評價肺結(jié)核患者痰中結(jié)核分枝桿菌檢驗的臨床價值

周蜜

肺結(jié)核作為臨床傳染性病癥中的一種，患者肺部受結(jié)核分枝桿菌感染影響是其主要發(fā)病機制，臨床上多以午后發(fā)熱、咳嗽、咳痰、食欲不振及乏力等癥狀為患者主要表現(xiàn)，嚴(yán)重者還將引發(fā)咳血、胸痛及呼吸困難等癥狀，且此類病癥細(xì)菌具有發(fā)展速度快和以空氣為傳播介質(zhì)的特性，若不及時給予其科學(xué)有效的治療來控制其病癥發(fā)展速率，對患者身心健康安全均會造成嚴(yán)重威脅[1-2]。故如何及早確診此類病癥患者病情并加以有效治療是目前臨床上所重視的主要醫(yī)學(xué)問題之一。近年來，有研究結(jié)果顯示，結(jié)核分歧桿菌易受環(huán)境影響而出現(xiàn)變異，是提高此類桿菌生存質(zhì)量和繁殖速度的主要原因[3]。故現(xiàn)今臨床上針對肺結(jié)核患者病癥的診斷均是提出采用痰涂片鏡檢作為首選方案，對提高其結(jié)核分枝桿菌陽性檢出率具有較好的臨床價值，用于患者病癥診斷及后期治療中能起到較好的輔助作用，且目前此類方法的檢測效果已被臨床所認(rèn)可[4-5]。本文現(xiàn)將于本院收治的肺結(jié)核患者中抽出80例作為研究對象行臨床分析，具體結(jié)果報道如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 將2015年5月～2016年6月于本院收治的肺結(jié)核患者中以隨機抽選模式抽出80例作為研究的對象，并以其檢驗結(jié)果的差異性分成觀察組（60例）和對照組（20例）。其中，觀察組男35例，女25例；年齡24～65歲，平均年齡（41.25±3.98）歲。對照組男11例，女9例；年齡20～63歲，平均年齡（42.69±4.12）歲。兩組患者臨床資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義，具有可比性。

1.2 入選標(biāo)準(zhǔn) 本次研究抽取患者均符合國家衛(wèi)生部中于肺結(jié)核病癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，并對本次研究保有知情權(quán)，均排除患有心、肝、腎等主要臟器衰竭癥、精神類疾病及依從性差的所有患者[6]。

1.3 方法 所有患者均于清晨采集痰液來進行菌落樣本收集，后行分離培養(yǎng)來制成樣本進行檢測，并以抗酸染色法及酸性改良羅氏培養(yǎng)方法檢測結(jié)果來作為結(jié)核分歧桿菌培養(yǎng)方法的對照實驗，具體如下所示。

1.3.1 抗酸染色法 取100 ml、濃度95%的乙醇與8 g堿性復(fù)紅配置成混合液體（石碳酸復(fù)紅乙醇溶液），接著取10 ml此類混合液體與90 ml、濃度為5%的石碳酸水溶液進行均勻混合，然后脫色液制定成分為：95 ml、濃度為95%的乙醇溶液及3 ml濃鹽酸；而復(fù)染液制定成分為：100 ml、濃度為95%的乙醇溶液及2 g亞甲藍(lán)。調(diào)制好混合液體后，具體染色步驟為：①首先取收集好的患者痰液來制備檢測涂片，分別取0.1 ml痰液標(biāo)本中呈膿樣性質(zhì)或干酪性狀以圓形痰膜形狀來涂抹于玻片正面處，并由其以靜止形態(tài)直至自然干燥為止，用以做成檢測標(biāo)本，同時保留至患者獲取實驗結(jié)果為止。②染色：首先使用火焰來穩(wěn)固玻片，然后通過滴加石碳酸復(fù)紅染液來完全覆蓋住玻片上的痰膜，后滴加3滴雙氧水來形成混合液體以完成1 min的染成操作。接著用流水沖凈玻片上的染色液，確認(rèn)玻片無水滴后取脫色劑滴于痰膜上端外緣處，確保其痰膜有液體流過，以觀察其痰膜是否出現(xiàn)紅色變化，最后行褪色處理來直至玻片呈亮藍(lán)色現(xiàn)象，并確保玻片具有透視性，檢驗方法是能透過玻片可清晰看到雜志、報紙文字。③鏡檢：在玻片臺上放置玻片，后取油鏡以從左到右的順序來有序觀察其痰膜性質(zhì)和變化。

1.3.2 酸性改良羅氏培養(yǎng)方法 取萋-尼氏染色方法來對患者痰涂片完成染色處理，后將患者痰液標(biāo)本放置于溫度4℃處作以保存，同時盡早將標(biāo)本送至檢驗科來完成痰分枝桿菌培養(yǎng)操作。然后以患者痰液標(biāo)本性狀為依據(jù)取1倍以上、濃度為4%的氫氧化鈉溶液來完成堿處理操作，并放置于生物安全柜內(nèi)取旋渦震蕩器來震蕩30 s痰標(biāo)本直至其標(biāo)本性質(zhì)完全呈液體為止，接著靜置15 min后確保操作完成時間在20 min以內(nèi)作為前提，后以無菌操作為前提，吸取0.1 ml的處理標(biāo)本來完成酸性羅氏培養(yǎng)基斜面接種操作，最后以直立形狀放置于37℃恒溫培養(yǎng)箱進行保存和觀察。

1.3.3 培養(yǎng)肺結(jié)核患者中分枝桿菌 于清晨6～7點采集患者喉部痰液作以檢測樣本，在完成樣本離心沉淀后收集其痰液中的分枝桿菌，并取一部分細(xì)菌來完成涂片操作，由于分枝桿菌存在抗酸染色性質(zhì)，故行涂片染色鏡檢具有較高的可行性，同時行涂片處理時需確保痰膜涂抹的均勻性，對提高患者鏡檢陽性率具有較好的輔助作用。然后分離培養(yǎng)痰涂片制作時所剩余的結(jié)核桿菌，在無菌試管中放置2 ml的菌液，并有序加入酚紅指示劑及氫氧化鈉來進行均勻搖晃，并于37℃恒溫下進行15 min的水浴，同時將硫酸指標(biāo)調(diào)至中性，后通過行離心操作來取出沉淀物以完成接種培養(yǎng)。

1.4 觀察指標(biāo) 記錄所有患者在進行檢測后其陽性呈現(xiàn)結(jié)果例數(shù)，陽性檢測率=（陽性例數(shù)/總例數(shù)）×100%。

1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 本文數(shù)據(jù)采用統(tǒng)計學(xué)軟件SPSS 20.0進行分析，計數(shù)資料用例數(shù)（n）表示，計數(shù)資料組間率（%）的比較采用χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者的陽性檢出率比較 觀察組患者陽性檢出率90.00%較對照組30.00%高（χ2=28.80，P＜0.05），見表1。

表1 所有患者的陽性檢出率比較[n（%）]

2.2 多種檢測方法患者的陽性檢出率比較 結(jié)核桿菌培養(yǎng)方法的陽性檢出率為95.00%，較抗酸染色法（83.33%）、酸性改良羅氏培養(yǎng)方法（86.67%）高，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05），見表2。

表2 多種檢測方法患者的陽性檢出率比較（n=60）

3 討論

結(jié)核分枝桿菌作為一種寄生菌，其成活條件通常是寄存于活細(xì)胞前提下，病菌傳播介質(zhì)僅僅是借助飛沫或塵埃，在經(jīng)患者呼吸道吸入后促使其機體引發(fā)感染的主要原因，是導(dǎo)致患者引發(fā)肺結(jié)核的主要機制，對其生命健康安全均會造成一定威脅，故如何盡早診斷此類病癥患者是目前臨床醫(yī)學(xué)急待解決的問題之一[7-8]。近年來，臨床上在治療肺結(jié)核患者過程中均是主張通過收集其清晨喉部痰液來分析結(jié)核分枝桿菌，患者陽性檢出率較高，用于診斷其病癥此類數(shù)據(jù)具有較高的可行性，且同樣適用于患者病癥治療期間作以其病情進展觀察的有效數(shù)據(jù)，對提高其治療效率均具有較好的臨床價值[9]。

近年來，臨床上通常選擇抗酸染色法來對患者結(jié)核分枝桿菌進行檢測，此類方法具有操作簡單及耗費時間短的優(yōu)點，但其只適用于檢測單一病菌，但患者痰液中出現(xiàn)多種致病菌時，數(shù)量較少的病菌均無法有效檢出，會降低患者檢測結(jié)果的精準(zhǔn)性，故抗酸染色法用于肺結(jié)核患者病癥診斷中的適用性和敏感度仍然有待商榷[10]。除此之外，集菌培養(yǎng)同樣方式分析患者結(jié)核分枝桿菌的以中共有效措施，雖其細(xì)菌培養(yǎng)過程中耗時、人力較高，但后期形成肉眼可見的細(xì)菌菌落是提高患者病癥診斷結(jié)果精準(zhǔn)性的重要依據(jù)，且結(jié)核菌不具備生長繁殖的性質(zhì)，故后期培養(yǎng)形成的細(xì)菌菌株用于藥敏測定及鑒定菌型性質(zhì)均具有較好的臨床價值。但是目前有相關(guān)研究結(jié)果顯示，肺結(jié)核病患者機體會產(chǎn)生的耐藥性是降低其治療效果的關(guān)鍵影響因素，因此如何快速有效促進抗酸結(jié)核分枝桿菌的分離速率是目前臨床上急待解決的主要醫(yī)學(xué)問題之一[11]。

本次研究結(jié)果顯示，觀察組（活動性肺結(jié)核）結(jié)核分歧桿菌培養(yǎng)的陽性檢出率較對照組（非活動性肺結(jié)核）對應(yīng)值高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。并有相關(guān)研究結(jié)果指出此類病癥患者受病菌感染影響，故其后期治療效果較差，追其原因發(fā)現(xiàn)結(jié)核分歧桿菌的生存條件和空間是處于患者巨噬細(xì)胞內(nèi)，其治療期間用藥的不合理促使患者體內(nèi)細(xì)菌產(chǎn)生耐株菌的同時提高其細(xì)菌在患者體內(nèi)的隱藏性，間接性提高了其治療難度系數(shù)，對患者機體痊愈均會造成不利影響[12]。故臨床上針對此類現(xiàn)象明確指出患者病癥治療早期需行藥物敏感性試驗用于結(jié)核分歧桿菌檢驗中，為其后期治療的藥物選擇提供有力的參考依據(jù)，對提高患者健康恢復(fù)進度具有較好的臨床價值。

綜上所述，針對肺結(jié)核患者選擇結(jié)核分枝桿菌檢驗方法進行病情診斷，用于患者病癥早期診斷或后期治療中均具有較好的臨床價值，值得臨床上大力推廣。

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