液質(zhì)聯(lián)用法測定紙質(zhì)包裝容器中6種熒光增白劑

王振國 曾云想 湯明河 劉小平

和食品直接接觸的紙制包裝容器已經(jīng)成為食品質(zhì)量的重要組成部分，對(duì)人體的健康有著直接或間接的影響。近幾年，由紙制包裝容器引發(fā)的食品安全問題讓人擔(dān)憂，紙制包裝容器接觸用的塑料制品中殘留的有毒有害物質(zhì)已成為食品污染的重要來源之一，對(duì)人體產(chǎn)生潛在的危害。熒光增白劑（Fluorescent whitening agents，F(xiàn)WAs）是一種熒光染料，其在增白和增艷上有著相當(dāng)突出的作用，因此在紡織、造紙、洗滌劑、塑料等行業(yè)大量使用。一些不法企業(yè)以廢紙為原料生產(chǎn)食品包裝紙，在生產(chǎn)過程中添加了大量的熒光增白劑，不可避免的將紙漿中熒光增白劑帶入到食品包裝中，這些包裝容器中所含有的熒光增白劑一旦通過食品包裝遷移到食品從而被人體吸收，將會(huì)對(duì)人體造成傷害，是潛在的致癌因素之一。

目前，我國國家標(biāo)準(zhǔn)中關(guān)于熒光劑的檢測采用的是《GB/T 5009.78- 2003 食品包裝用原紙衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)的分析方法》中的置于波長365nm和254nm紫外燈下檢查的方法，只對(duì)樣品熒光增白劑進(jìn)行了的定性測試。《GB/T 27741-2011 紙和紙板 可遷移性熒光增白劑的測定》采用了液相色譜法對(duì)紙和紙板中的可遷移性熒光增白劑進(jìn)行定量測試，但此法測定中只采用熒光增白劑中的一種（VBL）作為標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行測定，而沒有對(duì)樣品中的其它熒光增白劑類物質(zhì)及進(jìn)行測定，這就會(huì)導(dǎo)致檢測結(jié)果無法反映樣品中的熒光增白劑總量。

當(dāng)前，紡織、造紙、洗滌劑、塑料等行業(yè)在生產(chǎn)中使用的熒光增白劑種類繁多。因此，建立一種更準(zhǔn)確、更高效、更便捷的，定性及定量檢測紙制包裝容器中熒光增白劑類物質(zhì)的檢測方法已勢(shì)在必行。本實(shí)驗(yàn)主要使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（LC- MS/MS）的方法同時(shí)測定6種熒光增白劑，可以為紙質(zhì)包裝容器中熒光增白劑的監(jiān)管和分析提供一種較為準(zhǔn)確、高效和便捷的方法。

實(shí)驗(yàn)部分

儀器與試劑。

Agilent1290- 6460型超高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜儀；MTN- 2800W氮吹濃縮儀；KH3200B型臺(tái)式超聲波清洗器； TDL- 80- 2B低速臺(tái)式離心機(jī)；梅特勒LE204E/02型分析天平；DirectPure UP 型純水機(jī)。

FWAs標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：1mg/mL， 分別稱取6種FWAs標(biāo)準(zhǔn)品各0.1000g于100mL棕色容量瓶中，通過三氯甲烷來對(duì)其進(jìn)行溶解，定容，并置于- 20℃的冰箱之中對(duì)其進(jìn)行保存，待需要使用的時(shí)候再取出并使用甲醇稀釋。

其中，甲醇與甲酸均為色譜純，三氯甲烷為分析純，實(shí)驗(yàn)時(shí)的用水為三級(jí)水。

儀器工作條件。

（1）色譜條件：E clipse Plus C18（2.1mm×10mm，3.5um）；柱溫40℃；流速0.4mL/min；進(jìn)樣量5μL。流動(dòng)相：A為0.1%（V/V）甲酸溶液，B為0.1%（V/V）甲酸甲醇溶液。梯度洗脫程序：0- 4.0min時(shí)，A：B由40：60至0：100，保持3min；7.0- 7.7min時(shí)，A：B由0：100至40：60。

（2）質(zhì)譜條件：電噴霧離子源正離子模式（ESI+）；多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）；洗脫氣為氮?dú)?，碰撞氣為氬氣；毛?xì)管電壓4.0kV；噴霧壓力276kPa；輔助加熱器壓力276kPa，輔助加熱氣溫度350℃；保壓時(shí)間50ms。其余質(zhì)譜參數(shù)見表1，“*”為定量離子。

試驗(yàn)方法。將樣品剪成5mm×5mm碎片并混勻，稱取試樣0. 50g于25mL具塞比色管中，分三次加入三氯甲烷，每次10mL，每次超聲30min，合并提取液，4000r/min離心5min，取上清液于40℃水浴氮?dú)獯抵两?，用甲醇定容?mL，0.22μm有機(jī)系濾膜過濾，待測。

結(jié)果討論

色譜行為。在儀器工作條件下，6種FWAs提取離子色譜圖如下圖。

檢測條件的優(yōu)化。

（1）提取溶劑的選擇

試驗(yàn)分別選用了甲醇、丙酮、正己烷、甲苯及三氯甲烷作為提取溶劑，實(shí)驗(yàn)證明三氯甲烷對(duì)6種FWAs的提取效果最佳，故試驗(yàn)選取三氯甲烷作為提取溶劑。

（2）提取時(shí)間的選擇

試驗(yàn)選取了一組樣品，分別超聲提取10min、15min、30min、60min、90min，對(duì)比不同時(shí)間的回收率。通過實(shí)驗(yàn)證明：30min提取時(shí)間回收率是最好的，10min、15min的回收率達(dá)不到理想效果，30min、60min、90min的回收率較穩(wěn)定但相差不大，因此，為了改善實(shí)驗(yàn)時(shí)間，獲得更高的工作效率，最終選擇30min作為超聲提取時(shí)間，以達(dá)到最佳的實(shí)驗(yàn)效果。

標(biāo)準(zhǔn)曲線、線性范圍及檢出限。在儀器工作條件下測定0.05，0.10，0.20，0.50，1.0，5.0mg/L混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。實(shí)驗(yàn)證明：6種FWAs在0.05～5.0mg/L范圍內(nèi)呈線性，表2為具體的回歸方程以及相關(guān)的系數(shù)。檢出限結(jié)果見表2

準(zhǔn)確度與精密度。為了就該方法的準(zhǔn)確度以及精密度進(jìn)行驗(yàn)證，分別就0.1，1.0，10.0mg/kg三個(gè)不同濃度梯度采用加標(biāo)回收試驗(yàn)，對(duì)于每一個(gè)濃度都需要進(jìn)行6次的平行測定，最終得出回收率為89.5%- 94.6%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.1% - 3.9%，具體實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。

本實(shí)驗(yàn)建立并驗(yàn)證了紙質(zhì)包裝容器中6種FWAs的方法，實(shí)驗(yàn)證明，該方法回收率高、靈敏度高、重現(xiàn)性好，具備較好的定性和定量能力，可用于紙質(zhì)包裝容器中對(duì)6種FWAs的定性和定量檢測。

基金項(xiàng)目：浙江省溫州市質(zhì)監(jiān)系統(tǒng)項(xiàng)目（201611）