膀胱癌組織前梯度蛋白2表達變化及其臨床意義

李峰，馮宇鵬，連學雄，吳文正，肖成林，趙仕佳

(廣州醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院，廣州 511447)

膀胱癌早期癥狀缺乏特異性，多數(shù)患者在確診時已接近中晚期，從而延誤了治療最佳時間[1,2]。手術切除是目前膀胱癌首選的治療手段，但50%～80%患者術后會發(fā)生轉移[3]。隨著生物醫(yī)學技術的快速發(fā)展，分子腫瘤標志物用于臨床早期輔助診斷惡性腫瘤成為研究熱點。前梯度蛋白2(AGR2)是非洲爪蟾蛋白XAG2的人型同系物，廣泛分布于人體組織。研究顯示，AGR2在卵巢癌、結直腸癌等惡性腫瘤組織中高表達，并參與上述惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程[4,5]。目前，AGR2與膀胱癌相關性的研究較少。本研究分析膀胱癌組織AGR2表達變化及其與患者臨床病理參數(shù)及預后的關系，探討AGR2在膀胱癌發(fā)生、發(fā)展中的作用。

1 臨床資料

1.1 基本資料 選擇2014年1月～2015年6月廣州醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院收治的膀胱癌患者76例，男50例、女26例，年齡53～79(62.7±5.5)歲；單發(fā)腫瘤36例，多發(fā)腫瘤40例；腫瘤直徑1～5(2.2±0.7)cm；根據(jù)國際抗癌協(xié)會(UICC)TNM分期標準[6]：Ⅱ期41例，Ⅲ～Ⅳ期35例；組織分化程度：低分化33例，中高分化43例；有淋巴結轉移27例，無淋巴結轉移49例。納入標準：①原發(fā)性腫瘤，且術后病理組織活檢證實為膀胱癌；②術前未行放、化療及免疫治療；③有完整的臨床病理資料。排除標準：①妊娠期以及哺乳期的婦女；②心臟功能不全；③肝、腎障礙；④合并其他急慢性炎癥性疾病及自身免疫性疾??；⑤合并其他惡性腫瘤；⑥合并其他可能影響本研究結果的疾病。本研究獲廣州醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準，患者均知情同意并簽署知情同意書。

1.2 膀胱癌組織AGR2表達及其與患者臨床病理參數(shù)和預后的關系 本研究統(tǒng)計學處理采用SPSS22.0統(tǒng)計軟件。計數(shù)資料比較采用χ2檢驗和Fisher確切概率法，中位生存時間比較采用Log-Rank檢驗。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

1.2.1 膀胱癌組織AGR2表達 取手術切除的膀胱癌組織及其癌旁正常組織(均經(jīng)病理檢查證實)，采用免疫組化SABC法檢測AGR2表達。以AGR2陽性乳腺癌組織標本為陽性對照，磷酸緩沖液代替一抗為陰性對照。細胞質中出現(xiàn)黃色或者棕黃色顆粒為AGR2陽性細胞。從陽性細胞數(shù)量及著色強度兩個方面綜合評定結果[7]。陽性細胞數(shù)量：無陽性細胞計0分，有陽性細胞但比例<10%計1分，陽性細胞數(shù)量10%～<50%計2分，陽性細胞數(shù)量50%～80%計3分，陽性細胞數(shù)量>80%計4分；染色強度：無染色計0分，淺黃色計1分，黃色計2分，棕黃色計3分。 兩項計分評分相乘結果0～3分為AGR2表達陰性，≥4分為AGR2表達陽性。結果顯示，膀胱癌組織AGR2陽性表達者34例，陰性表達者42例。膀胱癌組織及其癌旁正常組織AGR2陽性表達率分別為44.74%(34/76)、13.15%(10/76)，二者比較P<0.05。

1.2.2 膀胱癌組織AGR2表達與患者臨床病理參數(shù)的關系 腫瘤直徑≥2 cm、TNM分期Ⅲ和Ⅳ期、組織分化程低度、有淋巴結轉移者的膀胱癌組織AGR2陽性表達率分別高于腫瘤直徑<2 cm、TNM分期Ⅱ期、組織分化程度中高分化、無淋巴結轉移者(P均<0.05)。不同性別、年齡、腫瘤數(shù)量的膀胱癌患者腫瘤組織AGR2陽性表達率比較差異無統(tǒng)計學意義(P均>0.05)。見表1。

1.2.3 膀胱癌組織AGR2表達與患者術后復發(fā)的關系 膀胱癌患者AGR2表達者術后1、2、3年分別有5、15、19例復發(fā)，術后1、2、3年復發(fā)率分別為14.71%、44.12%、55.88%；AGR2陰性表達者術后1、2、3年分別有3、7、11例復發(fā)，術后1、2、3年復發(fā)率分別為7.14%、19.05%、26.19%。AGR2陽性者術后2、3年復發(fā)率高于AGR2陰性表達者，P均<0.05；AGR2陽性表達和陰性表達者術后1年復發(fā)率比較，P>0.05。

1.2.4 膀胱癌組織AGR2表達與患者術后中位生存時間的關系 AGR2陽性與陰性表達者中位生存時間分別為30.00個月(95%CI為27.78～32.22個月)、34.00個月(95%CI為32.06～35.94個月)，二者比較P<0.05。

表1 膀胱癌組織AGR2表達與患者臨床病理參數(shù)的關系

2 討論

AGR2是位于人第7號染色體上片段長度為763 bp的基因編碼蛋白質二硫鍵異構酶家族成員，與外胚層發(fā)育、早期階段前后位的分化等密切相關[8]。研究證實，AGR2可抑制p53磷酸化及其活性，使其失去調控細胞周期的能力，最終導致細胞癌變[9]；AGR2在肺癌、乳腺癌、前列腺癌等腫瘤組織中表達上調[10～12]；特異性敲除肺癌細胞中AGR2基因可減少肺癌細胞轉移[13]；研究表明，乳腺癌組織中AGR2水平明顯升高，并與乳腺癌臨床病理特征有關，是預測患者預后的重要指標[4]；鼻咽癌病灶組織細胞中AGR2表達上調，抑制AGR2表達可減弱癌細胞的侵襲能力以及遷移能力[14]。本研究結果顯示，膀胱癌組織AGR2陽性表達率明顯高于正常膀胱組織，提示AGR2可能參與膀胱癌的發(fā)病過程。研究顯示，CD10在膀胱癌患者中表達上調參與了病情的發(fā)生、發(fā)展，CD10與AGR2密切相關，AGR2異常表達可能通過影響CD10表達而使細胞異常增殖，細胞無法正常凋亡而發(fā)生惡性改變[15]。Zhang等[16]研究顯示，胃癌TNM分期越晚、腫瘤越大、侵襲深度越深，則AGR2陽性表達率越高。劉麗娜等[7]報道，直腸癌組織中AGR2陽性表達與腫瘤的分化程度、淋巴結轉移等密切相關。上述研究結果提示，AGR2與惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展過程密切相關，是評價病情進展的重要指標。本研究結果顯示，腫瘤直徑≥2 cm、TNM分期Ⅲ和Ⅳ期、組織分化程度低、有淋巴結轉移的膀胱癌組織中AGR2陽性表達率相對較高，提示AGR2與膀胱癌臨床病理特征有關，進一步提示AGR2可能參與了膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展過程。本研究結果顯示，AGR2陽性膀胱癌患者術后2、3年復發(fā)率高于AGR2陰性患者，而AGR2陽性、陰性膀胱癌患者術后1年復發(fā)率無明顯統(tǒng)計學差異；生存分析顯示，AGR2陽性患者中位生存時間短于AGR2陰性者。提示AGR2與膀胱癌患者預后密切相關，AGR2陽性表達率越高，患者預后越差、復發(fā)率越高、生存時間越短。早期檢測膀胱癌組織中AGR2表達有助于判斷患者預后。

綜上所述，AGR2高表達可促進膀胱癌的發(fā)生、發(fā)展。檢測膀胱癌組織AGR2表達有助于判斷患者病情及預后。

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