金線蓮的化學(xué)成分及生物活性研究進(jìn)展

肖小華，林彩霞，吳序櫟，陳嘉敏，王宇軒，翁冰洵，劉立忠，胡小鵬，賀震旦

（1.深圳市第二人民醫(yī)院，廣東深圳 518037）（2.深圳大學(xué)醫(yī)學(xué)部，廣東深圳 518060）

金線蓮（Anoectochilusroxburghii）為名貴的藥用植物資源，屬蘭科(Orchidaceae)，開唇蘭屬(Anoectochilus)植物，又俗稱金線蘭、金線虎頭蕉、金蠶、樹草蓮、金錢子草，烏人參等[1,2]，是一種多年生珍稀中草藥，主要分布于東南亞各國及中國南方各省，福建和臺(tái)灣等地產(chǎn)量十分豐富，是一大宗的生物資源品種。金線蓮具有清熱涼血、除濕解毒、滋陰降火和消炎止痛等功效。根據(jù)相關(guān)的藥理研究發(fā)現(xiàn)，金線蓮全草入藥，可用于治療肺結(jié)核、咳嗽、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、跌打損傷、重癥肌無力、慢性胃炎、肝炎、腎炎、膀胱炎、小兒驚風(fēng)、婦女白帶以及毒蛇咬傷等癥[3～5]。

金線蓮民間常用“藥食兩用”中藥材，長(zhǎng)期的食用經(jīng)驗(yàn)證實(shí)無毒副作用，其保健作用也得到越來越多百姓的青睞；如福建龍巖地區(qū)居民常用金線蓮煲湯食用，具有增強(qiáng)抵抗力功效；金線蓮經(jīng)特殊的“食品化炮制”可做成藥膳膏方，可運(yùn)用于亞健康病人、重病患者輔助治療及病后康復(fù)，具有滋補(bǔ)保健療效；此外，金線蓮色澤口感俱佳，加上苦丁茶、羅漢果、甘草、杭白菊和山楂等常見食材調(diào)配口感，可開發(fā)出新一類降“三高”保健食品，如輔助降血糖的保健品以及改善代謝功能障礙的固體飲品。

本文對(duì)近幾十年來各國對(duì)金線蓮植物的研究進(jìn)展進(jìn)行歸納總結(jié)，為金線蓮食品深度開發(fā)提供理論依據(jù)。在化學(xué)成分方面，金線蓮主要活性成分為金線蓮苷（kinsenoside），為一個(gè)手性中心的丁內(nèi)酯的吡喃葡萄糖苷，相關(guān)研究表明，kinsenoside具有保肝降血糖等功效，但作用機(jī)制尚未明確。另外，金線蓮還含類黃酮、多糖、揮發(fā)性化合物、生物堿、萜類、甾體和豐富的苷類成分。在生物活性方面，金線蓮主要具有降血糖、降血壓、抗脂肪、抗炎、抗病毒、保肝、腎保護(hù)性、免疫調(diào)節(jié)、抗驚厥、鎮(zhèn)靜和抗腫瘤等作用。

1 化學(xué)成分

1.1 黃酮類

關(guān)璟等人[1]利用硅膠柱色譜、凝膠LH-20和反相高效液相制備等方法對(duì)金線蓮中的黃酮成分進(jìn)行分離純化，并使用解析部分黃酮類化合物的結(jié)構(gòu)。從福建產(chǎn)金線蓮95%乙醇滲漉提取物正丁醇部分制備得到5個(gè)黃酮苷類化合物分，其結(jié)構(gòu)為：槲皮素-7-O-β-D-葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-蕓香糖苷、異鼠李素-3,4’-O-β-D-二葡萄糖苷、異鼠李素-3,7-O-β-D-二葡萄糖苷、異鼠李素-7-O-β-D-二葡萄糖苷。何春年等人[2]利用硅膠柱色譜及 Sephadex LH-20柱色譜分離福建金線蓮全草中的化學(xué)成分，并通過理化常數(shù)和波譜分析鑒定了部分化合物的結(jié)構(gòu)，得到黃酮類成分槲皮素和 5,4’二羥基-6,7,3’-三甲氧基黃酮。楊秀偉[3]經(jīng) TLC色譜檢查，采用柱色譜方法進(jìn)行分離、純化、用IR、NMR等方法進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定，得到3’,4’,7-三甲氧基-3,5-二羥基黃酮、異鼠李素-3-O-β-D-蕓香糖苷和蘆??；黃酮類為金線蓮中的重要活性成分，如3’,4’,5-三羥基黃酮醇-7-O-β-D-葡萄糖苷，3’,4’,5,7-四羥基黃酮醇-3-O-β-D-蕓香糖苷，5,7-二羥基-3’甲氧基黃酮醇-3,4’-O-β-D-二葡萄糖苷，4’,5-二羥基-3’甲氧基黃酮醇-3,7-O-β-D-二葡萄糖苷，4’,5,3-三羥基-3’甲氧基黃酮醇-7-O-β-D-二葡萄糖苷，山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，山奈酚 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷，5-羥基-3',4',7-三甲氧基黃酮-3-O-β-D-蕓香糖苷等。

1.2 揮發(fā)油類

韓美華等人[4]采用水蒸氣蒸餾法從金線蓮中提取揮發(fā)油，采用GC毛細(xì)管柱進(jìn)行分析，使用歸一化法測(cè)定其相對(duì)含量，并用GC-MS法從中檢出182個(gè)成分，鑒定出73個(gè)化合物，占揮發(fā)油總量的92.64%。金線蓮中揮發(fā)油的主要成分為：正十六烷酸(25.22%)、(Z,Z)-9,12-十八碳二烯酸甲酯(6.47%)、11,14,17-二十碳三烯酸甲酯(4.42%)、(Z,Z)-9,12-十八碳二烯酸(15.35%)和(Z,Z,Z)-9,12,15-十八碳三烯酸甲酯(13.64%)，其它成分大多為飽和烷烴、醛、酮、脂肪酸及脂肪酸酯。

1.3 多糖類

金線蓮中多糖含量較高，賴應(yīng)輝[5]等采用等離子光譜法和比色法，發(fā)現(xiàn)金線蓮中糖類成分以多糖含量為高，占 13.326%，低聚糖為 11.243%，還原糖為9.789%。張錦雀[6]采用超聲法提取出金線蓮多糖(ARPS)，通過高速逆流色譜法對(duì)多糖進(jìn)行了分離提純，后經(jīng)紫外光譜分析、凝膠柱層析法分析顯示ARPS是分子量分布均一的多糖組分。測(cè)定得其分子量為18197，通過柱前衍生化高效液相色譜法分析其單糖是由甘露糖、鼠李糖、半乳糖、阿拉伯糖和巖藻糖等組成。

1.4 生物堿類

林麗清等[7]通過正交試驗(yàn) L9(34)法優(yōu)化提取金線蓮總生物堿的條件，以鹽酸麻黃堿為對(duì)照品，用酸性染料比色法測(cè)定其總生物堿，結(jié)果表明超聲時(shí)間是提取生物堿的關(guān)鍵影響因素，最佳提取條件為用10倍水溶劑、結(jié)合超聲法，提取時(shí)間8 h、堿化后用乙酸乙酯萃取。朱善嵐等人[8]首次通過硅膠柱色譜等方法從金線蓮中分離得到生物堿，并用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)（HPLC/ESI/MS）技術(shù)鑒定為烏頭堿和石杉?jí)A甲；鐘添華等[9]人利用陽離子交換樹脂吸附生物堿，提取率高，操作簡(jiǎn)單，是一種高效的總生物堿提取方法。

1.5 甾體類

金線蓮中的甾體混合物組分相近，目前通過采用硝酸銀硅膠柱層析并結(jié)合衍生化、GC-MS分析才得以分離和鑒定；楊秀偉[3]等采用高效液相色譜和質(zhì)譜聯(lián)用方法，發(fā)現(xiàn)并鑒別出金線蓮中含有甾體類化合物谷甾醇、豆甾醇和麥角甾醇。其他已鑒定出的甾體類化合物還有24-異丙烯基膽甾醇、菜油甾醇和羊毛甾醇。

表1 金線蓮的化學(xué)成分Table 1 The chemical composition of Anoectochilus roxburghii

異鼠李素 3,4’-O-β-D-二葡萄糖苷 C27H30O16 610異鼠李素-3-O-β-D-蕓香糖苷 C28H32O16 4975,4’二羥基-6,7,3’-三甲氧基黃酮 C18H16O7 3443’,4’,7-三甲氧基-3,5-二羥基黃酮 C18H16O7 3443’,4’,5-三羥基黃酮醇-7-O-β-D-葡萄糖苷 C21H20O12 4643’,4’,5, 7-四羥基黃酮醇-3-O-β-D-蕓香糖苷 C27H30O16 6105,7-二羥基-3’-甲氧基黃酮醇-3,4’-O-β-D-二葡萄糖苷C28H32O17 640

4’,5-二羥基-3’甲氧基黃酮醇-3,7-O-β-D-二葡萄糖苷 C28H32O17 6404’,5, 3-三羥基-3’甲氧基黃酮醇-7-O-β-D-二葡萄糖苷C28H32O17 640山奈酚-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 C21H20O12 464山奈酚 7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷 C21H20O12 4645-羥基-3',4',7三甲氧基黃酮-3-O-β-D-蕓香糖苷C30H37O8 525揮發(fā)油類正十六烷酸 C16H32O2 256(Z,Z) -9,12-十八碳二烯酸甲酯 C19H34O2 29411,14,17-二十碳三烯酸甲酯 C21H36O2 320

(Z, Z) -9,12-十八碳二烯酸 C18H32O2 280(Z,Z,Z) -9,12,15-十八碳三烯酸甲酯 C19H32O2 292糖類甘露糖 C6H12O6 180鼠李糖 C6H12O5 164半乳糖 C6H12O6 180阿拉伯糖 C5H10O5 150巖藻糖 C6H12O5 164生物堿類 石杉?jí)A甲 C15H18N20 242.14

烏頭堿 C34H47NO11 645.74

2 生物活性

金線蓮為名貴的中藥材。近幾十年來，科學(xué)工作者對(duì)金線蓮的藥用價(jià)值開展了廣泛的研究，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示金線蓮具有降血糖、心血管保護(hù)、抗感染、抗腫瘤等生物活性。

2.1 降血糖作用

劉振林等[11]發(fā)現(xiàn)，金線蓮苷（50，100 mg/kg）可顯著增強(qiáng)鏈脲霉素誘導(dǎo)的糖尿病小鼠模型抗氧化能力，并降低血糖和膽固醇水平；在體外高糖（35 mM）損傷的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞（HUVECs）實(shí)驗(yàn)，金線蓮苷（20，50 μg/mL）給藥后，能顯著抑制多種生化指標(biāo)（一氧化氮（NO）、乳酸脫氫酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）、過氧化氫酶（CAT）），并平衡基質(zhì)金屬蛋白酶系統(tǒng)（MMP-TIMP），修復(fù)血管內(nèi)皮結(jié)構(gòu)。張健剛[12]等發(fā)現(xiàn)金線蓮多糖(100，300 mg/kg)可顯著激活天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）和丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT），下調(diào)血糖濃度，并緩解糖尿病小鼠胰臟和肝臟的病理損傷。

2.2 血管保護(hù)作用

劉青等[10]人通過人臍靜脈細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)金線蓮可以顯著改善細(xì)胞活力和抑制損傷細(xì)胞產(chǎn)生一氧化氮（NO），下調(diào)晚期糖基化終產(chǎn)物（AGEs）引起的活性氧（ROS）產(chǎn)生，降低AGE受體（RAGE）的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明金線蓮（10～30 μg/mL）通過AGEs-RAGE-NF-κB途徑減輕AGEs誘導(dǎo)的內(nèi)皮功能障礙，發(fā)揮血管保護(hù)作用。

2.3 降血壓作用

李葆華等[14]利用兩腎一夾法造腎性高血壓大鼠模型，測(cè)量血壓、血漿血管緊張素Ⅱ（Ang-Ⅱ）的含量。發(fā)現(xiàn)金線蓮提取物對(duì)腎血管性高血壓大鼠具有良好的降壓作用，其降壓機(jī)制可能與降低Ang Ⅱ的含量有關(guān)。

2.4 抗感染作用

金線蓮有抗乙型肝炎病毒（HBV）活性，鄭玲等[15]發(fā)現(xiàn)金線蓮可以抑制轉(zhuǎn)染HBV的2.2.15.細(xì)胞株分泌乙肝表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎E抗原(HBeAg)。劉政芳等[16]研究表明，復(fù)方金線蓮口服液聯(lián)合恩替卡韋治療慢性乙型肝炎具有顯著療效，可協(xié)同抗HBV，且不良反應(yīng)無明顯增加。

2.5 抗腫瘤作用

王常青等[17]發(fā)現(xiàn)金線蓮多糖對(duì)肝癌細(xì)胞（SMMC-7721）、宮頸癌細(xì)胞（Hela），肺腺癌細(xì)胞（SPC-A1）和人乳腺癌細(xì)胞（BCAP37）具有較好的殺傷效果；蔡金艷[18]等人研究金線蓮苷（kinsenoside）的體外抗癌活性，結(jié)果顯示kinsenoside對(duì)三種細(xì)胞株：人白血病細(xì)胞株（HL-60），人肺癌細(xì)胞株（A-549），人肝癌細(xì)胞株（BEL-7402）的抑癌率均不高；翁秀華等用金線蓮多糖作用于人前列腺癌細(xì)胞（PC-3），發(fā)現(xiàn)金線蓮多糖可顯著抑制 PC-3細(xì)胞的增殖，且具有劑量和時(shí)間依賴性。其機(jī)制可能與誘導(dǎo)凋亡基因Caspase-3表達(dá)有關(guān)；陳焰、林秀欽等人[19,20]發(fā)現(xiàn)金線蓮揮發(fā)油可顯著抑制人肺癌細(xì)胞（NCI-H446），研究表明金線蓮揮發(fā)油可下調(diào) B淋巴細(xì)胞瘤-2基因（Bcl-2）的表達(dá)，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，但抗腫瘤活性機(jī)制需進(jìn)一步研究。

2.6 抗氧化作用

張春泥等[21]發(fā)現(xiàn)金線蓮乙醇提取物可延緩低密度脂蛋白(LDL)的氧化，呈現(xiàn)劑量依賴性，具有一定的抗脂質(zhì)氧化功能；通過對(duì)金線蓮多糖體外抗氧化的研究，劉青[22]等人發(fā)現(xiàn)金線蓮多糖可清除氧自由基，抑制脂質(zhì)過氧化，且呈現(xiàn)劑量依賴性；邵青松[23]等人對(duì)比三種提取方法（超臨界流體萃取、索氏提取法、水蒸氣蒸餾法）得到的金線蓮油提物的抗氧化活性，結(jié)果顯示金線蓮油提物均可有效清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)和 2,2-聯(lián)氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(ABTS)的自由基，其中超臨界流體萃取的油提物抗氧化效果最佳。

2.7 其他作用

黃立峰等[24]研究表明，金線蓮各給藥組(水煎、醇提、榨汁組)與對(duì)照組比較，均顯著降低了四氯化碳（CCl4）肝損傷小鼠血清中的谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST)水平，可減少早期肝纖維化的發(fā)生，對(duì)肝損傷均具有顯著的保護(hù)作用，提示金線蓮可通過清除自由基，穩(wěn)定細(xì)胞膜而對(duì)肝細(xì)胞起到保護(hù)作用。張海全[25]等通過小鼠動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，發(fā)現(xiàn)金線蓮的水提物有一定的鎮(zhèn)痛抗炎作用。李雷等[26]發(fā)現(xiàn)金線蓮多糖提取物，可抑制P38 MAPK信號(hào)通路激酶級(jí)聯(lián)反應(yīng)，緩解炎癥反應(yīng)和高葡萄糖誘導(dǎo)的腎損傷。

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