中性粒細(xì)胞表面CD64對(duì)呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的診斷價(jià)值分析

鄭 慧

(徐州醫(yī)科大學(xué)附屬連云港醫(yī)院，江蘇 連云港 222002)

機(jī)械通氣廣泛用于重癥監(jiān)護(hù)病房的危重患者，由此引發(fā)的呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎(ventilator-associated pneumonia，VAP)是機(jī)械通氣的常見(jiàn)并發(fā)癥，且病死率較高。患者一旦發(fā)生VAP則易造成脫機(jī)困難，延長(zhǎng)ICU留治時(shí)間，增加住院費(fèi)用和抗菌藥物使用，并導(dǎo)致重癥患者病死率增加，嚴(yán)重威脅重癥患者的預(yù)后[1]。如何做到早期診斷、有效治療VAP已成為重癥醫(yī)學(xué)領(lǐng)域倍受關(guān)注的問(wèn)題之一，因此，尋找敏感、特異的感染相關(guān)性生物指標(biāo)以早期快速診斷呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎具有十分重要的臨床價(jià)值和現(xiàn)實(shí)意義。CD64表達(dá)增加是中性粒細(xì)胞(neutrophils,PMN)活化的標(biāo)志之一，且其表達(dá)水平不受白細(xì)胞總數(shù)和中性粒細(xì)胞百分比的影響。因此，中性粒細(xì)胞CD64很可能是一個(gè)具有良好應(yīng)用前景的生物指標(biāo)，有望在VAP的早期快速診斷、病情嚴(yán)重程度評(píng)估以及預(yù)后判斷等方面發(fā)揮重要的臨床價(jià)值，本文采用前瞻性研究分析了中性粒細(xì)胞CD64對(duì)呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的診斷價(jià)值。

1 對(duì)象與方法

1.1對(duì)象 選擇我院2015年8月至2018年1月綜合ICU行機(jī)械通氣時(shí)間均超過(guò)48 h的疑似VAP患者及確診VAP患者，疑似VAP患者納入標(biāo)準(zhǔn)：胸部X線影像可見(jiàn)新發(fā)生的或進(jìn)展性的浸潤(rùn)陰影，同時(shí)滿足下列至少2項(xiàng)：①體溫>38℃或<36℃，②外周血白細(xì)胞計(jì)數(shù)>10×109/L或<4×109/L，③氣管支氣管內(nèi)出現(xiàn)膿性痰；確診VAP的診斷標(biāo)準(zhǔn)：支氣管吸引物培養(yǎng)結(jié)果≥105 CFU/mL，血培養(yǎng)出可能的致病菌；排除年齡<18歲者，妊娠者，免疫缺陷或自身免疫疾病者，長(zhǎng)期激素治療者，進(jìn)入研究時(shí)已有明確的肺外感染者。其中男66例，女54例，年齡為(51.9±4.5)歲。本研究入選患者依據(jù)病原學(xué)標(biāo)本，分為疑似VAP組65例，確診VAP組55例，兩組患者的性別、年齡等資料對(duì)比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，本研究所有患者知情同意且符合醫(yī)學(xué)倫理。

1.2方法 所有患者均行機(jī)械通氣，給予補(bǔ)液、祛痰、營(yíng)養(yǎng)支持等治療，記錄入選患者每日體溫、吸痰量及性狀、生命體征、尿量、Glasgow評(píng)分，治療前后對(duì)患者行CPIS評(píng)分，以評(píng)價(jià)其肺部的感染程度。儀器和試劑：儀器為本院中心實(shí)驗(yàn)室BD FACSCanto II流式細(xì)胞儀。BD公司CD64配套試劑，包括BD QuantiBRITE PE Beads，批號(hào)：340495；QuantiBRITE CD64PE/CD45PerCP，批號(hào)：340768。由護(hù)士用EDTA-2K抗凝管采靜脈血2 mL混勻并立即送檢，用肝素行抗凝后行CRP、PCT及CD64檢測(cè)?；颊咧委?2 h、7 d再次取2 mL靜脈血行以上檢查。采用流式細(xì)胞儀分析測(cè)定PMN CD64指數(shù)。流式細(xì)胞儀分析，上機(jī)，校準(zhǔn)儀器，進(jìn)入BD公司配套CellQuest軟件，先檢測(cè)QuantiBRITE PE標(biāo)準(zhǔn)微球管，得到細(xì)胞熒光分子定量分析的標(biāo)準(zhǔn)曲線，用Cell Quest系統(tǒng)收集細(xì)胞及分析數(shù)據(jù)，得出細(xì)胞群A值，y=log10A，x=log10PE/cell，算出單個(gè)中性粒細(xì)胞平均結(jié)合的PE抗體分子數(shù)(PE/cell)。并與同型陰性作對(duì)照，檢測(cè)PMN CD64陽(yáng)性表達(dá)的細(xì)胞百分率(%)。每樣本分析10 000個(gè)細(xì)胞。

1.3觀察指標(biāo) (1)對(duì)比兩組的CRP、PCT、CD64指數(shù)；(2)對(duì)比確診VAP組治療前、治療后72 h、7 d時(shí)的CRP、PCT、CD64指數(shù)及CPIS評(píng)分；(3)分析確診VAP組CD64、PCT、CRP與CPIS評(píng)分的相關(guān)性。

2 結(jié)果

2.1對(duì)比兩組的CRP、PCT、CD64指數(shù) 疑似VAP組的CRP、PCT、CD64指數(shù)均低于確診VAP組(P<0.05)。

表1 對(duì)比兩組的CRP、PCT、CD64指數(shù)

2.2對(duì)比確診VAP組治療前、治療后72 h、7 d時(shí)的CRP、PCT、CD64指數(shù)及CPIS評(píng)分 治療后72 h、7 d，確診VAP組的CRP、PCT、CD64指數(shù)及CPIS評(píng)分均下降，且治療后7 d<治療后72 h<治療前，P<0.05。

表2 對(duì)比確診VAP組治療前、后的CRP、PCT、CD64指數(shù)及CPIS評(píng)分

2.3分析確診VAP組CD64、PCT、CRP與CPIS評(píng)分的相關(guān)性 外周血中的CD64、PCT、CRP分別與CPIS評(píng)分呈正相關(guān)，rCD64=0.879，P=0.021，rPCT=0.763，P=0.031，rCRP=0.743，P=0.036，其中CRP與CIPS評(píng)分的相關(guān)性最強(qiáng)。

3 討論

近年來(lái)臨床上常用的判斷感染的生物學(xué)指標(biāo)是血液檢測(cè)指標(biāo)中的CRP和PCT，但因CRP除在細(xì)菌感染外，創(chuàng)傷、手術(shù)、病毒感染、腫瘤浸潤(rùn)、急性排異反應(yīng)、心腦血管意外等均可引起CRP水平的升高，因此其對(duì)感染性疾病的診斷特異性較低，使得其診斷價(jià)值受到質(zhì)疑。而PCT是降鈣素的前體物質(zhì)，健康人血漿中PCT含量極低，在嚴(yán)重細(xì)菌感染時(shí)其在血漿中的濃度急劇升高，而在病毒感染或非感染性炎癥反應(yīng)，PCT濃度不升高或僅有輕度升高，在自身免疫、慢性炎癥、局部輕微的細(xì)菌感染時(shí)PCT濃度不升高，而PCT是細(xì)菌感染的生物學(xué)標(biāo)志，診斷準(zhǔn)確性好于CRP，但有研究發(fā)現(xiàn)其也僅有只中等診斷能力，同時(shí)其診斷呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的具體水平或采用單獨(dú)PCT診斷呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎價(jià)值是否確切，臨床上尚存在爭(zhēng)議[2]。CD64是分子量為72 KD的跨膜糖蛋白，屬免疫球蛋白超家族的成員，CD64在外周血主要分布于樹(shù)突細(xì)胞、單核巨噬細(xì)胞等抗原遞呈細(xì)胞表面，正常生理情況下，CD64在中性粒細(xì)胞表面呈低水平表達(dá)。但當(dāng)機(jī)體受到感染時(shí)，在細(xì)菌細(xì)胞壁脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)、γ-干擾素(interferon-γ,IFN-γ)、粒細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor，G-CSF)等炎癥因子的刺激下，CD64在中性粒細(xì)胞表面的表達(dá)迅速增加[3]。

本文分析了其對(duì)呼吸機(jī)相關(guān)性肺炎的診斷價(jià)值，疑似VAP組的CRP、PCT、CD64指數(shù)均低于確診VAP組，治療后72 h、7 d，確診VAP組的CRP、PCT、CD64指數(shù)及CPIS評(píng)分均下降，且治療后7 d<治療后72 h<治療前，外周血中的CD64、PCT、CRP分別與CPIS評(píng)分呈正相關(guān)，且CRP與CIPS評(píng)分的相關(guān)性最強(qiáng)。表明CD64可作為呼吸機(jī)肺炎的診斷指標(biāo)，其也可用于呼吸機(jī)肺炎預(yù)后的判斷指標(biāo)。

綜上所述，PMN CD64的表達(dá)可成為細(xì)菌感染患者指導(dǎo)其抗生素治療并判斷相關(guān)預(yù)后的一項(xiàng)指標(biāo)。