ProExc在HPV相關(guān)宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變中的表達(dá)及意義

閔建芳　楊安強(qiáng)

[摘要] 目的 檢測(cè)ProEXC在宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變（SIL）中的表達(dá)及高危型HPV DNA檢測(cè)，探討其在臨床病理診斷中的意義。 方法 方便選取2013年2月—2015年2月采用免疫組化的方法檢測(cè)100例宮頸低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）、200例宮頸高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）樣本中ProEXC的表達(dá)， 采用HC-2法檢測(cè)HPV DNA。結(jié)果 ProEXC陽(yáng)性染色定位于細(xì)胞核，HPV DNA 1.0 pg/mL為陽(yáng)性；其中在宮頸LSIL中陽(yáng)性率為41.0%、62.0%，在宮頸HSIL中的陽(yáng)性率為69.0%、78.5%，二者相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；在對(duì)照組中陽(yáng)性率為8.3%、10.0%，與宮頸LSIL組和宮頸HSIL組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）。 結(jié)論 宮頸HSIL中ProEXC的高表達(dá)，再結(jié)合高危型HPV檢測(cè)，可能作為輔助診斷宮頸SIL的指標(biāo)，并能有可能區(qū)分宮頸HSIL與宮頸LSIL。

[關(guān)鍵詞] 鱗狀上皮內(nèi)病變；ProEXC；HPV

[中圖分類(lèi)號(hào)] R4 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1674-0742（2018）02（c）-0001-03

Expression and Significance of and ProEXC in HPV Associated Cervical Squamous Intraepithelial Lesion

MIN Jian-fang1， YANG An-qiang2

1.Department of Pathology， the First Affiliated Hospital of Shihezi University， Shihezi， Xinjiang， 832000 China； 2.Department of Pathology， Wuxi Maternal and Child Health Hospital， Wuxi， Jiangsu Province， 214000 China

[Abstract] Objective This paper tries to investigate the significance of the pathological diagnosis by detect the expression of ProEXC and HR-HPV DNA in cervical squamous intraepithelial lesion（SIL）. Methods From February 2013 to February 2015，100 cases of LSIL， 200 cases of HSIL were convenient collected ProEXC was detected by immunohistochemistry. HR-HPV DNA was detected by HC-2. Results ProEXC positive staining was localized in the nucleus and HPV DNA 1.0 pg/ml for the positive. The positive rate of the LSIL was 41.0%， 62.0% and HSIL was 69.0%， 78.5%， compared to the difference between the two was significant（P<0.01）. The positive rate of control group was 8.3%， 10.0%，LSILand HSIL compared， the difference was significant（P<0.01）. Conclusion The high expression of ProEXC in HSIL， combined with HR- HPV detection， can be used as a index of auxiliary diagnostic SIL， and can distinguish between HSIL and LSIL.

[Key words] SIL； ProEXC； HPV

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)較常見(jiàn)的惡性腫瘤。我國(guó)宮頸癌的患病率也呈逐漸升高的趨勢(shì)。而對(duì)于宮頸癌的防治，早預(yù)防、早診斷與早治療是關(guān)鍵，因此，我們只有對(duì)宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變（SIL）做出正確的診斷，臨床醫(yī)生也才能根據(jù)該診斷做出相應(yīng)的治療，最終達(dá)到徹底治愈。那么，宮頸SIL的準(zhǔn)確診斷及潛在意義在宮頸癌防治中就起到了關(guān)鍵作用。ProEXC是拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα（TOP2A）和微小染色體修復(fù)蛋白2（MCM2）雞尾酒抗體。研究表明[1-2]在宮頸SIL病變中，ProEXC的表達(dá)隨著宮頸SIL的級(jí)別升高而增高，且與高危HPV（HR-HPV）感染密切相關(guān)。2013年2月—2015年2月該研究通過(guò)檢測(cè)ProEXC在宮頸SIL中的表達(dá)，探討ProEXC表達(dá)與HR-HPV感染在宮頸SIL診斷中的價(jià)值，提高宮頸SIL的診斷正確率，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

方便選取該院手術(shù)的宮頸標(biāo)本共360例。其中宮頸低級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（LSIL）100例，宮頸高級(jí)別鱗狀上皮內(nèi)病變（HSIL）200例，正常宮頸對(duì)照60例。

1.2 檢測(cè)方法

①標(biāo)本采用10% 中性甲醛固定，制成蠟塊，通過(guò)石蠟切片后進(jìn)行HE染色，最后在光鏡下確定病理診斷及分組。ProEXC檢測(cè)采用免疫組化SP法，用已知陽(yáng)性片做ProEXC陽(yáng)性對(duì)照。通過(guò)提前稀釋后，把MCM2與TOP2A混合為雞尾酒抗體，即ProEXC[3]。②采用雜交捕獲Ⅱ代（HC-2）法檢測(cè)HPV DNA。

1.3 結(jié)果判斷

ProEXC陽(yáng)性為細(xì)胞核染成棕黃色，結(jié)果判定依據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)及著色強(qiáng)度兩項(xiàng)指標(biāo)，進(jìn)行判讀；分為陰性（-）、弱陽(yáng)性（+）、中度陽(yáng)性（++）、強(qiáng)陽(yáng)性（+++）。HC-2判定標(biāo)準(zhǔn)：陰性< 1.0 pg/mL；陽(yáng)性≥1.0 pg/mL。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

應(yīng)用SPSS 14.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料采用百分率表示，采用χ2檢驗(yàn)，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 ProEXC在宮頸SIL中的表達(dá)

宮頸SIL組及對(duì)照組中ProEXC表達(dá)陽(yáng)性率（見(jiàn)表1），宮頸對(duì)照組中ProEXC表達(dá)率低于SIL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=73.65，P<0.01）；ProEXC在宮頸HSIL與LSIL中的表達(dá)，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=21.72，P<0.01）。ProEXC在對(duì)照組中，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)很少超過(guò)10% ，而且主要分布在近基底層（見(jiàn)圖1），而在宮頸HSIL中，陽(yáng)性細(xì)胞散在分布于上皮1/3以上至上皮全層，陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)量多少不等，<10%或>90%均可見(jiàn)到（見(jiàn)圖2）。

2.2 HPV DNA在宮頸SIL中的表達(dá)

宮頸SIL組及對(duì)照組中HPV DNA陽(yáng)性率（見(jiàn)表2），宮頸對(duì)照組中HPV DNA陽(yáng)性表達(dá)低于正常SIL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 =158，P<0.01）；HPV DNA在宮頸LSIL組的陽(yáng)性低于宮頸HSIL組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2 =9.21，P<0.01）。

3 討論

宮頸癌是女性生殖系統(tǒng)較常見(jiàn)的惡性腫瘤。由于宮頸癌的發(fā)生存在著一個(gè)較長(zhǎng)、可逆的癌前病變區(qū)，即宮頸SIL。宮頸細(xì)胞學(xué)檢查在女性宮頸癌的防治中一直發(fā)揮作用，但由于臨床醫(yī)生的取樣水平及經(jīng)驗(yàn)不同，導(dǎo)致取樣細(xì)胞多少不均，進(jìn)而致其敏感性低及假陰性率高，最后影響到診斷的準(zhǔn)確性。通過(guò)婦科陰道鏡下取宮頸活檢組織送病理檢查是診斷宮頸SIL的金標(biāo)準(zhǔn)。但國(guó)內(nèi)不同病理醫(yī)生對(duì)宮頸SIL診斷標(biāo)準(zhǔn)有不同的理解，最后做出的病理診斷出入也很大。因此，希望通過(guò)檢測(cè)一些特異性標(biāo)志來(lái)幫助病理醫(yī)生正確診斷宮頸SIL。

ProEXC是MCM2和TOP2A的雞尾酒抗體[1，3-5]，通過(guò)改變DNA空間結(jié)構(gòu)，在DNA生命活動(dòng)中具有重要作用。TOP2A的表達(dá)有賴(lài)于細(xì)胞周期，在正常細(xì)胞中僅見(jiàn)于S期和G2/M期，但在腫瘤細(xì)胞中，TOP2A表達(dá)率增高且不再依賴(lài)細(xì)胞增殖周期，其在G0、G1 期即可出現(xiàn)表達(dá)[6]，使得在惡性增殖細(xì)胞中的表達(dá)比良性增生細(xì)胞更高。屈王蕾等[2]認(rèn)為隨著宮頸癌前病變程度的升高，Topo II a蛋白表達(dá)隨之上調(diào)，且與細(xì)胞中高危型HPV的拷貝量呈正相關(guān)。MCM 2是MCM復(fù)合體的一個(gè)組分，它在休眠細(xì)胞中低表達(dá)，在增生活躍的細(xì)胞中高表達(dá)，在細(xì)胞從G0 進(jìn)入G1 期之前表達(dá)即開(kāi)始升高，G1末期和S早期達(dá)到峰值[7]。研究表明，在高危型HPV感染和宮頸SIL病變時(shí)MCM 2過(guò)表達(dá)[8]，ProEx C將TOP2A和MCM 2聯(lián)合使用，可發(fā)揮兩個(gè)抗體的協(xié)同作用，防止單獨(dú)應(yīng)用MCM 2和TOP2A時(shí)可能存在的漏標(biāo)情況，使雞尾酒抗體得到認(rèn)同[1，3]。研究表明，ProEXC是宮頸HSIL的標(biāo)志物之一，對(duì)宮頸HSIL具有較高的特異性和敏感性，并有助于識(shí)別容易進(jìn)展到宮頸癌的病變[1，3-6]，Pinto等[4]研究顯示，對(duì)宮頸HSIL，ProEXC具有較高的敏感性和特異性，對(duì)于宮頸非SIL，ProEXC的假陽(yáng)性率也較低，有利于鑒別反應(yīng)性上皮改變與宮頸SIL病變。該研究中ProEXC在宮頸HSIL與LSIL中的表達(dá)差異均有顯著性，且病變?cè)絿?yán)重陽(yáng)性表達(dá)率越高，進(jìn)一步證實(shí)了ProEXC在宮頸HSIL與LSIL中的診斷意義。

綜上所述，對(duì)宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變客觀(guān)、正確的分級(jí)和病理診斷，對(duì)臨床醫(yī)生下一步治療以及評(píng)價(jià)預(yù)后是非常重要的。本文結(jié)果探討顯示，在宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變中聯(lián)合檢測(cè)ProEx C和HR-HPV，可能作為輔助診斷宮頸鱗狀上皮內(nèi)病變的指標(biāo)，并能有可能區(qū)分宮頸HSIL與宮頸LSIL，幫助病理醫(yī)生正確診斷宮頸SIL。

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（收稿日期：2017-11-21）