子宮腺肌病EM I處MMP-7和E-Cadherin的表達(dá)及意義

廖瑜， 陳宇毅， 張哲珺， 徐建平

（暨南大學(xué) 附屬第一醫(yī)院1.病理科；2.婦產(chǎn)科，廣東廣州510630）

子宮腺肌?。╝denomyosis，ADS）是在子宮肌層中出現(xiàn)島嶼狀異位的子宮內(nèi)膜腺體及間質(zhì)并伴有周?chē)蛹?xì)胞的肥大與增生，常導(dǎo)致進(jìn)行性痛經(jīng)、慢性盆腔疼痛以及不孕、月經(jīng)過(guò)多等臨床表現(xiàn)，至今仍沒(méi)有很好的確診檢測(cè)方法，經(jīng)陰道超聲是術(shù)前最主要的檢查手段［1］.研究顯示，子宮內(nèi)膜—肌層連接處（the junctional zone，JZ）作為子宮內(nèi)膜與肌層之間的屏障，其結(jié)構(gòu)異?；蚍肿訉W(xué)改變所致的子宮肌層收縮功能障礙與ADS的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)［2-3］，而雌激素在調(diào)控其收縮的頻率、強(qiáng)度和方向中發(fā)揮重要作用［4］，表明子宮腺肌病與內(nèi)異癥相同，也屬于性激素依賴性疾病.但更多的研究卻發(fā)現(xiàn)它們常常各自獨(dú)立發(fā)生.組織學(xué)方面，在多數(shù)病例中，腺肌病是由子宮內(nèi)膜的非功能層（基底）組成，與子宮內(nèi)膜-肌層界面（endometrial-myometrial inferface，EMI）處的關(guān)系異常密切，而子宮內(nèi)膜異位癥是由子宮內(nèi)膜功能層組成的，故兩者發(fā)病機(jī)制存在差異.子宮內(nèi)膜向肌層深處侵襲和生長(zhǎng)與惡性腫瘤細(xì)胞的行為類(lèi)似，故本實(shí)驗(yàn)選取具有降解細(xì)胞外基質(zhì)的基質(zhì)金屬蛋白酶和細(xì)胞黏附能力緊密相關(guān)的鈣黏蛋白，研究子宮腺肌病病灶和內(nèi)膜-肌層交界處MMP-7及E-cadherin的表達(dá)情況，探討子宮腺肌病發(fā)病的可能原因及機(jī)制.

1 資料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象

選取2010年3月至2011年10月在暨南大學(xué)附屬第一醫(yī)院婦科因子宮腺肌病行全子宮切除或次全子宮切除的子宮標(biāo)本共40例作為研究組.入選患者年齡為43～53歲，平均年齡（44.33±6.30）歲.選取同期因子宮良性病變（子宮肌瘤）行全子宮切除或次全子宮切除的子宮標(biāo)本30例作為對(duì)照組.入選患者年齡為45～59歲，平均年齡為（48.10±6.05）歲.各組年齡經(jīng) Levene法方差齊性檢驗(yàn)，無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具有可比性（P＝0.76）.

全部研究對(duì)象的臨床及病理資料完整，均無(wú)內(nèi)分泌、免疫及代謝性疾病，術(shù)前6個(gè)月內(nèi)未均使用過(guò)甾體類(lèi)激素及免疫藥物治療，無(wú)高血壓、糖尿病、腎病等慢性內(nèi)科病史.

1.2 方法

1.2.1 樣品制備

取子宮切除的標(biāo)本，沿子宮前壁縱形切開(kāi)子宮肌層至子宮體腔內(nèi)，各切取子宮肌層內(nèi)膜異位病灶及在位子宮內(nèi)膜界面處1.5×1.5 cm2大?。?biāo)本包括子宮肌層與在位子宮內(nèi)膜）.對(duì)照組在子宮切除后以同樣方法在距離子宮肌瘤2 cm以外的部位切取正常子宮肌層內(nèi)膜界面處1.0×1.0 cm2大?。òㄕＷ訉m肌層及正常子宮內(nèi)膜）.每例標(biāo)本獲取后隨即放入體積分?jǐn)?shù)為10%的甲醛溶液中固定，固定后的研究標(biāo)本切為0.5×0.5×0.5 cm3的組織塊，放入酒精 -甲醛液（體積分?jǐn)?shù)為10%甲醛+體積分?jǐn)?shù)為95%乙醇）中固定，再放入體積分?jǐn)?shù)為95%的酒精中過(guò)夜，之后浸蠟包埋制成石蠟塊備用，每份標(biāo)本制備4μm厚的切片10張，60℃烘烤備用.

1.2.2 免疫組化染色

采用購(gòu)自中杉金橋公司的鼠抗人MMP-7單克隆抗體及鼠抗人E-cadherin單克隆抗體，采用鏈霉菌抗生物素蛋白-過(guò)氧化物酶連接（SP）法，在同一時(shí)間、同一條件下進(jìn)行檢測(cè).

1.2.3 結(jié)果判定

MMP-7的陽(yáng)性表達(dá)呈棕黃色顆粒，定位于細(xì)胞漿，染色程度從淺黃色到深黃色不等，在肌細(xì)胞中幾乎無(wú)表達(dá)；E-cadherin為細(xì)胞膜或細(xì)胞漿表達(dá)，呈現(xiàn)棕黃色顆粒，主要表達(dá)在腺體上皮細(xì)胞的胞膜上，在肌細(xì)胞中無(wú)表達(dá).

1.2.4 圖像分析

本研究應(yīng)用Leica QW550圖像分析系統(tǒng)，采用陽(yáng)性單位（positive unit，PU）的概念來(lái)定量表達(dá)免疫組化陽(yáng)性反應(yīng)的程度［5］.陽(yáng)性單位（PU）的計(jì)算公式：PU＝［（Gα-Gβ）/Gmax］×100，Gα、Gβ分別為待測(cè)區(qū)域和背景的平均灰度，Gmax等于256，為檢測(cè)儀的最大灰度.每張切片隨機(jī)選取16個(gè)視野作為測(cè)試點(diǎn)，測(cè)試兩組病灶和內(nèi)膜-肌層交界處腺上皮胞漿和胞膜的PU值.每個(gè)腺腔分別在其橫軸、縱軸、對(duì)角軸交點(diǎn)處選取陽(yáng)性測(cè)定位置的灰度值（記為Gα），在其臨近空白部位作為背景取灰度值（記為Gβ），利用上述公式計(jì)算出MMP-7在研究組及對(duì)照組的PU值，以及E-cadherin在研究組及對(duì)照組的PU值.

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用IBM SPSSStatistics 23.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，分別采用配對(duì)資料的t檢驗(yàn)、方差分析、χ2檢驗(yàn)，計(jì)量資料以（±s）表示，P＜0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異.

2 結(jié)果

2.1 MMP-7免疫組化結(jié)果

MMP-7陽(yáng)性表達(dá)于細(xì)胞漿，呈棕黃色顆粒，在子宮腺肌病病灶組織和界面大部分異位內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞胞漿中表達(dá)，在肌細(xì)胞中幾乎無(wú)表達(dá)，在EMI界面一側(cè)的在位內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞胞漿中表達(dá)MMP-7，其增生期和分泌期的PU值無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P＝0.402），腺肌病組病灶較在位內(nèi)膜的表達(dá)增生期及分泌期均升高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P＝0.000，P＝0.003）.對(duì)照組的子宮內(nèi)膜中，MMP-7表達(dá)在界面少部分內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞胞漿中，界面一側(cè)的子宮肌層內(nèi)未見(jiàn)有明顯的MMP-7的表達(dá)，分泌期的表達(dá)較增生期升高，PU值有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＝0.000）.對(duì)照組增生期子宮內(nèi)膜至子宮腺肌病組中的病灶（圖1、圖2、表1），MMP-7表達(dá)在上升，子宮腺肌病組PU值較高，其中以子宮腺肌病組病灶處的表達(dá)最高.

圖2 MMP-7在子宮內(nèi)膜-肌層交界處的表達(dá)（×200）Fig.2 MMP-7 expression in the EMIof uterine（×200）

表1 MMP-7在對(duì)照組及子宮腺肌病組的表達(dá)比較Table 1 The expression of MM P-7 in uterine adenomyosis and uterinemyoma

2.2 E-cadherin免疫組化結(jié)果

E-cadherin表達(dá)在內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞胞膜，胞漿及間質(zhì)少許著色，而在肌細(xì)胞中不表達(dá).在此次試驗(yàn)中，對(duì)照組界面的內(nèi)膜E-cadherin表達(dá)比子宮腺肌病組高，PU值有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P＝0.000）.在對(duì)照組中分泌期較增生期E-cadherin表達(dá)高，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P＝0.000），在子宮腺肌病組中界面一側(cè)在位內(nèi)膜增生期、分泌期及病灶的E-cadherin表達(dá)無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差別（P＝0.832，圖3、圖4，表2）.

圖3 E-cadherin在子宮內(nèi)膜-肌層交界處的表達(dá)（×40）Fig.3 E-cadherin expression in the EMI of the uterine（×40）

圖4 E-cadherin在子宮內(nèi)膜-肌層交界處的表達(dá)（×200）Fig.4 E-cadherin expression in the EMI of the uterine（×200）

表2 E-cadherin在對(duì)照組及子宮腺肌病組的表達(dá)情況Table 2 The expression of E-cadherin in uterine adenomyosis and uterinemyoma

3 討論

ADS是指子宮內(nèi)膜細(xì)胞向子宮肌層良性浸潤(rùn)并彌漫性生長(zhǎng)，產(chǎn)生相應(yīng)的臨床癥狀.子宮內(nèi)膜與肌層的交界面在腺肌病的發(fā)生中起著重要的作用.子宮內(nèi)膜與肌層的交界面與身體其他部位的黏膜肌層交界面不同，缺乏黏膜下層，內(nèi)膜直接位于肌層表面.由于缺乏黏膜下層的保護(hù)作用，使子宮內(nèi)膜細(xì)胞較易侵入子宮肌層.EMI的結(jié)構(gòu)及功能損傷與子宮腺肌病的發(fā)生相關(guān).動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)，子宮腺肌病形成的最初改變是EMI肌層纖維卷曲，細(xì)胞體積縮小為原來(lái)的1/3，細(xì)胞間隙膨脹［6-7］.在這病理改變的基礎(chǔ)上，增加雌激素水平使子宮內(nèi)膜腺體與間質(zhì)細(xì)胞增生活躍，子宮內(nèi)膜細(xì)胞出現(xiàn)反向生長(zhǎng)，通過(guò)EMI侵入子宮肌層，繼而發(fā)生子宮腺肌病.子宮內(nèi)膜細(xì)胞侵入子宮肌層后必須經(jīng)過(guò)黏附、侵襲、種植及新生血管形成等過(guò)程，每一個(gè)過(guò)程必須有多種細(xì)胞因子的參與方能完成.子宮內(nèi)膜細(xì)胞侵入異位部位，在各種細(xì)胞因子的作用下發(fā)生種植、黏附、侵襲.

基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）是一組調(diào)控細(xì)胞外基質(zhì)降解和重建的蛋白水解酶，基質(zhì)蛋白酶-7（MMP-7）屬基質(zhì)溶解素家族的重要一員，MMP-7主要降解蛋白聚糖、纖維連接蛋白、層粘連蛋白、彈性蛋白以及膠原IV等［8］，并通過(guò)水解細(xì)胞外基質(zhì)，以及提高細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力，參與多種惡性腫瘤的浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過(guò)程［9］.MMP-7既能有效降解基底膜成分，又對(duì)血管壁和淋巴管壁的主要成分彈性蛋白具有較強(qiáng)的分解特性.高表達(dá)MMP-7的腫瘤細(xì)胞更易突破血管壁及淋巴管壁，促使腫瘤細(xì)胞轉(zhuǎn)移的發(fā)生，Acar等［10］通過(guò)ELISA法檢測(cè)顯示，MMP-7的確可以作為卵巢癌惡性程度的一個(gè)重要的血清學(xué)標(biāo)志物.Sillanpaa等［11］通過(guò)檢測(cè)284例原發(fā)性卵巢癌的腫瘤組織及隨訪這些患者的預(yù)后表明，MMP-7在腫瘤細(xì)胞中的高表達(dá)是卵巢癌的一個(gè)獨(dú)立預(yù)后預(yù)測(cè)因子.

本研究結(jié)果顯示，從對(duì)照組增生期內(nèi)膜至子宮腺肌病組病灶，MMP-7表達(dá)在逐漸上升，子宮腺肌病組PU值較高，其中以子宮腺肌病組病灶處的表達(dá)最高，其次為EMI處子宮內(nèi)膜腺體，說(shuō)明腺肌病異位的內(nèi)膜主要來(lái)自于基底層內(nèi)膜，與以經(jīng)血逆流為主要機(jī)制的功能層子宮內(nèi)膜異位癥不同.正常情況下，由于子宮內(nèi)膜缺乏黏膜下層，因此阻擋子宮內(nèi)膜細(xì)胞向肌層侵入的屏障作用較弱.而子宮肌層由含有細(xì)胞外基質(zhì)成分的平滑肌束組成，是阻止子宮內(nèi)膜細(xì)胞向深層次肌層侵入的主要屏障［12］.MMP-7的表達(dá)增高，使子宮肌層的細(xì)胞外基質(zhì)降解，屏障作用減弱，子宮內(nèi)膜細(xì)胞則容易侵入子宮肌層生長(zhǎng)并形成異位病灶，并且在分泌期表達(dá)升高，提示內(nèi)膜細(xì)胞侵蝕力在分泌期升高，更容易在月經(jīng)期因經(jīng)血逆流種植至盆腔形成子宮內(nèi)膜異位病灶.在子宮腺肌病組中MMP-7表達(dá)較同周期的對(duì)照組的表達(dá)高，但增生期與分泌期表達(dá)無(wú)差異，并未觀察到分泌期升高的現(xiàn)象，可能是因?yàn)樵谧訉m腺肌病組中的內(nèi)膜細(xì)胞MMP-7表達(dá)升高并失去了周期性調(diào)控，導(dǎo)致侵襲能力升高并長(zhǎng)期持續(xù)于高水平，子宮內(nèi)膜細(xì)胞更容易侵入子宮肌層形成子宮腺肌病.

鈣黏附蛋白（E-cadherin）屬黏附分子家族，在細(xì)胞與細(xì)胞黏附中，E-cadherin以同種分子間“拉鏈”式結(jié)合的形式介導(dǎo)細(xì)胞黏附，主要分布在細(xì)胞周邊尤其是細(xì)胞與細(xì)胞的連接處，在鈣離子的存在下，同型分子作為配體或受體，自我相互結(jié)合，在臨近細(xì)胞間建立分子連接，從而維持上皮組織正常的形態(tài)以及細(xì)胞的極性.E-cadherin的主要生理學(xué)功能是介導(dǎo)細(xì)胞間的黏附，其黏附作用具有親同源性，即表達(dá)同源性鈣黏附素的細(xì)胞將發(fā)生黏附.在病理情況下，E-cadherin活性的減弱，可導(dǎo)致子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞黏附能力下降［13］，從而使細(xì)胞侵蝕力增強(qiáng)，導(dǎo)致發(fā)病.在大多數(shù)惡性腫瘤中，如結(jié)腸癌、乳腺癌、肝癌、胃癌、前列腺癌、食管癌、皮膚癌、腎癌都存在E-cadherin介導(dǎo)的細(xì)胞黏附功能的削弱或喪失［14］.

子宮腺肌病其根本的病理表現(xiàn)是子宮內(nèi)膜組織侵襲到子宮肌層中，一方面子宮內(nèi)膜細(xì)胞必須解除黏附從原發(fā)灶脫離，另一方面，又需要黏附到異位部位才能形成轉(zhuǎn)移灶，在此過(guò)程中，由E-cadherin介導(dǎo)的細(xì)胞黏附系統(tǒng)對(duì)于維持細(xì)胞間的黏附很重要，E-cadherin的表達(dá)下降或者受到其他因素?fù)p害E-cadherin的黏附功能時(shí)，子宮內(nèi)膜細(xì)胞就易于脫離原發(fā)灶，開(kāi)始向周?chē)M織侵入，并為“轉(zhuǎn)移”提供了必要的條件.

本研究結(jié)果顯示，在子宮腺肌病內(nèi)膜中E-cadherin呈現(xiàn)陽(yáng)性表達(dá)，其中增生期、分泌期內(nèi)膜及病灶部位均有表達(dá)，3者之間無(wú)明顯的差異.在對(duì)照組中觀察到內(nèi)膜的E-cadherin在分泌期升高，可能為保護(hù)因素，降低內(nèi)膜細(xì)胞脫離內(nèi)膜層的機(jī)會(huì)，其同樣存在周期性，在子宮腺肌病組中周期性消失并且表達(dá)持續(xù)降低，推測(cè)E-cadherin表達(dá)的下調(diào)，直接導(dǎo)致細(xì)胞黏附能力下降，從而使細(xì)胞解聚，使子宮內(nèi)膜細(xì)胞之間以及子宮內(nèi)膜細(xì)胞與基質(zhì)之間的黏附作用降低，從而變得易從在位部位解離.子宮內(nèi)膜細(xì)胞更容易侵入，從而種植在肌層中，有利于內(nèi)異癥患者子宮內(nèi)膜上皮細(xì)胞的移動(dòng)、侵襲和種植.

子宮腺肌病的發(fā)病是一個(gè)多因素、多環(huán)節(jié)的過(guò)程，在子宮腺肌病發(fā)生、發(fā)展的各個(gè)階段，可能有多個(gè)功能不同的細(xì)胞因子各自發(fā)揮不同的作用，在時(shí)間和空間上相互配合，協(xié)同促進(jìn)了子宮內(nèi)膜細(xì)胞的“轉(zhuǎn)移”，而“轉(zhuǎn)移”在EMI的變化尤為關(guān)鍵.由于MMP-7表達(dá)的增高，使子宮肌層細(xì)胞外基質(zhì)降解，屏障作用減弱，同時(shí)E-cadherin表達(dá)下降，使間質(zhì)細(xì)胞表型激活，促進(jìn)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（epithelial-mesenchymal transition，EMT）過(guò)程，子宮內(nèi)膜細(xì)胞更容易脫落繼而侵入肌層及生長(zhǎng)，在伴有新生血管形成的同時(shí)逐漸形成內(nèi)膜異位病灶.有研究表明，在體外培養(yǎng)的腫瘤細(xì)胞中加入MMP-7后，培養(yǎng)基中出現(xiàn)一種80 ku的E-cadherin可溶性片段（sE-cadherin），并且腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)能力明顯加強(qiáng)，說(shuō)明MMP-7可使E-cadherin降解并促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的浸潤(rùn)［15］.在用博來(lái)霉素治療后的野生型小鼠支氣管肺泡灌洗液中，脫落的E-cadherin可以被檢測(cè)到，同等條件下的MMP-7基因敲除小鼠的肺中E-cadherin卻不能被檢測(cè)到［16］.因此MMP-7不僅能降解細(xì)胞外基質(zhì)，還能通過(guò)降解E-cadherin的途徑來(lái)減少細(xì)胞-細(xì)胞間的黏附作用，降低細(xì)胞接觸抑制的功能，從而加大細(xì)胞的擴(kuò)散，在子宮腺肌病中子宮肌層局部MMP-7表達(dá)的逐漸升高并降解E-cadherin，使其作用減弱，導(dǎo)致異位的內(nèi)膜細(xì)胞較容易脫落并向子宮肌層深部侵襲，使病情進(jìn)一步加重，而在臨床上則表現(xiàn)出子宮的不斷增大，痛經(jīng)進(jìn)行性加重.

綜上，子宮腺肌病組中的在位內(nèi)膜、病灶的MMP-7的陽(yáng)性表達(dá)上調(diào)及E-cadherin的陽(yáng)性表達(dá)下調(diào)，提示子宮腺肌病的發(fā)生發(fā)展與MMP-7和E-cadherin的改變相關(guān)，并且兩者有協(xié)同作用，在今后的治療方面可能可以通過(guò)分子調(diào)控這兩個(gè)因子來(lái)治療子宮腺肌病的發(fā)病和發(fā)展.

［1］AHMADI F，HAGHIGHIH.Three-dimensional ultrasound manifestations of adenomyosis［J］.Iranian Journal of Reproductive Medicine，2013，11（10）：847-848.

［2］BENAGIANO G，BROSENS I，HABIBA M.Structural and molecular features of the endomyometrium in endometriosis and adenomyosis［J］.Human Reproduction Update，2014，20（3）：386-402.

［3］LEYENDECKER G， WILDT L， MALL G. The pathophysiology of endometriosis and adenomyosis：tissue injury and repair［J］.Archives of Gynecology and Obstetrics，2009，280（4）：529-538.

［4］王麗平，汪沙，張穎，等.雌二醇對(duì)子宮腺肌病患者子宮內(nèi)膜-肌層交界區(qū)平滑肌細(xì)胞游離Ca2+調(diào)節(jié)模式的初步研究［J］.中華婦產(chǎn)科雜志，2012，47（5）：351-354.WANG L P，WANG S，ZHANG Y，et al.Preliminary study of estrogen effect on calcium free smooth muscle cells at the endometrial——myometrial inferface in uteri with adenomyosis［J］.Chin J Obstet Gynecol，2012，47（5）：351-354.

［5］SHEN H.Immunohistochemical positive unit quantitative theory，method and parsing of application［J］.The proceedings of the 9th national conference on pathological，2007，（4）：95-96.

［6］KAWAHARA R，MATSUDA M，MORIT.Increase in the number of integrinbeta1-immunoreactive monocyte-lineage cells in experimentally-induced adenomyosis in mice［J］.Life Sci，2003，73（7）：907-916.

［7］SCHAUSER K H，NIELSEN A H，WINTHER H，et al.Dominance of type 1 angiotensin II receptor in the nonpregnant and pregnant bovine uterus［J］.Reprod Fertil，1999，116（2）：403-413.

［8］HENRIET P，CORNET P B，LEMOINE P，et al.Circulating ovarian steroids and endometrial matrix metalloproteinases（MMPs）［J］.Ann NYA Cad Sci，2002，955（1）：119-138.

［9］VARRO A，KENNY S，HEMERS E，et al.Increased gastric expression of MMP-7 in hypergastrinemia and significance for epithelial-mesenchymal signaling［J］.Am J Phisiol Gastro In Test Liver Physio，2007，292（4）：1133-1140.

［10］ACAR A，ONAN A，COSKUN U，et al. Clinical significance of serum MMP-2 and MMP-7 in patients with ovarian cancer［J］.Med Oncol，2008，25（3）：279-283.

［11］SILLANPAA SM，ANTTILA M A，VOUTILAINEN K A，et al.Prognostic significance of matrixmet all oproteinase-7 in epithelial ovarian cancer and its relation to beta-catenin expression［J］.Int J Cancer，2006，119（8）：1792-1799.

［12］BISCHOF P，CAMPANA A.Trophoblast differentiation and invasion：its significance for human embryo implantation［J］.Early Pregnancy，1997，3（2）：81-95.

［13］LU M H，F(xiàn)AN M F，YU X D.NSD2 promotes osteosarcoma cell proliferation and metastasis by inhibiting E-cadherin expression［J］.Eur Rev Med Pharmacol Sci，2017，21（5）：928-936.

［14］NAORA H，MONTELL D J.Ovarian cancer metastasis：integrating insights from disparate model organisms［J］.Nat Rev Cancer，2005，5（5）：355-366.

［15］NOE V，F(xiàn)INGLETON B，JACOBSK，et al.Release of an invasion promoter E-cadherin fragment by matrilysin and stromelysin-1［J］.JCell Sci，2001，114（1）：111-118.

［16］LYNCH C C，MCDONNELL S.The role of matrilysin（MMP-7）in leukaemia cell invasion［J］.Clin Exp Metastasis，2000，18（5）：401-406.