HPLC法測(cè)定面包中丙酸鈣含量的不確定度評(píng)定

董偉博 楊海軍

測(cè)量不確定度是與測(cè)量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)，本文通過采用HPLC法測(cè)定了面包中丙酸鈣的含量，并對(duì)其相對(duì)擴(kuò)展不確定度進(jìn)行了評(píng)定。

丙酸鈣作為防腐劑可以添加在焙烤類食品中，限量為2.5g/kg（以丙酸計(jì)）。高效液相色譜法（HPLC）是測(cè)定食品中丙酸鈣的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法。測(cè)量不確定度是與測(cè)量結(jié)果相聯(lián)系的參數(shù)，用于表征賦予被測(cè)量之值的分散性。當(dāng)測(cè)量結(jié)果處于臨界值時(shí)食品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)必須進(jìn)行測(cè)量不確定度評(píng)定。本文對(duì)HPLC法測(cè)定面包中丙酸鈣含量的不確定度因素進(jìn)行了評(píng)定，計(jì)算出不確定度并報(bào)告了結(jié)果。

1 儀器、試劑、色譜分析條件

1.1 儀器

高效液相色譜儀，島津LC-20AT，附紫外檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器；高速冷凍離心機(jī)，北京雷勃爾LR10-2.4A；超聲波清洗器，昆山市超聲儀器KQ-100；高速組織搗碎機(jī)，上海精科DS-1；pH計(jì)，上海儀電科學(xué)PHS-3C；電子天平，上海上天FA2004；溶劑過濾器及0.45μm微孔濾膜。

1.2 試劑

分析純磷酸（H3PO4）、分析純磷酸氫二銨[（NH4）2HPO4]、實(shí)驗(yàn)室用超純水、食品添加劑丙酸鈣純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（GBW（E）100078）。

1.3 色譜分析條件

色譜柱：Agilent ZORBAX SB-Aq 4.6×250mm，5μm，P.N.880975-914；流動(dòng)相：1.5g/L；磷酸氫二銨溶液，用1mol/L磷酸溶液調(diào)pH為3.0（使用時(shí)配制）；經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾；流速：1.0mL/ min；柱溫：25℃；進(jìn)樣量：10μL；紫外檢測(cè)器波長(zhǎng)：214nm。

2 樣品處理與標(biāo)準(zhǔn)溶液曲線的繪制

依據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 5009.120-2016進(jìn)行試驗(yàn)。

2.1 樣品制備

將面包樣品經(jīng)組織搗碎機(jī)搗碎混勻，準(zhǔn)確稱取以上樣品5g（精確至0.0001g）至100mL燒杯中，加水20mL，加入1mol/L磷酸溶液0.5mL，混勻；經(jīng)超聲浸提10min后，用1mol/L磷酸溶液調(diào)pH為3左右，轉(zhuǎn)移試樣至50mL容量瓶中，用水定容至刻度，搖勻。將試樣全部轉(zhuǎn)移至50mL具塞塑料離心管中，以不低于4000r/min的速度離心10min，取上清液，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾后，待液相色譜測(cè)定。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制

準(zhǔn)確吸取5.0mL丙酸標(biāo)準(zhǔn)貯備液（10mg/mL）于50mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，配制成濃度為1.0mg/mL標(biāo)準(zhǔn)工作液。再準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)工作液0.2mL、0.5mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL至10mL容量瓶中，分別加入1mol/L磷酸0.2mL，用水定容至10mL，混勻。其丙酸標(biāo)準(zhǔn)溶液的最終濃度分別為0.02mg/mL、0.05mg/mL、0.1mg/ mL、0.2mg/mL、0.3mg/mL、0.4mg/mL、0.5mg/mL，經(jīng)0.45μm微孔濾膜過濾，濃度由低到高進(jìn)樣分析，以濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

報(bào)告結(jié)果：1.08±0.05g/kg（k=2）

不確定度表達(dá)測(cè)量結(jié)果的分散程度，是一個(gè)定量的概念，可以用定量的數(shù)字描述。本文對(duì)H P L C法測(cè)定面包中丙酸鈣含量的不確定度因素進(jìn)行了評(píng)定，若檢測(cè)結(jié)果處于標(biāo)準(zhǔn)限量的臨界值或標(biāo)準(zhǔn)方法有要求時(shí)，必須結(jié)合不確定對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行評(píng)判。