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    大豆水溶性蛋白質(zhì)測定的影響因素

    2018-06-06 08:30:43馬邯生周香菊
    現(xiàn)代食品 2018年1期
    關(guān)鍵詞:水溶性大豆蛋白質(zhì)

    ◎ 馬邯生,林 婧,馬 雪,范 靜,周香菊

    (1.河北工程大學(xué)生命科學(xué)與食品工程學(xué)院,河北 邯鄲 056001;2.河北工程大學(xué)園林與生態(tài)工程學(xué)院,河北 邯鄲 056001)

    大豆制成品種類繁多,具有很高的營養(yǎng)價值,深受人們喜愛。大豆的營養(yǎng)價值主要體現(xiàn)在其豐富的蛋白質(zhì)含量上,這些蛋白質(zhì)90%以上都能溶于水,被稱為水溶性蛋白質(zhì),能夠被溶解是蛋白質(zhì)可以進(jìn)行加工利用的一個重要特性。由于存儲時間的長短會影響其蛋白質(zhì)的含量,因而對大豆中水溶性蛋白質(zhì)進(jìn)行測定具有重要意義。對蛋白質(zhì)的測定主要分為兩大類:①利用蛋白質(zhì)的共性,如含氮量、折射率等。②利用蛋白質(zhì)中堿性基團(tuán)、特定的氨基酸等進(jìn)行測定。常見的方法有凱氏定氮法、酚試劑法、光度比色法等,目前國際上最常采用的是凱氏定氮法,其優(yōu)點(diǎn)在于測定方法最為簡便、有機(jī)氮的測定最準(zhǔn)確[1]。本文也將采用企業(yè)測定水溶性蛋白質(zhì)含量的標(biāo)準(zhǔn)方法——凱氏定氮法,研究分析影響水溶性蛋白質(zhì)測定的影響因素。

    1 測定材料及測定方法

    1.1 基本實(shí)驗(yàn)材料

    全自動凱氏定氮儀、糧食粉碎機(jī)、60目篩、振蕩器、電子秤(精度0.01 g)、離心機(jī)、大豆樣品(產(chǎn)地東北)、濃硫酸、30%過氧化氫、250 mL容量瓶、500 mL帶塞錐形瓶。

    1.2 測定方法

    凱氏定氮法是通過測定大豆樣品中的總含氮量,將其與相應(yīng)的蛋白質(zhì)系數(shù)相乘得出蛋白質(zhì)含量,具體公式為:

    式(1)中:V1為滴定樣品溶液所消耗鹽酸的體積,V2為空白溶液消耗鹽酸的體積,C為鹽酸溶液的濃度,0.014 0為每毫克當(dāng)量氮的質(zhì)量,m為試樣的質(zhì)量,6.25為氮換算為蛋白質(zhì)的平均系數(shù)。

    2015年出臺的《大豆存儲品質(zhì)判定規(guī)則》中有“在25~30 ℃溫度條件下振蕩2 h”的要求,因此本文的實(shí)驗(yàn)研究將遵循這一要求,在此基礎(chǔ)上,探索不同條件對于大豆中水溶性蛋白質(zhì)測定的影響[2]。

    2 結(jié)果與分析

    將準(zhǔn)備好的大豆樣品用糧食粉碎機(jī)碾碎,精細(xì)度要以能通過60目篩為準(zhǔn),備用。取5 g樣品置于500 mL帶塞錐形瓶中,加水至200 mL搖勻振蕩一段時間倒入250 mL容量瓶中,加水至250 mL靜置2 min。取靜置后的上層溶液倒入離心管中進(jìn)行離心處理,收集離心過濾后的溶液作為實(shí)驗(yàn)用水溶性蛋白質(zhì)的測定溶液[3]。

    2.1 不同振蕩頻率對大豆水溶性蛋白質(zhì)測定的影響

    取5 g測定溶液置于500 mL帶塞錐形瓶中,加水至200 mL,搖晃使測定溶液均勻分布,在溫度保持25 ℃恒溫、其他條件不變的情況下,分別采用不同的振蕩頻率振蕩2 h,實(shí)驗(yàn)振蕩頻率設(shè)定為100、120、150、180、220、240 r/min,結(jié)果見表1。

    表1 振蕩頻率對水溶性蛋白質(zhì)測定的影響表

    從表1可以看出,基本上隨著振蕩頻率的增加,水溶性蛋白質(zhì)含量也在不斷增加。在100~150 r/min,隨著振蕩頻率的變化,水溶性蛋白質(zhì)含量增長幅度較為明顯,上升趨勢大;在150~180 r/min,水溶性蛋白質(zhì)含量隨振蕩頻率變化的趨勢減緩,增長幅度較?。划?dāng)振蕩頻率在180~240 r/min,水溶性蛋白質(zhì)含量變化不明顯,已經(jīng)基本上處于平穩(wěn)狀態(tài)[4]。

    2.2 不同測定溫度對大豆水溶性蛋白質(zhì)測定的影響

    在這一組實(shí)驗(yàn)中,統(tǒng)一保持180 r/min的振蕩頻率,其他條件不變,采用不同的實(shí)驗(yàn)溫度控制,分別為18、21、25、28、31、35 ℃,來測定溫度對于水溶性蛋白質(zhì)測定的影響[5],最終結(jié)果見表2。

    表2 不同溫度對于水溶性蛋白質(zhì)測定的影響表

    由表2可知,隨著溫度逐漸升高,水溶性蛋白質(zhì)的含量也在不斷增加,當(dāng)溫度在18~25 ℃時,水溶性蛋白質(zhì)含量隨著溫度的升高變化較為明顯,測定含量增加幅度較大,相同的比例份數(shù)下增長了2.3個百分點(diǎn);而當(dāng)溫度在25~28 ℃時,水溶性蛋白質(zhì)含量的變化相對之前已經(jīng)不是很明顯了,增長幅度也有限;當(dāng)溫度在28~35 ℃時,這種變化的趨勢已經(jīng)基本接近平穩(wěn),雖也有增長,但幅度很小。

    由此可以得出結(jié)論,不同的溫度對水溶性蛋白質(zhì)的測定是有影響的,這種影響具體表現(xiàn)為:水溶性蛋白質(zhì)的含量會隨著溫度的升高而增加。通過實(shí)驗(yàn)可以確定,在綜合成本、時間以及其他因素時,溫度在25~28 ℃對大豆的水溶性蛋白質(zhì)的測定是最為有利的。

    2.3 樣品的精細(xì)程度對大豆水溶性蛋白質(zhì)測定的影響

    在這一組實(shí)驗(yàn)中,取之前制作的通過60目篩的樣品溶液一份,再另制作通過20、40目篩的樣品溶液,制作過程如上,控制其他流程相同。分別取這3種樣品溶液置于500 mL帶塞錐形瓶中,保持溫度恒定25 ℃、振蕩頻率180 r/min的條件下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)測定,最終結(jié)果見表3。

    表3 不同的精細(xì)程度對水溶性蛋白質(zhì)測定的影響表

    由表3可知,精細(xì)程度對于水溶性蛋白質(zhì)測定的影響比較大。隨著試驗(yàn)用篩的目數(shù)增加,精細(xì)程度隨之增大,水溶性蛋白質(zhì)含量也就越高。因此,可以確定,在實(shí)驗(yàn)常用的這3種標(biāo)準(zhǔn)篩下,為了能夠得到更好的水溶性蛋白質(zhì)測定結(jié)果,最好采用60目篩進(jìn)行實(shí)驗(yàn)測定。

    3 結(jié)語

    通過以上的實(shí)驗(yàn)研究可以得出結(jié)論,振蕩頻率的不同、溫度的不同以及實(shí)驗(yàn)用樣品的精細(xì)程度不同,都會對大豆中水溶性蛋白質(zhì)的測定結(jié)果產(chǎn)生影響。通過樣品溶液的測定研究得出的最佳的振蕩頻率為180 r/min、最佳的溫度條件為25~28 ℃、采用的試驗(yàn)用篩目數(shù)為60目。由于時間、實(shí)驗(yàn)儀器以及實(shí)驗(yàn)條件的一些限制,本文僅從振蕩頻率、溫度以及樣品的精細(xì)程度3方面進(jìn)行實(shí)驗(yàn)測定,是否還存有其他的影響因素會對大豆中水溶性蛋白質(zhì)的測定產(chǎn)生影響還需進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。

    [1]姜友軍,付愛華,楊 超,等.大豆水溶性蛋白質(zhì)測定的影響因素探討[J].糧食儲藏,2016,45(6):32-35.

    [2]費(fèi)孟陽.幾種糧油檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)的探討[J].科學(xué)與財富,2015,7(12):569.

    [3]朱 玫,劉子豪,劉 利,等.大米中水溶性蛋白質(zhì)的測定方法及影響因素探討[J].糧食與飼料工業(yè),2015,12(7):64-67.

    [4]陳 強(qiáng),雷雅坤,閆 龍,等.利用雙尾法定位大豆水溶性蛋白QTL[J].華北農(nóng)學(xué)報,2014(4):80-86.

    [5]王婷婷.蛋白質(zhì)的水解與抗氧化性的關(guān)系研究[D].廣州:暨南大學(xué),2016.

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