量呈正相關(guān)，與易丹妮等[16]結(jié)論一致。結(jié)果表明，PCOS患者存在血脂代謝紊亂，與SREBP1異常表達(dá)有關(guān)。胰島素抵抗在女性中很常見，尤其是在超重和肥胖的人群中，是一種PCOS常見并發(fā)癥。洪宇等[17]也發(fā)現(xiàn)，PCOS患者血脂異常發(fā)生率為24.7%，其中合并IR組的TG、TC、LDL、HDL均顯著高于非IR組。本研究顯示，PCOS患者HOMA-IR水平均高于2.69，判斷為胰島素抵抗。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，PCOS患者HOMA-IR水平與血清SREBP1含量呈正相關(guān)，推測(cè)血清SREBP1表達(dá)上調(diào)可能導(dǎo)致PCOS患者脂肪代謝紊亂，加劇胰島素抵抗的發(fā)生。

表2 三組受試者脂代謝指標(biāo)比較

注：*與對(duì)照組比較，P<0.05；#與PCOS組比較，P<0.05

表3 SREBP1含量與代謝指標(biāo)的相關(guān)性分析

表4 SREBP1表達(dá)與PCOS發(fā)生的關(guān)系

表5 SREBP1表達(dá)與Ⅰ型EC發(fā)生的關(guān)系

高血壓、糖尿病、肥胖等是導(dǎo)致Ⅰ型子宮內(nèi)膜癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素，增加子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病率[18]。Shaw等[19]發(fā)現(xiàn)，肥胖女性(30 kg/m235 kg/m2)則比正常體重女性增加4.7倍；尤其是中央脂肪的增加與子宮內(nèi)膜癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)和子宮內(nèi)膜癌特異性死亡率密切相關(guān)。Mahdi等[20]發(fā)現(xiàn)，患有子宮內(nèi)膜癌的嚴(yán)重肥胖患者發(fā)生手術(shù)并發(fā)癥和感染性并發(fā)癥的比例顯著高于正常體重患者。本研究顯示，EC患者的WHR、MBI與血清SREBP1含量呈正相關(guān)，均明顯高于對(duì)照組女性，表現(xiàn)為中心性肥胖，且WHR、MBI是影響EC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的危險(xiǎn)因素，表明肥胖可能是導(dǎo)致EC發(fā)生的因素之一。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，EC患者的TG、TC、LDL-C、HOMA-IR水平均顯著高于對(duì)照組，且EC患者的TG、HOMA-IR與血清SREBP1含量呈正相關(guān)。表明EC患者存在血脂代謝紊亂和胰島素抵抗，且可能與SREBP1表達(dá)異常有關(guān)。

研究表明，SREBP1與脂代謝紊亂、宮頸癌、卵巢上皮性癌等疾病的發(fā)生、發(fā)展相關(guān)。張占薪等[21]研究表明，SREBP1在宮頸癌組織中表達(dá)上調(diào)，其表達(dá)與宮頸癌臨床分期和病理分級(jí)有關(guān)，提示SREBP1參與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展。聶龍?jiān)频萚22]研究顯示，卵巢上皮性癌組織中SREBP1的陽性表達(dá)率明顯高于卵巢良性腫瘤，SREBP1陽性表達(dá)率與卵巢上皮性癌患者組織學(xué)分級(jí)和FIGO分期有關(guān)，是影響患者預(yù)后的因素之一，推測(cè)SREBP1與卵巢上皮性癌的發(fā)生、發(fā)展及預(yù)后有關(guān)。李衛(wèi)華等[23]發(fā)現(xiàn)，SREBP1在子宮內(nèi)膜癌組織中高表達(dá)，其表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌組織分化情況相關(guān)，SREBP1 shRNA可顯著抑制子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞的增殖及侵襲，推測(cè)內(nèi)源性SREBP1參與子宮內(nèi)膜癌的進(jìn)展與轉(zhuǎn)移。本研究結(jié)果表明，血清SREBP1、BMI、WHR、TG、HOMA-IR是影響PCOS患者和EC患者發(fā)病的危險(xiǎn)因素，進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，只有SREBP1是影響患者PCOS和EC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的危險(xiǎn)因素。Gottschau等[24]對(duì)12 070例曾被診斷為PCOS的患者進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)279例PCOS女性被確診為EC，發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)增加近4倍。據(jù)此推測(cè)，血清SREBP1異常可能是影響PCOS女性發(fā)生EC風(fēng)險(xiǎn)的原因之一，但影響EC發(fā)生的因素較多，該部分研究較少，仍需大量研究進(jìn)行證實(shí)，本課題組將于后期進(jìn)行相關(guān)研究。

綜上所述，SREBP1在PCOS患者和EC患者血清中含量增加，與PCOS患者WHR、BMI、TG、LDL-C、HOMA-IR水平呈正相關(guān)，與EC患者WHR、BMI、TG、HOMA-IR水平呈正相關(guān)，是影響PCOS和EC發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)的危險(xiǎn)因素。推測(cè)SREBP1可作為預(yù)測(cè)PCOS疾病和EC疾病發(fā)生的有效生物指標(biāo)。

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